【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学领域的聚合酶链式反应(PCR)扩增，尤其是一种应用有机溶剂为优化剂增强高GC含量DNA片段扩增效率的方法。
技术介绍
PCR技术是在核酸研究的基础上发展起来的，自1930年正式提出DNA和RNA两种核酸的概念后，人们对核酸的化学组成、结构及其功能进行了更为深入的研究，1953年 Watson和Crisk根据X —射线衍射图形及各种化学分析数据提出的DNA双螺旋结构及其半保留复制模型，是生物科学史上的一个飞跃，使得对基因在体外克隆、表达、调控等方面取得了长足的进展，并由此拉开基因工程的序幕。随着大量科学家的不断研究，在1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mul 1 is等专利技术了具有划时代意义的聚合酶链式反应 (PCR)。但是聚合酶链式反应(PCR)发展到今天已经有20多年的时间了，随着技术不断的发展、进步，PCR已经成为分子生物学研究中不可缺少的一项实验技术，并广泛应用于遗传学、微生物学、乃至整个生命科学领域的研究中。但是自PCR建立以来，在实际应用中也表现出了它所具有的不足，尤其是针对GC含量很高的序列更是不容易得到理想...
【技术保护点】
１．一种有机溶剂增强高ＧＣ含量ＤＮＡ片段扩增效率的方法，包括（１）．待扩增ＤＮＡ的提取、（２）．ＰＣＲ体系的配置及优化、（３）．ＰＣＲ条件的设定与运行、（４）．ＰＣＲ产物电泳检测，其特征在于：ＰＣＲ体系的优化是在ＰＣＲ反应体系中添加有机溶剂，ＰＣＲ产物的电泳检测采用１％琼脂糖凝胶，跑胶后用ＥＢ液染色，然后用紫外分光透射仪观察扩增片段在凝胶中的位置，并与相应的分子量标准做对照，所述有机溶剂为乙二醇，其添加量为１５μＬ ＰＣＲ反应液加入１．５μＬ的乙二醇。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张治洲，杨霞，刘芳，孟良玉，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：12
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