整联蛋白α4亚单位的拮抗剂在制备治疗纤维变性的药物组合物中的用途制造技术

本发明专利技术公开了人或动物受试者中纤维变性的治疗方法，该方法包括给受试者给药有效量的ＶＬＡ－４整联蛋白或其片段的拮抗剂。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
利用整联蛋白α4亚单位的拮抗剂治疗纤维变性的方法本申请是2001年12月14日向中国专利局提交的00808454.8号中国申请的分案申请。相关申请本申请要求先前于1999年4月22日提交的美国临时申请60/130847和1999年6月1日提交的美国临时申请60/137214的优先权。
技术介绍
纤连蛋白和胶原蛋白是维持结缔组织中细胞外基质完整性所必须的蛋白质。这些蛋白的产生是受到高度调节的过程，它的失调可导致组织纤维变性的发展。虽然纤维组织的形成是创伤后正常的有益的治愈过程之一，但在一些情况下，纤维物质的异常积聚可最终导致器官衰竭(Border等，(1994)新英格兰医学杂志，3311286-1292)。任何器官的创伤均可导致固定的生理反应血小板诱导的止血，随后是炎症细胞和激活的成纤维细胞的进入。源自这些细胞的细胞因子驱使新的细胞外基质和血管(肉芽组织)的形成。肉芽组织的产生是一个精细协调的过程，其中蛋白酶抑制剂和细胞外基质蛋白的表达上调，而蛋白酶的表达下调，导致细胞外基质的积聚。纤维变性状态(诱导的或自发的)进展的关键是成纤维细胞活性的激活。炎症细胞和激活的成纤维细胞向创伤器官的流入，依赖于这些细胞与主要由纤连蛋白和胶原蛋白组成的间质的相互作用。这些细胞-细胞或细胞-细胞外基质的相互作用由细胞粘附分子的多个家族介导，其中一种这样的家族包括整联蛋白。整联蛋白在结构上和功能上与糖蛋白相关，这些糖蛋白由在几乎每种类型的哺乳动物细胞中以各种组合存在的各种α(α1、α2直到目前发现的α11)和β(β1和β7)异二聚体跨膜受体结构域组成(见综述E.C.Butcher，细胞，67，1033(1033)；D.Cox等，“整联蛋白的药理学” 医学研究综述，第195卷(1994)和V.W.Englemen等，“以细胞粘附整联蛋白作为药物靶点”Ann.Rews.Medicinal Chemistry，第31卷，J.A.Bristol，编；Acad.Press，NY，1996，第191页)。二个含α4亚单位的整联蛋白已被述及并被命名为α4β1(VLA-4)和α4β7。间质性肺纤维变性(IPF)是许多导致降低肺顺应性和损害有效气体交换功能的间质性肺疾病的最终途径。不管病因如何，IPF是以肺的炎症和纤维增生以及间质中胶原蛋白的过度积聚为特点。IPF患者在活跃的肺纤维变性期间，通常出现募集(recruited)的免疫细胞和炎症细胞，这表明肺纤维变性是在最初炎症损伤之后异常修复的结果。在很多情况中，募集的炎症细胞可能参与最初的损伤。另外，在调节该修复过程时，这些细胞可起复杂的作用。在各种情况中，肺中免疫和炎症细胞的聚集在纤维变性反应的判定中起重要作用。炎症细胞和激活的成纤维细胞进入损伤的肺依赖于这些细胞与ECM组分的相互作用。白细胞的输送和激活状态由各种整联蛋白进行调节。在随后的反应中(包括纤维变性反应)，阻止炎症细胞进入肺可能是关键。许多与纤维组织增生相关的疾病是慢性疾病并经常导致衰弱，包括例如硬皮病等皮肤疾病。包括肺纤维变性在内的一些疾病可以是致命的，其部分原因是目前对这种疾病的治疗有明显的副作用，并且对减缓或阻止纤维变性的进程没有效果[Nagler等，1996，Am.J.Respir.Crit.Care.Med.，1541082-86]。因此一直需要有新的抗纤维变性药物。专利技术概述本专利技术提供了治疗受试者的纤维变性的方法。我们通过给患肺纤维变性的小鼠施用含α1或α4亚单位的整联蛋白的拮抗剂，研究了含α1和α4亚单位的整联蛋白的拮抗剂在纤维变性发病机制中的可能作用。这些拮抗剂对胶原蛋白总积聚和肺纤维变性损伤范围的有益作用，如本文所示，表明含α1和/或α4亚单位的整联蛋白可能是抗纤维变性治疗的合理靶点。本专利技术的一个方面涉及方法，其包括向有纤维变性的受试者施用有效量的组合物，所述组合物包括拮抗含α4亚单位的整联蛋白与其配体之间相互作用的拮抗剂。所述拮抗剂是α4整联蛋白结合剂或α4整联蛋白配体结合剂。优选的α4整联蛋白结合剂选自a)对VLA-4和α4β7与各自α4配体的相互作用均有拮抗作用的抗体同系物；b)拮抗VLA-4与其α4配体相互作用的抗体同系物；c)拮抗α4β7与其α4配体相互作用的抗体同系物。