喹诺里西啶生物碱在制备用于治疗肿瘤药物的应用制造技术

本发明专利技术涉及槐属植物提取的喹诺里西啶生物碱在制备用于治疗肿瘤药物的用途。可治疗的肿瘤包括白血病、淋巴瘤、肝癌、食管癌和肺癌。使用治疗有效剂量的活性成份苦豆碱、鹰爪豆碱和金雀花碱组合药用辅料，制备临床应用的针剂、片剂、胶囊、控释药丸等剂型。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属制药领域，具体涉及喹诺里西啶生物碱在治疗肿瘤药物的应用。
技术介绍
目前肿瘤治疗主要有手术、放疗和化疗，由于白血病在临床首选治疗方案仍然 是药物化疗。因此从植物研发高效低毒天然抗癌药物或先导化合物有重要的现实意义。 本专利技术实验例除选用了白血病细胞外，还选用了我国高发的消化道和呼吸道癌症的肿瘤 细胞。本专利技术所选用的肿瘤细胞均取自临床肿瘤患者的细胞，如K562细胞取自53岁女 性白血病患者，HL60细胞取自36岁女性急性早幼粒细胞白血病患者，U937细胞取自37 岁男性弥漫性组织细胞淋巴瘤，HepG2细胞来源于一个15岁患者的肝癌组织，EC109取 自65岁男性食管癌患者，A549细胞取自58岁男性肺癌患者。槐属植物属于豆科蝶形花亚科，有灌木、乔木、稀草本等90多种，主要分布于 温带和亚热带地区。我国分布较广南北均产，约有30多种，常用于中药主要有苦参、苦 豆子和山豆根等。槐属植物中药具有杀菌、抗病毒、抗心律不齐和抗肿瘤等功效。中药 在我国已有千余年临床应用史，其所含大量的活性成份具有广阔的研发前景。从槐属植物提取的喹诺里西啶生物碱，也具有杀菌、抗病毒、抗心律不齐等功 效。喹诺里西啶生物碱可分为苦参碱型、苦豆碱型、鹰爪豆碱型和金雀花碱型等。目前 报道从槐属植物中药苦参、苦豆子和山豆根提取具有抗肿瘤的生物碱为苦参碱型，如苦 参碱、槐定碱、槐果碱。中国93100881.6号专利“槐定碱的用途”公开了槐定碱抗肿瘤 用途，200510064670.0号专利“氧化槐定碱在制备抗癌药的用途”公开了氧化槐定碱的 抗肿瘤用途。苦豆碱型、鹰爪豆碱型和金雀花碱型生物碱在抗肿瘤方面的用途尚未见报道。 苦豆碱型是指苦豆碱、烯丙基苦豆碱、N-甲基苦豆碱、11-去氢苦豆碱；鹰爪豆碱型是 指鹰爪豆碱、13-羟基鹰爪豆碱、17-氧代白金雀花碱、白金雀花碱、安那吉碱、巴普叶 碱、5，6-去氢白金雀花碱、11，12-去氢鹰爪豆碱；金雀花碱型是指金雀花碱、11-烯 丙基金雀花碱、12-羟基金雀花碱、N-(2-羟乙基)金雀花碱、N-乙酰基金雀花碱、 N-乙基金雀花碱、N-醛基金雀花碱、N-甲基金雀花碱、11-氧代金雀花碱。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种喹诺里西啶生物碱在制备用于治疗肿瘤药物的用途， 具体是指苦豆碱、鹰爪豆碱和金雀花碱。本专利技术的涉及技术方案是喹诺里西啶生物碱在制备用于治疗白血病、淋巴 瘤、肝癌、食管癌、肺癌肿瘤药物的应用。本专利技术所述喹诺里西啶生物碱为槐属植物提取的苦豆碱、鹰爪豆碱或金雀花 碱。本专利技术所述白血病是指K562细胞、HL-60细胞引起的白血病；淋巴瘤为U937 细胞引起肿瘤；肝癌为HepG2细胞引起的肿瘤；食管癌为EC109细胞引起的肿瘤；肺癌 为A549细胞引起的肿瘤。本专利技术用于治疗肿瘤的药物是指使用治疗有效剂量的活性成份苦豆碱、鹰爪豆 碱或金雀花碱，组合药用辅料，制备临床应用的针剂、片剂、胶囊、控释药丸等剂型。本专利技术中苦豆碱型是指苦豆碱、烯丙基苦豆碱、N-甲基苦豆碱、11-去氢苦豆 碱；鹰爪豆碱型是指鹰爪豆碱、13-羟基鹰爪豆碱、17-氧代白金雀花碱、白金雀花碱、 安那吉碱、巴普叶碱、5，6-去氢白金雀花碱、11，12-去氢鹰爪豆碱；金雀花碱型是指 金雀花碱、11-烯丙基金雀花碱、12-羟基金雀花碱、N-(2-羟乙基)金雀花碱、N-乙酰 基金雀花碱、N-乙基金雀花碱、N-醛基金雀花碱、N-甲基金雀花碱、11-氧代金雀花 碱。