本发明专利技术公开了一种抗类风湿性关节炎的多肽，所述多肽的氨基酸序列由SEQ?ID?NO.9所示。应用本发明专利技术的多肽注射大鼠，然后人工诱导动物关节炎症。结果表明，被注射多肽的大鼠内产生了相应抗体，血管内皮生长因子浓度同时相应降低，90％以上的大鼠注射II型胶原后不再出现类风湿性关节炎症状。组织病理学分析表明，实验动物病变关节内的血管增生明显减少，VEGF水平降低。表明本发明专利技术的多肽可以通过免疫干预方式抑制类风湿关节炎关节滑膜毛细血管增生，阻断滑膜细胞增殖的营养途径和T细胞渗入途径，抑制组织炎症和组织损伤，从而抑制类风湿关节炎过程病变进程，并能开发为抗类风湿关节炎药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一类多肽及其制药应用，尤其涉及一类抗类风湿性关节炎的多肽及其在制药中的应用。
技术介绍
硫氧还蛋白家族定位在细胞内质网上，具有蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase, PDI)功能。PDI对细胞异常分化，毛细血管增生及抗氧化损伤起着重要作用。硫氧还蛋白5(thiredoxin domain containing 5，TXNDC5)位于人6号染色体上(6p24. ；3)，其编码的二硫化物异构酶含有PDI结构，在缺氧的状况下高表达，催化蛋白质二硫键异构过程。有人用蛋白质组学方法发现TXNDC5在肝细胞癌，结直肠癌等肿瘤组织表达，在组织低氧的环境下对内皮细胞起到保护的作用。类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种自我免疫疾病，临床表现为慢性、多滑膜关节炎。RA病理学表现为关节滑膜严重炎症，组织增厚，滑膜内T细胞大量渗入，B细胞和滑膜纤维状细胞异常增生，毛细血管大量生成，解剖学上称之为血管翳。本专利技术人利用蛋白质组学技术比较RA、骨性关节炎(osteoarthritis，OA)和强直性脊柱炎 (ankylosing spondilitis, AS)病变滑膜组织的蛋白表达谱，发现TXNDC5在RA的滑膜组织中显著性高表达。免疫组化、western blotting和定量PCR方法在转录和蛋白水平上均证实了 TXNDC5在RA关节滑膜组织细胞中的特异性高表达。此外，本专利技术人用酶联免疫分析方(ELISA)发现，与OA、AS患者相比，53. 3% RA患者的血液和73. 3% RA患者的关节滑液中TXNDC5的表达量增加两倍或两倍以上，显示TXNDC5可能与RA发病过程有关。基于上述发现，本专利技术人就TXNDC5对RA的致病机制进行了研究。许多研究证明， RA病变关节为低氧环境，RA本质上具有低氧特性，并表现出氧化应激反应。本专利技术人发现，RA低氧条件下诱导滑膜TXNDC5高表达。高浓度的TXNDC5可以上调RA滑膜血管内皮生长因子VEGF表达，VEGF刺激滑膜组织毛细血管增生，形成血管翳。血管翳是RA滑膜病变的重要组织学特征。正是由于血管翳的生成，T细胞得以向滑膜组织大量渗入造成炎症，同时，病变组织获得充足的营养支持B细胞和纤维状细胞大量增殖。鉴于此，TXNDC5 可成为潜在的RA治疗靶点。通过抑制TXNDC5酶活性，可抑制RA滑膜组织毛细血管生成， 从而阻断病变滑膜细胞增生的营养途径和T细胞转移途径，达到杀伤RA滑膜细胞和抑制炎症过程的治疗RA目的。参考文献1. Sullivan DC, Huminiecki L, Moore Jff, et al. EndoPDI, a novel protein-disulfide isomerase-Like protein that is preferentially expressed in endothelial cells acts as a stress survival factor. J Biol Chem,2003,278 47079-47088.2. Wang Y, Ma Y, LiiB, et al. Differential expression of mimecan and thioredoxin domain-containing protein 5in colorectal adenoma and cancer :a proteomic study. Exp Biol Med(Maywood),2007,232 :1152-9.3. Chang X, Cui Y,Zong M,et al. Identification of proteins with increased expression in rheumatoid arthritis synovial tissues. J Rheumatol,2009,36 872-880.4Distler JH, Wenger RH, Gassmann M, et al. Physiologic Responses to Hypoxia and Implications for Hypoxia-Inducible Factors in the Pathogenesis of Rheumatoid Arthritis. Arthritis Rheum,2004, 50 :10-23.5. Tak PP, Zvaifler NJ, Green DR, et al. Rheumatoid arthritis and p53 :how oxidative stress might alter the course of inflammatory diseases. Immunol Today, 2000,21 :78-82.6.Hitchon CA, El-Gabalawy HS. Oxidation in rheumatoid arthritis. Arthritis Res Ther，2004，6 :265-78.
技术实现思路
基于上述TXNDC5在RA发病过程中的关键作用，本专利技术的目的是提供一类抗类风湿性关节炎的多肽及其在制药中的应用。本专利技术所述抗类风湿性关节炎的多肽，其特征在于它是SEQ ID N0. 9所示的氨基酸序列；具体序列描述为Ser Leu His Ser Phe Val Leu Arg Gln Ala Lys Asp Glu Leu1510。上述抗类风湿性关节炎的多肽的合成方法为常规人工合成方法。根据免疫抑制的原理，对应TXNDC5不同区段的短肽，申请人设计了 9段TXNDC5多肽(即SEQ ID NO. 1 SEQ ID N0. 9所示的氨基酸序列)，按常规人工合成方法对9种多肽实施了合成，SEQ IDN0. 9所示的氨基酸序列的多肽即是其中的之一。上述抗类风湿性关节炎的多肽在制备抑制类风湿关节炎关节的血管翳生成药物中的应用。进一步的，上述抗类风湿性关节炎的多肽在制备抑制类风湿关节炎关节滑膜毛细血管增生、阻断滑膜细胞增殖的营养途径和T细胞渗入途径等抗类风湿性关节炎药物中的应用。上述的抗类风湿性关节炎的多肽在制备硫氧还蛋白5(TXNDC5)多克隆抗体或单克隆抗体中的应用。本专利技术研究思路是采用免疫治疗的途径，人为刺激RA患者免疫系统产生抗 TXNDC5抗体，利用抗原、抗体特异性结合原理，用抗TXNDC5抗体结合高表达的TXNDC5，从而抑制该酶活性，阻断毛细血管形成，达到治疗RA病程的目的。目前，已有的几个RA有效的生物制剂，如益塞谱^tanerapt)、类克等，皆是用RA炎症相关因子TNF (肿瘤坏死因子) 的抗体，通过向患者体内注射抗TNF抗体，结合RA高表达的TNF，抑制TNF的生物活性，阻断 RA炎症发展，获得RA治疗效果。本研究也按此RA治疗思路，首先以RA实验动物为模型，通过免疫干预治疗的方式，通过抑制TXNDC5生物功能，达到治疗RA目的。基本实施过程如下应用本专利技术所述按常规制备的TXNDC5各区段的9种短肽(即 SEQ ID N0.1 SEQ ID NO. 9所示的氨基酸序列)，分别将其注入大本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种抗类风湿性关节炎的多肽，其特征在于：它是ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ．９所示的氨基酸序列；具体序列描述为：Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｈｉｓ Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｌｙｓ Ａｓｐ Ｇｌｕ Ｌｅｕ１５ １０ 。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：常晓天，韩金祥，
申请(专利权)人：山东省医药生物技术研究中心，
类型：发明
国别省市：88
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