在感染治疗的早期或晚期即当病毒的基因突变已经发生以恢复对否则是无效的抗病毒剂的敏感性时，服用错误配对的ｄｓＲＮＡ，降低用核苷类似物抗病毒治疗过程中，病毒的耐药性发展速度。使用错误配对的ｄｓＲＮＡ，在外周血液单核细胞，尤其是ＣＤ４淋巴细胞中明显达到推迟和／或减小对核苷类假物耐药的可逆病毒的出现，尤其是ＨＩＶ的出现。（*该技术在2012年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
核苷类似物通常用作抗病毒剂，尤其用作抗可逆性病毒(retroviruses)剂。病毒经历基因变异或突变，导致对这些抗病毒剂相对耐药。一旦发生耐药，病毒迅速繁殖，于是加速了潜在的疾病发作。感染的早期部署双链RNA(dsRNA)可以降低病毒耐药出现的速度。即使是感染后期，基因突变已经发生，dsRNA也能恢复病毒对其它无效的抗病毒剂的敏感性。这点可以由临床上长期使用两种模式相结合治疗导致的出乎意料的结果中看出。这种临床结果是，宿主免疫功能大大恢复，可检测的病毒甚微。这种结果是单独使用任何一类抗病毒剂所没有的。病毒性疾病的长期治疗，特别是可逆的病毒性疾病，与病毒抗药性出现有关(参考文献1和2)。理想情况是，使用核苷类似物进行化疗时，核苷能插入到病毒基因信息之中，并导致基因缺陷或不完全，从而降低病毒生长循环效率。有缺陷的或者不完全的病毒后代形成感染的能力降低。不过，通过修饰本身的基因构造，病毒可以相对出现耐药，从而即使存在核苷类似物，也可以产生感染性的病毒后代。典型的基因变化出现在聚合酶基因(即在生长循环的第一步指导抗病毒核苷插入的病毒组分)，使得病毒可以受抗病毒封锁形态影响。目前最好的研究例子是可逆病毒间的相互作用，例如HIV(人体免疫缺陷病毒)和3′-叠氮基-3′-去氧胸苷，后者亦称作为AZT或Zidovudine。导致对AIT具有抗药性的变种常常同时对其它药物，例如二脱氧肌苷(DDI)和二脱氧胞苷(DDC)(不限于这两种化合物)耐药。已经发现了在使用核苷类似物治疗前，在适当的时间使用有效量错误匹配的dsRNA，可以使HIV感染(HIV阳性)的病人推迟或降低，或既推迟又降低出现核苷类似物耐药病毒的程序。这些程序使得病人在HIV感染后期，需要使用核苷类似物抗病毒剂时，对药物敏感。还描述了使用有效量错误匹配的dsRNA，改进可逆病毒感染病人的外周血液单核血细胞(PBMC)群，尤其是T4或CD4淋巴细胞的治疗程序。dsRNA可以是含有部分尿嘧啶碱基或鸟嘌呤基的聚肌苷和聚胞苷的复合物，例如这类硷基的含量从1/4至1/29(poly I.poly(C4-29X＞U或G))。dsRNA的通式可以是rIn·r(C11-14′U)n或者是rIn·r(C12′U)n。下面讨论dsRNA的其它合适的例子。“错误配对的dsRNA”用来描述那些配对链之间的氢键(碱基堆积)相对完整，即氢键受到干扰被中断的平均数在连续的每29个碱基对残基中不足1个碱基时。“错误配对的dsRNA”应按此理解。本专利技术提倡使用的错误配对的dsRNA以选自poly(Cn′U)和poly(Cn′G)的共聚核苷酸为基础，其中n为4至29的整数，而且共聚核苷酸是通过沿聚核糖胞苷键(rCn)把rIn·rIn修饰并插入未配时碱基(尿嘧啶或鸟嘌呤)而生成的聚核糖肌苷酸和聚核糖胞苷酸的复合物的错误配对的类似物。另外，通过修饰聚核糖肌苷酸(rIn)的核糖骨架，例如把2′-O-甲基核糖残基包括于其中，从poly(I)·poly(C)dsRNA衍生错误配对的dsRNA。错误配对的复合物可以使用RNA-稳定化的高聚物，例如聚赖氨酸或纤维素进行复合。Carter和Ts′o在美国专利4，130，641和4，024，222中描述了rIn·rCn′的错误配对类似物中优选的类似物，通式为rIn·(C11-14′U)n或rInl·r(C29′G)n′，这些专利技术列为参考文献。按照本专利技术，其中描述的dsRNA一般都适用。优选的错误配对的dsRNA为rIn·(C11-14′U)n或AMPLIGEN(HEN Resarch，Inc，Rockn ille，MD，USA)，可以买到冻干粉。