一种以子叶为外植体的黄连木植株再生方法技术

本发明专利技术公开了一种以子叶为外植体的黄连木植株再生方法，将饱满的黄连木种子去掉外面硬种皮，经过消毒后进行漂洗，接种在实生苗生长培养基上，得黄连木无菌实生苗，再取生长12-18d的黄连木无菌实生苗，在无菌超净台内沿胚轴中轴线纵切以切取子叶，将获得的两片子叶分别接种在子叶诱导培养基上，培养12-16d后，得幼芽，将幼芽切下转移至丛生芽增殖培养基，得诱导的丛生芽，然后将丛生芽切取转移至生根培养基，诱导生根，从而获得完整的黄连木植株。利用本发明专利技术进行再生繁殖，不仅再生效率高、出现变异的几率极低，而且为黄连木进行分子遗传改良提供了技术支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及现代生物
，确切地说是一种以子叶为外植体的黄连木植株高效再生方法。
技术介绍
黄连木是我国发展生物柴油产业首选的木本能源植物，在我国大部分地区均可生长和种植，适于在边际土地上生长。其种子含油率可达42.5%，出油率达20%-30%。以黄连木油为原料生产的生物柴油油质好。因此，黄连木被国家列为“十一五”期间重点开发的主要生物质能源树种，极具发展潜力。种子育苗是目前黄连木的主要育苗方法，然后进行移栽。由于黄连木属深休眠类型，必须进行低温沙藏100天以上和脱蜡处理等才能发芽。即便如此，其发芽率也在40%以下，而且种子是榨取生物柴油原料油的部位，利用种子直接发芽繁殖效率较低，而且对一些优良种质无法进行快速繁殖和推广，远不能满足对种苗的需求及黄连木产业的快速发展。 另外，由于没有一个高效的再生体系，使得黄连木在分子遗传改良方面处于一片空白。因此，急需开发一种黄连木高效再生的方法，以满足当前黄连木大量种苗的需求及分子遗传改良的需要。黄连木子叶再生是指从实生苗培养基上获得无菌苗，然后切取子叶，并沿胚轴中轴线纵切，将获得的两片子叶分别接种在子叶诱导培养基上，经过两周左右培养，切本文档来自技高网...

【技术保护点】
＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＰＶＰ２ｇ／Ｌ＋葡萄糖２０ｇ／Ｌ＋琼脂粉８ｇ／Ｌ，ｐＨ＝５．８－６．０。芽增殖培养基是指：１／２ＷＰＭ＋ＤＫＷ＋６－ＢＡ３．０ｍｇ／Ｌ＋　ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＧＡ０．５　ｍｇ／Ｌ　＋ＰＶＰ２ｇ／Ｌ＋葡萄糖２０ｇ／Ｌ＋琼脂粉８ｇ／Ｌ，ｐＨ＝５．８－６．０；所述的生根培养基是指：１／２ＷＰＭ＋ＩＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ１／２ＤＫＷ基本培养基，不添加任何激素；所述的子叶诱导培养基是指：１／２ＷＰＭ＋ＤＫＷ＋６－ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋　ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＧＡ０．５　ｍｇ／Ｌ　＋ＰＶＰ２ｇ／Ｌ＋葡萄糖２０ｇ／Ｌ＋琼脂粉８ｇ／Ｌ，ｐＨ＝５．８－６．０；所述丛生纵切以切取子叶，将获得的...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴丽芳，李明浩，
申请(专利权)人：中国科学院合肥物质科学研究院，
类型：发明
国别省市：34