铁苋菜水提取物在制备治疗慢性溃疡性结肠炎药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，是大戟科植物铁苋菜水提取物用于制备治疗慢性溃疡性结肠炎的新用途。本发明专利技术利用ＴＮＢＳ（２，４，６－三硝基苯磺酸）诱导的大鼠溃疡性结肠炎动物模型即ＵＣ模型大鼠和病理学观察实验，发现铁苋菜水提取物可以有效改善大鼠腹泻、便血、体重减轻、结肠组织形态学改变等症状；对组织中性粒细胞具有清除作用；生化检测及分子生物学试验证明其具有抗氧化和抗ＮＯ自由基作用；并可从ＲＮＡ水平抑制诱导型一氧化氮合酶ｉＮＯｓ的表达。因此，铁苋菜水提取物可用于制备抗慢性溃疡性结肠炎药物。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药
，是大戟科植物铁苋菜水提取物用于制备治疗慢性溃疡性结肠炎药物的新用途。
技术介绍
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis UC)又称为慢性非特异性结肠炎，以反复发作的腹泻、腹痛、便血等为主要症状。由于该病迁延难愈，又极易转化为结肠癌，并且目前没有特异性的治疗方法，因此被世界卫生组织定义为“世界难治病”之一。慢性溃疡性结肠炎在欧美国家的发病率很高，在我国的发病率也呈逐年上升的趋势。由于还没有明确该病的发病机制，因此治疗效果不是很好。目前临床用药主要是氨基水杨酸类、皮质类固醇和免疫抑制剂，而这些药物均存在疗效欠佳及副作用较大的问题，例如临床常用于治疗轻中型UC的柳氮磺胺砒啶(SASP)，大约有45％的病人不能耐受其强烈的副作用。皮质类固醇类药物包括泼尼松、氢化可的松、丁地去炎松等，这类药物不应长期使用。免疫抑制剂主要有硫唑嘌呤、氨甲碟呤等，此类药由于毒性较大，其应用已经受到限制。另外有报导使用环胞素治疗对皮质类固醇类药物有抵抗性的重症UC患者，因必须大剂量静脉注射使用，故毒性也较大。因此，开发疗效确切且毒副作用小的抗溃疡性结肠炎药物已经成为急待解决的任务。铁苋，又称海蚌含珠，是大戟科植物铁苋菜(Acalyphaaustralis L.)的全草，具有清热、利湿、消肿、解毒之功效。民间常用于痢疾、出血等病症。毒理实验发现，铁苋菜毒性很小，其水提取液经腹腔注射或按生药量10g/kg灌胃，均未引起小鼠死亡(金继曙，等.《铁苋菜抗菌平喘有效成分的研究》，中草药通讯，1977，1013)。至今未见有关铁苋菜水提取物用于治疗慢性溃疡性结肠炎的报道。
技术实现思路
本专利技术提供一种将铁苋菜水提取物用于治疗慢性溃疡性结肠炎的新用途。本专利技术铁苋菜水提取物的制备方法如下将铁苋菜干燥全草粉碎成粗粉，按常规分别用10倍量的蒸馏水煎煮两次，每次1小时，合并煎煮液，减压浓缩，即为本专利技术水提取物。用目前国内外广泛用于筛选抗UC药物的动物模型TNBS(2，4，6-三硝基苯磺酸钠)诱导的大鼠慢性UC模型进行了动物实验，并通过分子生物学试验，证实了本专利技术铁苋菜水提取物对UC模型大鼠，能显著改善腹泻、便血、体重减轻、结肠病理形态学改变等症状；能清除中性粒细胞，降低髓过氧化物酶(MPO)的水平；具有升高超氧化物歧化酶(SOD)、谷光甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、降低丙二醛(MDA)水平的抗氧化作用；并抑制诱导性一氧化氮合酶(iNOs)mRNA的表达，从而抑制NO自由基的生成。由此说明铁苋菜水提取物具有确切的治疗慢性UC的作用，因此可用于制备治疗慢性UC的药物。附图说明图1为本专利技术水提取物对UC模型大鼠体重变化影响的曲线图。图2为正常对照组大鼠结肠组织切片图。图3为UC模型对照组大鼠结肠组织切片图。图4为本专利技术水提取物中剂量治疗组大鼠结肠组织切片图。图5为UC模型对照组大鼠结肠组织iNOs mRNA表达的琼脂糖凝胶电泳图谱。图6为本专利技术中剂量治疗组大鼠结肠组织iNOs mRNA表达的琼脂糖凝胶电泳图谱。具体实施例方式实施例1现结合实施例，对本专利技术作详细描述制备铁苋菜水提取物将铁苋菜全草干燥饮片粉碎成粗粉，加入10倍量的蒸馏水，煎煮两次，每次1小时，合并煎煮液，于旋转蒸发仪减压浓缩，最终得到1g生药/ml的浓缩液。实施例2铁苋菜水提取物对UC模型大鼠腹泻、便血、体重减轻及结肠形态学改变的治疗作用。1.