一种苦碟子注射制剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种苦碟子注射制剂的制备方法，其特征在于从苦碟子中采用新的提取纯化方法得到苦碟子纯化提取物，苦碟子纯化提取物制备成注射液，或与药用辅料混合，制备成冻干粉针制剂，药理实验结果表明，本方法的苦碟子注射制剂具有更好的药理作用。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属中药制药
，具体涉及一种苦碟子注射制剂制备方法。
技术介绍
苦碟子为菊科植物抱茎苦荬菜的当年生干燥全草，具清热解毒，消肿止痛之功效，其主要成分为黄酮苷类成分和腺嘌呤核苷。现已上市的制剂有苦碟子注射液(WS-10354(ZD-0354)-2002)，苦碟子注射液有活血止痛、清热祛瘀功效，用于瘀血闭阻的胸痹，证见胸痹、心痛、口苦、舌暗红或存瘀斑等。适用于冠心病、心绞痛见上述症状者，亦可用于脑梗塞者。现代研究证明该药对循环系统具有增加冠脉血流量、改善心肌循环等作用，对血液系统能显著抑制血小板聚集功能，明显增加纤维蛋白溶解酶的活性。由于苦碟子的成分复杂，原有的提取纯化工艺又比较简单，因而提取物中杂质含量多，造成苦碟子注射液质量不稳定，从而影响了制剂的疗效。专利(申请号02109532)“一种治疗心脑血管和眼底病的的中药及其制备方法”和专利(申请号03133969)“一种苦碟子药物制剂及其制备方法”分别公开了一种苦碟子粉针剂和制备方法，前者为冻干粉针剂，后者为用喷雾干燥法制成粉针，但这两个专利技术制备方法都基本沿用了原苦碟子注射液(WS-10354(ZD-0354)-2002)的制备方法，无新颖性，未能解决稳定性的根本问题。且半成品都采用溶液直接投料，不利于产品的质量控制和稳定性。
技术实现思路
基于上述原因，本专利技术采用新的提取纯化方法得到苦碟子有效部位，与药用辅料混合制备成冻干粉针剂，或制备成苦碟子注射液，本专利技术注射制剂稳定性更好，药理实验结果表明，本专利技术注射制剂具有更好的药理作用。本专利技术目的在于提供制备苦碟子冻干粉针剂的新方法。一、制备方法(1)原料药为苦碟子。(2)分下列四种方法任一种进行提取方法一取苦碟子药材，第一次加10-12倍量水煎煮1小时，第二次加6-8倍量水煎煮0.5小时，合并煎煮液，过滤，浓缩至每1ml相当于原生药0.5g的提取液。方法二取苦碟子药材，粉碎过20-50目筛，加6-8倍量60％-80％乙醇，20KHz频率超声提取二次，第一次30min，第二次20min，提取液过滤，合并，减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5g的提取液。方法三取苦碟子药材，粉碎过20-50目筛，加6-8倍量60％-95％乙醇回流提取三次，每次1小时，提取液过滤，合并，减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5g的提取液。方法四取苦碟子药材，粉碎过20-50目筛，用80％-95％乙醇渗漉，收集6-8倍量渗漉液，渗漉液减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5g的提取液。(3)再分下列四种方法任一方法进行纯化方法一取苦碟子提取液高速离心，取上清液用聚酰胺柱吸附，先用水洗至流出液无色，再用4-6倍柱体积量60％-80％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至至每1ml相当于原生药0.5g，用截留分子量10000-30000的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到苦碟子纯化提取物。方法二取苦碟子提取液高速离心，取上清液上大孔吸附树脂吸附，用3-4倍柱体积的水洗，再用4-6倍柱体积量60％-80％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5g，用截留分子量10000-30000的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到苦碟子纯化提取物。