一种以叶片为外植体的红马银花组织培养方法技术

本发明专利技术公开一种以叶片为外植体的红马银花组织培养方法。该方法包括外植体的采集和预处理、灭菌和接种、愈伤组织诱导培养、芽诱导培养、继代培养、炼苗和移栽。本发明专利技术方法能够促使红马银花愈伤组织顺利生根，其组培苗生根率达到80％以上，根长苗壮，移栽成活率达到90％以上。

【技术实现步骤摘要】
一种以叶片为外植体的红马银花组织培养方法
本专利技术涉及一种以叶片为外植体的红马银花组织培养方法。
技术介绍
红马银花(RhododendronvialiiDelavayetFranch.)属于杜鹃花科，杜鹃花属的马银花亚属，为常绿灌木。红马银花由于种子较少，有性繁殖出苗率极低，组培时生根困难，种苗难以满足市场需求。说明书本专利技术提供一种以叶片为外植体的红马银花组织培养方法，该方法通过改良组织培养方法，使红马银花组培丛生芽能正常生根，从而达到快速繁育种苗的目的。本专利技术所述的一种以叶片为外植体的红马银花组织培养方法，包括如下步骤：(1)外植体的采集和预处理采集无病虫害的野生红马银花带叶茎段，清水冲洗，在茎段上切取叶片；(2)灭菌和接种将清洗干净的红马银花叶片在超净工作台上按下列顺序进行灭菌：质量分数为0.1％HgCl2溶液中消毒5min，无菌水清洗4-5次，质量分数为2％NaClO溶液中灭菌5min，无菌水清洗4-5次，无菌滤纸吸干表面水分，然后将叶片切成0.8-1.0cm长的片段，接种在基础培养基上，所述基础培养基为：WPM+蔗糖20-30g/L+琼脂5-8g/L，pH5.3-本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种以叶片为外植体的红马银花组织培养方法，包括如下步骤：(1)外植体的采集和预处理采集无病虫害的野生红马银花带叶茎段，清水冲洗，在茎段上切取叶片；(2)灭菌和接种将清洗干净的红马银花叶片在超净工作台上按下列顺序进行灭菌：质量分数为0.1％HgCl2溶液中消毒5min，无菌水清洗4‑5次，质量分数为2％NaClO溶液中灭菌5min，无菌水清洗4‑5次，无菌滤纸吸干表面水分，然后将叶片切成0.8‑1.0cm长的片段，接种在基础培养基上，所述基础培养基为：WPM+蔗糖20‑30g/L+琼脂5‑8g/L，pH 5.3‑5.5；(3)愈伤组织诱导培养将步骤(2)接种的叶片转接到叶片愈伤组织培养基中，在温...

【技术特征摘要】
1.一种以叶片为外植体的红马银花组织培养方法，包括如下步骤：(1)外植体的采集和预处理采集无病虫害的野生红马银花带叶茎段，清水冲洗，在茎段上切取叶片；(2)灭菌和接种将清洗干净的红马银花叶片在超净工作台上按下列顺序进行灭菌：质量分数为0.1％HgCl2溶液中消毒5min，无菌水清洗4-5次，质量分数为2％NaClO溶液中灭菌5min，无菌水清洗4-5次，无菌滤纸吸干表面水分，然后将叶片切成0.8-1.0cm长的片段，接种在基础培养基上，所述基础培养基为：WPM+蔗糖20-30g/L+琼脂5-8g/L，pH5.3-5.5；(3)愈伤组织诱导培养将步骤(2)接种的叶片转接到叶片愈伤组织培养基中，在温度25℃±2℃，暗培养至有愈伤组织出现，所述叶片愈伤组织培养基：WPM+6-BA1.8-2.2mg/L+2,4-D2.8-3.2mg/L，pH5.3-5.5；(4)芽诱导培养将步骤(3)形成的愈伤组织接种到芽诱导和继代培养基中，在光照强度1400-1800Lx、光照时间12h/d、温度25±2℃的条件下培养诱导形成丛生芽，所述芽诱导和继代培养基为：WPM+ZT0.8...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙永玉，闫红，李昆，唐国勇，刘方炎，张春华，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院资源昆虫研究所，
类型：发明
国别省市：云南;53