一种止血微孔淀粉及其酶穿孔制法制造技术

本发明专利技术公开了一种止血微孔淀粉及其酶穿孔制法。该止血微孔淀粉以甘薯淀粉原料，经酶穿孔法制备微孔淀粉，然后将微孔淀粉进行交联制得。薯淀粉与酶的重量比为每１００份的甘薯淀粉中加入０．５～１．２份酶。本发明专利技术还公开了该止血微孔淀粉的制备方法。本发明专利技术制得的微孔淀粉表面积大，吸水率是现有止血材料的数倍，吸水速度明显提高，明显地提高了止血效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医用药剂，具体地说，本专利技术是一种止血微孔淀粉。 本专利技术还涉及该淀粉的制备方法。
技术介绍
目前，止血是临床治疗的重要组成部分，大血管和软组织一般性 出血现有较可靠的止血方法，但对实质性脏器创面出血的治疗仍然是 外科领域面临的难题。实质性脏器脆性大、血流量十分丰富(如脑、 肾脏、肝脏、脾脏)，缝扎等止血对控制其中大血管出血是必要的，但同时极易导致组织切割破损，造成裂口出血或针眼出血；另外，缝 扎止血对脏器创面广泛渗血不仅难以奏效，而且会使被缝扎组织发生 缺血，可影响脑、肾、肝等重要脏器功能。 目前几种主要的止血材料1. 可吸收性明胶海绵或粉末(Collagen hemostatic sponge or powder)主要成分为动物胶原，其亲水性和多孔特性使其能迅速浓縮血 液，同时促进内源性凝血通路从而达到促进止血的目的。但是明胶海 绵对于人体属于异种蛋白(牛、猪组织提取物)，具有一定的抗原性 和致敏性。在人体吸收慢，使创口延迟愈合，并有增加创面感染之虞。 代表产品Gelfoam、 INSTAT MCH Microfibrillar Collagen Hemostat、 Helistat等。2. 氧化再生纤维素(Oxidized regenerated cellulose ORC)氧化纤维素是一种纤维素的衍生物，有很强的吸水性，同样通过浓縮血液达到促进止血的目的，另外，其成分中的梭基可与血红素中 二价铁结合，形成三价铁血红蛋白，并形成团块，促进出血血管的封 堵。其缺点仍然是人体吸收较慢，有延迟创口愈合，增加感染的风险。代表产品Surgicel Fibrillar absorbable hemostat等。3. 纤维蛋白原、凝血酶(Thrombin, Fibrinogen) 成分由纤维蛋白原、凝血酶、凝血因子等组成。主要是通过较强的吸水性，浓縮血液和促进第三阶段的凝血过程达到止血的目的。代 表产品FloSeal、 Plasmaseal、 FibRx、 Tisseel等。4. 人造水凝胶(Synthetic hydrogel)主要成分可以为聚乙二醇聚合物(Polyethylene glycol (PEG) polymer)、牛血清白蛋白等，使用时需要使用双筒注射器临时混合， 形成粘稠的水凝胶，从而达到封堵血管止血的目的。代表产品5.多聚糖类产品主要成分为多聚糖，生物相容性较好，无毒、刺激性小，在体内 吸收较快。通过对淀粉进行交联、变形等方式制造，主要作用机制仍 然是吸收血液中水分，使血液成分浓縮达到止血目的。但其吸水性仍 不够高，价格昂贵。代表产品Arista等。
技术实现思路
本专利技术克服了上述缺点，提出了一种止血微孔淀粉(porous hemostatic starch,以下又简称为PHS)及其酶穿孔制法。 为实现上述的专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案 一种止血微孔淀粉，以甘薯淀粉原料，经酶穿孔法制备微孔淀粉， 然后将微孔淀粉进行交联制得。CoSeal、 FocalSeal-L、 BioGlue所述的酶穿孔法制备微孔淀粉步骤中，所用的酶为a -淀粉酶。 甘薯淀粉与酶的重量比为每100份的甘薯淀粉中加入0.5 1.2份酶。优先选择的比例是每100份的甘薯淀粉中加入1.0份酶。上述的止血微孔淀粉的制备方法，采用以下步骤以甘薯淀粉原料，先以酶穿孔法制备微孔淀粉，再将微孔淀粉交联，即得止血微孔淀粉。其中，制备微孔淀粉和微孔淀粉交联两个步骤采用 酶穿孔法制备微孔淀粉将淀粉酶用缓冲液配成酶液，与干基甘 薯淀粉的醋酸钠缓冲液反应20 24小时，产物干燥、粉碎后，即得微孔淀粉；微孔淀粉交联:将微孔淀粉进行调浆，维持pH值恒定在11.2-11.5 范围；将调浆得到的悬浮液离心分离3次后进行干燥、消毒后，即得 止血微孔淀粉。采用以下重量比例的原料进行所述的调浆每500ml蒸馏水中溶 有12g三偏磷酸钠和6g碳酸钠，对200g微孔淀粉进行调浆。