一种用于乙型肝炎病毒基因分型的检测试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种用于乙型肝炎病毒基因分型的检测试剂盒及检测方法，试剂盒包括用于PCR扩增乙型肝炎病毒基因S区和PreS2区的引物对、表面固定有分型检测探针和对照探针的固相检测阵列、包含DNA聚合酶和反应底物的固相载体上核酸扩增反应体系和显色试剂。本发明专利技术通过以基因芯片为基础，PCR反应技术为原理的高通量、高特异性、快速、且易于推广的检测方法，将检测探针固定在检测阵列上，与PCR扩增的待测基因片段进行杂交，当目的片段被固相载体上的探针识别后，能够进行核酸序列的合成延长，使得被生物素标记的扩增片段固定在检测阵列上而不被洗脱，进而显色显示，一次就可以检测出待检测乙肝病毒的基因型。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医学检验领域，涉及乙型肝炎病毒基因的分型检测，特别涉及。
技术介绍
乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的一种世界性疾病。发展中国家发病率高，我国的乙型肝炎肝炎病毒携带者和患者共计约9300万，其中1/3出现肝损害的临床表现。目前我国有乙肝患者3000万。被HBV感染后，能逐渐演变为更为严重的肝病，如肝硬化、肝癌等，由此导致的死亡人数每年达50万。近年来的研究表明由基因突变导致的不同的HBV基因型，呈地理区域性分布，且不同基因型致病性不同，基因型与乙型肝炎病情的进展、临床表现、治疗耐药、预后有密切的关系。然而目前缺乏有效而准确的检测方法来对HBV进行早期的检测与分型，这种技术上的缺失给HBV的早期治疗和术后检查带来了许多不便。目前的乙型肝炎分型方法有很多，主要是针对基因突变所引起的差别的检查。当前的分型方法包括全基因测序、表面抗原基因(S基因)序列分析、聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)基因分型、单克隆抗体酶联免疫吸附试验基因分型法、特异性引物-PCR法、PCR微板核酸杂交-ELISA法、线性探针分析(LiPA)基因分型法、实时定量PCR 一本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种用于乙型肝炎病毒基因分型的检测试剂盒，其特征在于，包括用于ＰＣＲ扩增乙型肝炎病毒基因Ｓ区和ＰｒｅＳ２区的引物对、表面固定有分型检测探针和对照探针的固相检测阵列、包含ＤＮＡ聚合酶和反应底物的固相载体上核酸扩增反应体系和显色试剂；所述的引物对的５｀端增加生物素标记；所述的分型检测探针包括针对一个或多个基因型乙型肝炎病毒的检测探针，其长度为１５～２５ｎｔ，其中针对检测突变多态性的位点设置在探针５｀端５ｎｔ之后，并在检测探针５｀端进行减少空间位阻的序列延长修饰和／或辅助固定修饰；所述的显色试剂包括含亲和素－碱性磷酸酶的亲和反应液和含ＮＢＴ／ＢＣＩＰ的显色反应液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：颜真，包晗，郭晏海，赵锦荣，汪钦，刘永兰，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：87