本专利技术中使用的错误配对的dsRNA的其它例子包括poly(I)·poly(C4′，U)poly(I)·poly(C7′，U)poly(I)·poly(C13′，U)poly(I)·poly(C22，U)poly(I)·poly(C20，U)poly(I)·poly(C29，U)和poly(I)·poly CP23G＞p适用于实施本专利技术的另一类dsRNA是确定结构的短链dsRNA，例如通式为5′-封锁-(I)n-封锁3′3′-封锁-(C)n-封锁5′的寡核苷酸。其中m和n各自都大于5至小于100，I为单磷酸化肌苷，C为单磷酸化胞苷，而且一根链上的封锁基与相对链上的封锁基互补。或者是通式为5′-封锁-〔(I)xA〕j-封锁3′5′-封锁-〔(C)yU〕k-封锁3′的寡核苷酸。其中x和y各自大于5小于25，j和k至少等于1并小于10，I和C同上，A为I以外的核苷酸，U为碱基与A配对的核苷酸。另外，短链寡核苷酸可以具有下述结构5′(I)n-铰链-(C)m3′其中n，m，I和C的定义同上。这些寡核苷酸可以在与相对链上的核苷酸不互补的一根链上含有取代基。这些寡核苷酸最好被互补的非均匀高聚体的内部配对所稳定，理想地，封锁基和铰链基或二者都含有互补非均匀高聚体的区域。这些寡核苷酸理想地含有单一链尾。这些寡核苷酸在PCT/US89/02172中已有描述。病人需要根据临床改善情况每周一次或每日一次静脉输200至700mg rI·r(C11-14′U)。dsRNA的用量和给药次数将使病人的全身血液循环在用药后于远离输液部位的地方测定到dsRNA水平达0.01μg至1，000μg/升。例证性的核苷类似物抗病毒剂包括Ziodovudine(象这里普遍使用的AZT或叠氮胸腺啶或Retrovar)，即3′-叠氮-3′-去氧胸腺定，是用于因人体免疫缺陷病毒(HIV，HTLV-I，HTLV-Ⅱ，HTLV-Ⅲ，LAV，ARV和各种菌株的类似信息物)引起的AIDS和AIDS相关复杂情况需要全身性治疗的核苷类似物抗病毒剂。成人剂量是每天每四小时给药200mg。一个70kg体重的病人，对应的剂量是每四小时每公斤体重2.9mg。每天每公斤体重的剂量已用达60mg。如同后面的讨论将进一步显示的，与错误配对的dsRNA配位时，使用的核苷类似物的可逆病毒剂量通常小于正常剂量和习惯用量。附图说明图1是描述298位病人死亡或AIDS“全身感染”的时间(月数)表，与症状出现前AZT“早期”(方格)治疗或症状出现后AZT“晚期”(圆圈)治疗相比较，采用无致命的HIV情况的病人的比例表示。图2，比较早期使用dsRNA或它与AZT并用对可逆病毒生长的控制与单独使用AZT病例中可逆病毒迅速生长。在图2中，HIV培养按参考文献3进行，使用的PBMC来自例＃1至例＃3培养4天，7天和14天之后，收集PBMC，溶于GUSCN之中，并按方法中描述的使用分子杂化技术测定HIVRNA。PBMC＝外周血液中单核细胞;GUSCN为氰酸胍溶液，用于溶解细胞并释放病毒物质。图3，比较dsRNA和AZT作为单一治疗剂时与安慰剂及dsRNA和AZT联合治疗时，在指明的周数上长期保持HIV疾病中CD4细胞按CD4T淋巴细胞中的中质变化的相对效果。图4，把AZT和dsRNA联合治疗的天数与T4水平的变化百分数相关联，表明dsRNA Ampligen 把HIV疾病中T4细胞的稳定周期扩展到超出了单独使用AZT预期的稳定周期。指出了联合用药的每个成员的中间剂量。图5，把Ampligen 和AZT联本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种联合用药治疗体系，通过这种联合治疗可以防止出现对核苷类似物耐药病毒和／或改善病情，尤其是事先存在对核苷耐药病毒的与免疫细胞有关的病情。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：WA卡特，
申请(专利权)人：亨姆药品公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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