动物60只清洁级、健康雄性SD大鼠，体重180g-200g，购于中国科学院上海实验动物中心，动物合格证号[SYXK(沪)2002-0026]。将60只大鼠随机分为6组，每组10只，其中1组作为正常对照组，其余5组用于造模。2.UC动物模型的制备采用Morris法(Morris G P，Beck PL，Herridge MS，et al.Hapten-induced model of chronic inflammation and ulceration in the rat colon.Gastroenterology1989，96(3)，795-803.)进行造模，即取上述健康雄性SD大鼠，禁食不禁水24小时，腹腔注射2％的戊巴比妥纳轻微麻醉后，将直径2mm的乳胶管经大鼠肛门轻轻插入大约8cm处，按125mg/kg体重将TNBS的50％乙醇溶液用注射器一次性注入到大鼠的肠腔内，将大鼠的尾部提起，倒置30秒，以防造模剂泄漏，即成UC模型大鼠。3.药物①柳氮磺胺吡啶(SASP)为上海三维制药有限公司产品，此为临床用治疗慢性UC的药物，用蒸馏水配制成0.1g/ml的混悬液，作为治疗对照药。②铁苋菜水提取物由实施例1所制备，浓度为1g生药/ml。4.实验方法实验共分6组第1组取上述健康雄性SD大鼠10只作为正常对照组；第2组取10只UC模型大鼠作为模型对照组；第3、4、5组分别为本专利技术提取物低、中、高剂量治疗组，每组10只UC模型大鼠，每天分别灌胃铁苋菜水提取物2.5、6.5、9.5g生药/kg体重；第6组为阳性治疗对照组，取UC模型大鼠10只，每天按照0.3g/kg体重灌胃SASP混悬液。各组大鼠均在造模后6小时开始给药，正常对照组和模型对照组则分别给予等体积量的生理盐水灌胃，连续灌胃10天。5.试验结果(1)铁苋菜水提取物对UC模型大鼠体重变化的影响。各组大鼠造模及给药后，每天记录大鼠的体重，结果见图1。由图1可见，大鼠造模后体重开始骤降，在1-9天内显著低于正常组大鼠体重(p＜0.05)，在造模后的第2天体重降到最低，只有原体重的80％，第3天开始逐渐恢复，第10天恢复到最初体重。本专利技术提取物6.5g、9.5g生药/kg治疗组以及SASP0.3g/kg阳性治疗对照组能够显著促进UC模型大鼠的体重恢复，大鼠在造模后第2天体重就开始上升，5-6天逐渐恢复到最初体重。(2)铁苋菜对UC模型大鼠腹泻及便血的影响正常组大鼠没有发生腹泻和便血，造模后的大鼠表现为毛色杂乱无光泽，神情倦怠萎靡，均出现了不同程度的腹泻、便血，结果见表1。由表1可见，本专利技术提取物中、高剂量组及SASP阳性治疗对照组大鼠发生腹泻、便血的个数明显少于模型对照组，说明本专利技术提取物对UC模型大鼠的腹泻与便血具有治疗作用，铁苋菜水提取物对UC模型大鼠便血的治疗作用尤为明显。表1铁苋菜水提取物对UC模型大鼠腹泻与便血的影响 注1正常对照组；2UC模型对照组；3铁苋菜水提取物低剂量给药组；4铁苋菜水提取物中剂量给药组；5铁苋菜水提取物高剂量给药组；6SASP阳性治疗对照组。(3)铁苋菜水提取物对UC模型大鼠结肠损伤评分及结肠湿重的影响各组大鼠给药10天后，按常规过量注射戊巴比妥钠致死，剖开大鼠腹部，观察肠道大体改变。将距肛门10cm长的末段结肠取出，沿肠系膜纵行切开，用冰生理盐水冲洗，并称重。将黏膜面向上展开，观察黏膜损伤并按照Wallace和Keenan1990年的评分标准进行评分0分，无炎症和溃疡；1分，局部充血但无溃疡；2分，溃疡但无充血；3分，一处溃疡及炎症；4分，两处或两处以上溃疡及炎症；5分，溃疡延伸超过2cm。结果见表2。将大鼠解剖后观察结肠外观及黏膜表面发现，模型对照组大鼠的结肠多数与相邻脏器有轻度粘连，结肠充血水肿，在肛口向上8cm处有本文档来自技高网...

【技术保护点】
铁苋菜水提取物在制备治疗慢性溃疡性结肠炎药物中的应用，所说的铁苋菜水提取物的制备方法如下：将铁苋菜干燥全草粉碎后，用１０倍量的蒸馏水分次煎煮，合并煎煮液，减压浓缩即成。

【技术特征摘要】
1.铁苋菜水提取物在制备治疗慢性溃疡性结肠炎药物中的应用，所说的铁苋菜水提取物的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡晋红，邓莉，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]