方法三取苦碟子提取液在搅拌下加10％氧化钙乳调pH10，放置12小时，离心，离心沉淀物悬浮于乙醇中使含醇量达80％，加酸调节pH值至3-5，充分搅拌使反应完全，离心，离心液加40％氢氧化钠溶液至pH至7-8，抽滤，滤液回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至每1ml相当于原生药4g，置-5℃以下放置12小时以上，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得到苦碟子纯化提取物。方法四取苦碟子提取液加乙醇，搅拌均匀，使含醇量达60％，冷藏，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩使含1g生药/ml，加乙醇搅拌均匀使含醇量达80％，冷藏，滤过，滤液减压回收乙醇，加注射用水稀释每1ml含生药0.5g，用截留分子量10000-30000的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到苦碟子纯化提取物。(4)制剂处方为冻干粉针剂处方苦碟子纯化提取物15-32重量份，药用辅料45-58重量份。注射液处方为苦碟子纯化提取物15-32重量份。(5)制剂制备冻干粉针剂制备取上述提取物加注射用水溶解，加0.1％-0.2％活性炭煮沸15分钟，过滤，加入药用辅料，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。注射液制备取上述提取物加注射用水溶解，加0.1％-0.2％活性炭煮沸15分钟，过滤，加注射用水至规定量，调节pH值至6.0-7.0，微孔滤膜过滤，灌装，即得。二、稳定性比较将本专利技术苦碟子注射液、本专利技术苦碟子冻干粉针剂与市售苦碟子注射液分别置常温下进行长期稳定性考察，结果如下1、苦碟子制剂中总黄酮的含量测定1.1仪器与试药日本岛津UV-3000A紫外分光光度计。市售苦碟子注射液(通化白山药业股份有限公司，规格10ml/支)；本专利技术苦碟子冻干粉针剂和本专利技术苦碟子注射液(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；芦丁对照品(中国药品生物制品检定所)；乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠试剂均为分析纯，水为三蒸水(自制)。1.2实验方法参照苦碟子注射液(WS-10354(ZD-0354)-2002)总黄酮的测定方法进行测定，结果见表1。表1长期稳定性试验制剂中总黄酮(以无水芦丁计)含量测定 2、苦碟子制剂中腺苷的含量测定参照苦碟子注射液(WS-10354(ZD-0354)-2002)质量标准中腺苷的含量测定方法进行测定，结果见表2。表2长期稳定性试验制剂中腺苷的含量测定 以上长期稳定性试验含量测定结果说明，本专利技术的苦碟子注射液和冻干粉针剂稳定性更好，放置24月后，冻干粉针剂中的总黄酮和腺苷含量变化较小，而市售苦碟子注射液(WS-10354(ZD-0354)-2002)的总黄酮和腺苷含量下降值明显较大。说明本专利技术的制备方法更加合理，更加科学，制得的产品稳定性也更好。四、药理实施例动物与试药；生理盐水(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；市售苦碟子注射液(通化白山药业股份有限公司)；本专利技术苦碟子注射液和苦碟子冻干粉针剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；健康杂种犬，雌雄兼用，体重12-15kg；Wistar大鼠，雌雄各半，体重250±5g。1、对冠脉血流量的影响将24只犬随机分为4组，每组6只，生理盐水组剂量为2ml/kg，给药组给药剂量为1.5g/kg(静滴)，犬用3％戊巴比妥钠(30mg/kg)麻醉，右侧卧位固定于手术台上，分离股静脉，插入静脉插管，经静脉缓慢输入生理盐水，以备给药，分离气管，插入气管插管连接呼吸机行正压人工呼吸，频率22次/min，在左侧第4-5肋间打开胸腔，暴露心脏，分离左冠状动脉前降支上部，放置电磁流量计探头(内径2mm-3mm)，测定每搏冠脉流量，实验结束取出心脏称重。手术完毕后，动物稳定20min，测定每搏冠脉流量，静脉给药后30min，再测定每搏冠脉流量，按下列公式计算冠脉血流量和变化率冠脉血流量(ml/min·100g)＝每搏冠脉流量(ml)×心率/心脏重量(g)×100变化率＝(给药本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种苦碟子注射制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（１）原料药为：苦碟子；（２）分下列四种方法任一种进行提取：方法一：取苦碟子药材，第一次加１０－１２倍量水煎煮１小时，第二次加６－８倍量水煎煮０．