活化部分凝血酶时间测定试剂、活化部分凝血酶时间测定法及判断有无抗凝血物质的方法技术

本发明专利技术公开了一种可以不受受检血浆中所含外源性肝素影响、方便、准确地进行APTT测定的活化部分凝血酶时间测定试剂、活化部分凝血酶时间测定方法以及判断有无抗凝血物质的判断方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种活化部分凝血酶时间测定试剂、活化部分凝血酶时间测定法及判 断有无抗凝血物质的判断方法。
技术介绍
在接受凝血检查的患者中，有人用肝素作为治疗血栓的药物。打点滴时，为了防止 导管内发生凝血反应，有的患者使用向导管内填充了含肝素生理盐水的肝素锁导管。从这 些患者采集的受检血浆有时含有外源性肝素。使用此受检血浆测定活化部分凝血酶时间 (APTT)，凝血时间会因肝素影响而延长。美国专利第5262325号公开了一种消除受检血浆中所含外源性肝素对APTT测定 的影响的方法。根据此方法，用肝素中和剂中和受检血浆后，再测定APTT，以此消除受检血 浆中所含肝素的影响。然而，根据美国专利第5262325号记载的方法，需要事先向受检血浆 加入肝素中和剂。APTT测定工作因此而变得很烦琐。另外，根据美国专利第5262325号记 载的方法，进行APTT测定时，需要时常意识到受检血浆中存在肝素的可能性。特别是在医 疗现场，紧急测定APTT时，往往未确认受检血浆中有无外源性肝素就对APTT进行测定。近年来，在使用APTT测定试剂的交叉混合试验(cross mixing test)中，受 检血浆中所含外源性肝素的影响也成为一个问题(检查技术，vol. 34no. 82006年8月 p. 738-739)。交叉混合试验是通过测定受检血浆和正常血浆的混合血浆的凝血时间，检查 患者凝血因子是否缺损和受检血浆中有无抗凝血物质。如上所述，如果受检血浆中含有外 源性肝素，凝血时间就会延长。因此，如果在交叉混合试验中有受检血浆中所含的外源性 肝素的话，恐怕将无法正确查出内源性抗凝血物质的存在。
技术实现思路
本专利技术的范围只由后附的权利要求书所规定，在任何程度上都不受这一节专利技术内 容的陈述所限。专利技术人发现，预先在APTT测定试剂中加入肝素中和剂，可以不受受检血浆中所含 外源性肝素影响而方便、准确地进行APTT测定，从而完成了本项专利技术。本专利技术提供(1) 一种活化部分凝血酶时间测定试剂，包括肝素中和剂。通过上述(1)所述活化部分凝血酶时间测定试剂，可以提供一种能不受受检血浆 中所含外源性肝素的影响，而方便、准确地进行APTT测定的APTT测定试剂。(2)根据上述⑴所述活化部分凝血酶时间测定试剂，包括含有磷脂及活化剂的第一试剂；及含有肝素中和剂和钙盐的第二试剂。通过上述(2)的活化部分凝血酶时间测定试剂，可以提供一种能不受受检血浆中所含外源性肝素的影响，而方便、准确地进行APTT测定的高稳定性APTT测定试剂。(3)根据上述⑴所述活化部分凝血酶时间测定试剂，其特征在于，所述肝素中和 剂是凝聚胺。(4)根据上述(2)所述活化部分凝血酶时间测定试剂，其特征在于，所述钙盐是氯 化钙。(5)根据上述(2)所述活化部分凝血酶时间测定试剂，其特征在于，所述活化剂是 鞣花酸、胶体硅(colloidal silica)和无水硅酸中的至少其中之一。(6)根据上述(2)-(5)中任一项所述活化部分凝血酶时间测定试剂，其特征在于， 所述磷脂是磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱和磷脂酰甘油中的至少其中之一。(7) 一种用于将受检血浆与含磷脂和活化剂的试剂混合后测定活化部分凝血酶时 间的试剂，包括肝素中和剂；及钙盐。根据上述(7)的试剂，它是一种将受检血浆与含磷脂和活化剂的试剂混合后测定 APTT的试剂，可以提供给人们一种可不受受检血浆所含外源性肝素影响，方便、正确地进行 APTT测定的高稳定性试剂。(8)根据上述(7)所述试剂，其特征在于，所述肝素中和剂是凝聚胺。