所述的 消毒是以Co60辐照进行消毒。本专利技术具备如下的优点本专利技术制得的微孔淀粉表面积大，吸水率是现有止血材料的数 倍，吸水速度明显提高，明显地提高了止血效果。 附图说明图1是本专利技术的淀粉表面电镜图。该图1中，淀粉表面有多个孔 径基本相同的孔道，明显增加淀粉颗粒的表面积(SEM X 6000)。图2是本专利技术所述的Arista表面电镜图。该图1中，Arista表面 有多个裂隙结构，无明显孔道，体积约为PHS的2-3倍(SEMX 1000)。图3是肾脏作lcmX0.5cm切口后，血液迅速涌出时的图。 图4是实验组经压迫约50s后，取走纱布，肾脏切口出血情况图。具体实施方式 实施例1多孔止血淀粉(porous hemostatic starch， PHS)的制备方法主要原料采用甘薯淀粉，甘薯的主要成分是淀粉，约占鲜薯重量 的18% —25%，甘薯淀粉颗粒呈椭圆形，结构较疏松，表面积大， 是制作微孔淀粉的理想原料。微孔淀粉是一种新型的变性淀粉，它是 将天然生淀粉经过酶水解处理以后，在其颗粒表面形成蜂窝状多孔性 的淀粉颗粒。淀粉颗粒直径约为5-50/mi，内部有多个孔道结构，孔 径约为0.5-5/mi，孔的容积占颗粒体积的60。％左右。酶穿孔法制备微孔淀粉取100g甘薯淀粉(干基)，置于500 ml 烧杯中，加入pH值为4.7的醋酸钠缓冲液200ml，置于45C的恒温 水浴锅中预热20分钟，同时用电动搅拌机搅拌。精确称取lg的a -淀粉酶，用缓冲液配成酶液，将酶液全部转移到淀粉悬浮液中并准确 计时，搅拌反应20小时后，停止反应，将悬浮液在3000r / min下离 心5分钟并把上清液量取体积后移入容量瓶中待测定用。剩余淀粉用 蒸馏水洗涤并离心，如此重复3次后，将所得淀粉置于恒温鼓风干燥 箱中45C干燥至恒重，用粉碎机粉碎后，即得微孔淀粉。微孔淀粉的交联取200 g微孔淀粉(干基)于1000ml烧杯中， 加入溶有12g三偏磷酸钠、6g碳酸钠的蒸馏水500ml调浆，置于50 C恒温水浴锅中，在电动搅拌机匀速搅拌预热10ndn，用1.0mol/L 的NaOH溶液调pH值为11.5，搅拌反应24 h，在此过程中用NaOH 溶液维持pH值恒定在11.2-11.5范围。反应结束后，用1.0 mol / L HCI中和掉过量的碱。将悬浮液离心分离(3000r/min)，取沉淀的淀粉用 蒸馏水洗涤后再离心，如此重复3次，将所得淀粉于鼓风干燥箱中在 40。C下干燥至恒重，研碎后即得交联微孔淀粉。多孔止血淀粉经Co60 辐照消毒后，密封保存备用。 止血效能测定与比较实验动物及分组成年健康家兔50只(第三军医大学动物实验中 心提供)，体重2.5-3kg，雌雄不限，实验组和对照组，每组各25只， 每个压迫时间段内各5只。每只家兔两侧肾脏作长lcm,深0.5cm大 小出血创面，随机用PHS对出血创面进行止血，以Arista止血粉对 另一侧创面的止血为对照。实验组为PHS应用组，对照组为Arista 止血粉应用组。实验方法及观察指标出血模型制作3%戊巴比妥钠注射液(30-40mg/kg)沿家兔耳沿 静脉注射麻醉，在实验台上固定好家兔，无菌操作逐层开腹，暴露家 兔肾脏，用手术刀片随机在肾脏不同位置作二纵向本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种止血微孔淀粉，其特征在于：以甘薯淀粉原料，经酶穿孔法制备微孔淀粉，然后将微孔淀粉进行交联制得。

【技术特征摘要】
1.一种止血微孔淀粉，其特征在于以甘薯淀粉原料，经酶穿孔法制备微孔淀粉，然后将微孔淀粉进行交联制得。2. 根据权利要求1所述的止血微孔淀粉，其特征在于所述的 酶穿孔法制备微孔淀粉步骤中，所用的酶为a -淀粉酶。3. 根据权利要求1或2所述的止血微孔淀粉，其特征在于甘薯淀粉与酶的重量比为每100份的甘薯淀粉中加入0.5~1.2份酶。4. 根据权利要求3所述的止血微孔淀粉，其特征在于甘薯淀 粉与酶的重量比为每100份的甘薯淀粉中加入1.0份酶。5. 权利要求1所述的止血微孔淀粉的制备方法，其特征在于，采用以下步骤以甘薯淀粉原料，先以酶穿孔法制备微孔淀粉，再将微孔淀粉交联，即得止血微孔淀粉。6...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄赤兵，冯嘉瑜，张银甫，余雪松，
申请(专利权)人：中国人民解放军第三军医大学第二附属医院，
类型：发明
国别省市：85[中国|重庆]