在其它实施方案中，抗体同系物选自人的抗体、嵌合抗体、人源化抗体及其片段。本专利技术的另一个方面涉及减少支气管肺泡灌洗液样品中由纤维变性诱导的白细胞增加的方法，包括给有纤维变性的受试者给药有效量拮抗剂的步骤，所述拮抗剂为拮抗含α4亚单位的整联蛋白与其配体之间相互作用的拮抗剂。在本专利技术的某些实施方案中，α4亚单位的整联蛋白的结合剂的编码核酸序列包括在几种严谨条件下与选自美国专利5840299的表6中核酸序列或其互补序列杂交的核酸序列。在本方法的其它方面，所述α4亚单位的整联蛋白的结合剂的编码核酸序列包括在指定的严谨条件下与选自美国专利5932214中发现的或由细胞系ATCC CRL 11175产生的特定多肽的编码核酸序列杂交的核酸。更具体地，本专利技术涉及以下方面1、一种方法，其包括向患有纤维变性的受试者给药有效量的含抗体同系物的组合物，所述抗体同系物可拮抗VLA-4和α4β7与各自α4配体的相互作用，或者所述抗体同系物拮抗VLA-4与其配体的相互作用，或者所述抗体同系物拮抗α4β7与其配体的相互作用。2、项1的方法，其中抗体同系物选自人的抗体、嵌合抗体、人源化抗体及其片段。3、项1的方法，其中所述组合物的给药量为约0.1-20mg/kg体重。4、用于降低支气管肺泡灌洗液中由纤维变性诱导的白细胞增多的方法，包括向患有纤维变性的受试者给药有效量的抗体同系物的步骤，该抗体同系物拮抗含α4亚单位的整联蛋白与针对含α4亚单位的整联蛋白的配体之间的相互作用。5、项4的方法，其中所述抗体同系物可拮抗VLA-4和α4β7与其各自配体之间的相互作用，或者拮抗VLA-4与其配体之间的相互作用，或拮抗α4β7与其配体之间的相互作用。6、项4的方法，其中抗体同系物选自人的抗体、嵌合抗体、人源化抗体及其片段。7、项4的方法，其中抗体同系物的给药量为约0.1-20mg/kg体重。8、项7的方法，其中所述抗体同系物以有效量给予使得能提供大约0.1-30mg/kg体重的小分子剂量。9、项1或4的方法，其中所述抗体同系物是一种人源化抗体，编码该抗体的一部分的核酸序列包含能在高严谨条件下与选自美国专利5840299中表6的核酸序列或其互补序列杂交的核酸。10、项1或4的方法，其中所述抗体同系物是一种人源化抗体，编码该抗体的一部分的核酸序列包含能在低严谨条件下与选自美国专利5840200中表6的核酸序列或其互补序列杂交的核酸。11、项1或4的方法，其中所述抗体同系物是一种人源化抗体，编码该抗体的一部分的核酸序列包含能在低严谨条件下与编码下述多肽的核酸序列杂交的核酸，所述多肽选自a)美国专利5932214中的SEQ ID NO2；b)美国专利5932214中的SEQ ID NO4；和c)由细胞系ATCC CRL 11175所产生的抗体的可变区。12、项1或4的方法，其中所述抗体同系物是一种人源化抗体，编码该抗体的一部分的核酸序列包含能在高度严谨条件下与编码下述多肽的核酸杂交本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含抗体同系物的组合物在制备用于治疗受试者纤维变性的药物组合物中的用途，所述抗体同系物是拮抗含α４亚单位的整联蛋白与含α４亚单位的整联蛋白的配体之间的相互作用的拮抗剂。

【技术特征摘要】
US 1999-4-22 60/130,847;US 1999-6-1 60/137,2141.包含抗体同系物的组合物在制备用于治疗受试者纤维变性的药物组合物中的用途，所述抗体同系物是拮抗含α4亚单位的整联蛋白与含α4亚单位的整联蛋白的配体之间的相互作用的拮抗剂。2.权利要求1的用途，其中所述纤维变性是内脏器官的纤维变性。3.权利要求2的用途，其中所述内脏器官是肝，肺，肾，心血管，或胃肠道。4.权利要求1的用途，其中所述受试者患有以下疾病肺纤维变性、骨髓纤维变性、肝硬化、系膜增生性肾小球肾炎、新月体性肾小球肾炎、糖尿病性肾病、肾间质性纤维变性、或与HIV相关的肾病。5.权利要求1的用途，其中所述纤维变性是皮肤纤维变性。6.权利要求5的用途，其中所述受...

【专利技术属性】
技术研发人员：菲利普戈特沃尔斯，罗伊R洛布，
申请(专利权)人：比奥根艾迪克MA公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]