(9)上述(7)或(8)所述试剂，其特征在于，所述钙盐是氯化钙。(10) 一种活化部分凝血酶时间测定方法，包括第一混合步骤，将受检血浆与含有磷脂和活化剂的第一一试剂混合；第二混合步骤，将上述第一混合步骤获得的试样与含肝素中和剂和钙盐的第二试 剂混合；及测定步骤，测定在上述第二混合步骤获得的试样的凝固时间。根据上述(10)的活化部分凝血酶时间测定方法，可以提供一种不受受检血浆所 含外源性肝素影响，方便、准确且试剂稳定性高的APTT测定方法。(11)根据上述(10)所述活化部分凝血酶时间测定方法，其特征在于，所述肝素中 和剂是凝聚胺。(12)根据上述(10)所述活化部分凝血酶时引间测定方法，其特征在于，所述钙盐是氯化钙。(13)根据上述(10)所述活化部分凝血酶时间测定方法，其特征在于，所述活化剂 是鞣花酸、胶体硅和无水硅酸的至少其中之一。(14)根据上述(10)-(13)中任一项所述活化部分凝血酶时间测定方法，其特征在 于，所述磷脂是磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱和磷脂酰甘油中的至少其中之ο(15) 一种判断受检血浆中有无抗凝血物质的方法，包括制样步骤，将疑有上述抗凝血物质的受检血浆和正常血浆以至少三种不同比例混 合，制备测定试样；第一混合步骤，将在上述制样步骤获得的各种测定试样与含有磷脂和活化剂的第 一试剂混合；第二混合步骤，将在上述第一混合步骤获得的各种试样与含有肝素中和剂和钙盐 的第二试剂混合；测定步骤，测定在上述第二混合步骤获得的各种试样的凝固时间；及判断步骤，根据在上述测定步骤获得的各试样的上述凝固时间，判断上述受检血 浆中是否含有上述抗凝血物质。根据上述(15)的判断受检血浆中有无抗凝血物质的判断方法，可以不受受检血 浆所含外源性肝素影响，方便、准确、且试剂稳定性高地判断有无抗凝血物质。(16)根据上述(15)所述方法，其特征在于，所述判断步骤根据在所述测定步骤获 得的各试样的所述凝固时间，获取罗斯纳指数(ROSNER INDEX)值，根据获取的罗斯纳指数 值，判断所述受检血浆中有无所述抗凝血物质。(17)根据上述(15)所述方法，其特征在于，所述抗凝血物质是狼疮抗凝物、后天 性血友病、凝固因子抑制物或Cl失活因子。(18)根据上述(15)所述方法，其特征在于，所述肝素中和剂是凝聚胺。(19)根据上述(15)所述方法，其特征在于，所述钙盐是氯化钙。(20)根据上述(15)-(19)中任一项所述方法，其特征在于，所述活化剂是鞣花酸、 胶体硅和无水硅酸中的至少其中之一。附图说明图1为从用含凝聚胺的钙溶液进行活化部分凝血酶时间(APTT)测定所获得的 APTT计算出的罗斯纳指数值的柱状图。图2为从用不含凝聚胺的钙溶液进行活化部分凝血酶时间(APTT)测定所获得的 APTT计算出的罗斯纳指数值的柱状图。具体实施例方式本实施方式中的活化部分凝血酶时间(APTT)测定试剂含有肝素中和剂。APTT测 定试剂可以由含磷脂和活化剂的第一试剂及含肝素中和剂和钙盐的第二试剂组成，也可以 由含磷脂和活化剂的第一试剂、含钙盐的第二试剂和含肝素中和剂的第三试剂组成。在此， 第三试剂既可以在第一试剂添加后第二试剂添加前添加，也可以在第一试剂和第二试剂添 加后添加。此外，专利技术人发现，在APTT测定试剂中，通过向含有钙盐的试剂中添加肝素中和 剂，可以不产生沉淀、且不受受检血浆中所含肝素影响地进行APTT测定。因此，在本实施方 式中，含有肝素中和剂的APTT测定试剂构成，最好包括含有磷脂及活化剂的第一试剂和含 有肝素中和剂和钙盐的第二试剂。本实施方式中的活化部分凝血酶时间(APTT)测定试剂包括含磷脂和活本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种活化部分凝血酶时间测定试剂，包括肝素中和剂。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：吉田和代，奥田昌宏，
申请(专利权)人：希森美康株式会社，
类型：发明
国别省市：JP