本专利技术人以已用于肿瘤治疗的药物槐定碱为对照，利用血液系统肿瘤白血病、 淋巴瘤，消化系统肿瘤肝癌、食管癌和呼吸系统肿瘤肺癌多种肿瘤细胞，观察比较了苦 豆碱、鹰爪豆碱和金雀花碱抑制肿瘤细胞效果，结果发现苦豆碱、鹰爪豆碱抑制上述肿 瘤细胞效果明显优于槐定碱，金雀花碱对上述肝癌和肺癌细胞的抑制效果优于槐定碱。进一步实验研究发现发现苦豆碱、鹰爪豆碱和金雀花碱抗肿瘤细胞效果主要通 过增殖抑制、诱导自噬和凋亡达到抗肿瘤细胞目的。本专利技术分别以苦豆碱、鹰爪豆碱和金雀花碱为活性成份与药用辅料组合制成针 剂、片剂、胶囊等剂型供临床应用。将苦参根、山豆根或苦豆子碾成粉，用0.4%盐酸室温浸泡7天，共4次，抽滤 回收得到总浸膏，再经脱脂、酸化、碱化和氯仿萃取等工艺获得苦豆碱、鹰爪豆碱和金 雀花碱等活性生物碱成分，经纯度分析鉴定后用于后续制备。取苦豆碱10克加注射用水500毫升搅拌溶解，逐渐加入计算用量盐酸溶液(浓 度为1M)，再加注射用水至1升。搅拌、过滤、分装、灭菌，制备针剂。取鹰爪豆碱10 克加注射用水500毫升搅拌溶解，逐渐加入计算用量硫酸溶液(浓度为1M)，再加注射用 水至1升。搅拌、过滤、分装、灭菌，制备针剂。取金雀花碱10克加注射用水500毫 升搅拌溶解，逐渐加入计算用量盐酸溶液(浓度为1M)，再加注射用水至1升。搅拌、 过滤、分装、灭菌，制备针剂。取苦豆碱20毫克，加药用辅料混合，压制成片剂，每片含苦豆碱20毫克。取 鹰爪豆碱20毫克，加药用辅料混合，压制成片剂，每片含鹰爪豆碱20毫克。取金雀花 碱20毫克，加药用辅料混合，压制成片剂，每片含金雀花碱20毫克。取苦豆碱20毫克，加药用辅料混合，装入胶囊，每胶囊含苦豆碱20毫克。取 鹰爪豆碱20毫克，加药用辅料混合，装入胶囊，每胶囊含鹰爪豆碱20毫克。取金雀花 碱20毫克，加药用辅料混合，装入胶囊，每胶囊含金雀花碱20毫克。取上述苦豆碱、鹰爪豆碱和金雀花碱活性成分制备的药物制剂稀释成实验浓度 开展下面实施例，说明苦豆碱、鹰爪豆碱和金雀花碱抗肿瘤细胞效果和用途实施例1，采用常规MTT法进行肿瘤抑制实验，方法与结果如下MTT比色法是一种检测细胞存活和生长的方法。该方法已广泛用于大规模的抗 肿瘤药物筛选，它的特点是灵敏度高、经济。4上述各肿瘤细胞0.5-2X105于96孔板中，将苦豆碱、鹰爪豆碱和金雀花碱制备 的制剂稀释成实验浓度，分别加入各肿瘤细胞并处理48小时。每一实验组设置3个重复 孔，阴性空白对照孔为不加药物，阳性药物对照孔为槐定碱。-20°C保存的5mg/mlMTT 溶液于室温避光溶解，向96孔板每孔中加入10 μ 1 MTT溶液混勻，于细胞培养箱放置4 小时。向96孔板孔中加入ΙΟΟμΙ由SDS、异丙醇和盐酸配制的三联试剂，继续于细胞 培养箱放置过夜。酶标仪570nm检测各孔OD值，计算抑制率(抑制率=1_加药组OD 值/对照组OD值)，获取抑制率为50%的药物浓度，即IC50。IC50表示药物对肿瘤细 胞的抑制效果。下表根据测得的OD值，减去试剂对照组的均值后，计算药物对细胞增殖的抑制效果。本文档来自技高网...

【技术保护点】
喹诺里西啶生物碱在制备治疗白血病、淋巴瘤、肝癌、食管癌、肺癌肿瘤药物的应用。

【技术特征摘要】
1.喹诺里西啶生物碱在制备治疗白血病、淋巴瘤、肝癌、食管癌、肺癌肿瘤药物的 应用。2.根据权利要求1所述的应用，其中所述的喹诺里西啶生物碱为槐属植物提取的苦豆 碱、鹰爪豆碱或金雀花碱。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述白血病是指K562细胞、HL-60细胞 引起的白血病；淋巴瘤为U...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋纪恺，刘小珊，
申请(专利权)人：汕头大学医学院，
类型：发明
国别省市：44