５小时，合并煎煮 液，过滤，浓缩至每１ｍｌ相当于原生药０．５ｇ的提取液；方法二：取苦碟子药材，粉碎过２０－５０目筛，加６－８倍量６０％－８０％乙醇，２０ＫＨｚ频率超声提取二次，第一次３０ｍｉｎ，第二次２０ｍｉｎ，提取液过滤，合并，减压回收乙醇并浓缩至 每１ｍｌ相当于原生药０．５ｇ的提取液；方法三：取苦碟子药材，粉碎过２０－５０目筛，加６－８倍量６０％－９５％乙醇回流提取三次，每次１小时，提取液过滤，合并，减压回收乙醇并浓缩至每１ｍｌ相当于原生药０．５ｇ的提取液；方法四：取 苦碟子药材，粉碎过２０－５０目筛，用８０％－９５％乙醇渗漉提取，收集６－８倍量渗漉液，渗漉液减压回收乙醇并浓缩至每１ｍｌ相当于原生药０．５ｇ的提取液；（３）再分下列四种方法任一方法进行纯化：方法一：取苦碟子提取液高速离心，取 上清液用聚酰胺柱吸附，先用水洗至流出液无色，再用４－６倍柱体积量６０％－８０％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每１ｍｌ相当于原生药０．５ｇ，用截留分子量１００００－３００００的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到苦碟子纯化提取物；方法二：取苦碟子提取液高速离心，取上清液上大孔吸附树脂吸附，用３－４倍柱体积的水洗，再用４－６倍柱体积量６０％－８０％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每１ｍｌ相当于原生药０．５ｇ，用截留分子量 １００００－３００００的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到苦碟子纯化提取物；方法三：取苦碟子提取液在搅拌下加１０％氧化钙乳调ｐＨ１０，放置１２小时，离心，离心沉淀物悬浮于乙醇中使含醇量达８０％，加酸调节ｐＨ值至３－４，充分搅拌使 反应完全，离心，离心液加４０％氢氧化钠溶液至ｐＨ至７－８，抽滤，滤液回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释至每１ｍｌ相当于原生药４ｇ，置－５℃以下放置１２小时以上，过滤，滤液减压浓缩并干燥，得到苦碟子纯化提取物；方法四：取苦碟子提取液加乙 醇，搅拌均匀，使含醇量达６０％，冷藏，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩使含１ｇ生药／ｍｌ，加乙醇搅拌均匀使含醇量达８０％，冷藏，滤...

【技术特征摘要】
1.一种苦碟子注射制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)原料药为苦碟子；(2)分下列四种方法任一种进行提取方法一取苦碟子药材，第一次加10-12倍量水煎煮1小时，第二次加6-8倍量水煎煮0.5小时，合并煎煮液，过滤，浓缩至每1ml相当于原生药0.5g的提取液；方法二取苦碟子药材，粉碎过20-50目筛，加6-8倍量60％-80％乙醇，20KHz频率超声提取二次，第一次30min，第二次20min，提取液过滤，合并，减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5g的提取液；方法三取苦碟子药材，粉碎过20-50目筛，加6-8倍量60％-95％乙醇回流提取三次，每次1小时，提取液过滤，合并，减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5g的提取液；方法四取苦碟子药材，粉碎过20-50目筛，用80％-95％乙醇渗漉提取，收集6-8倍量渗漉液，渗漉液减压回收乙醇并浓缩至每1ml相当于原生药0.5g的提取液；(3)再分下列四种方法任一方法进行纯化方法一取苦碟子提取液高速离心，取上清液用聚酰胺柱吸附，先用水洗至流出液无色，再用4-6倍柱体积量60％-80％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5g，用截留分子量10000-30000的超滤膜超滤，超滤液减压浓缩并干燥，得到苦碟子纯化提取物；方法二取苦碟子提取液高速离心，取上清液上大孔吸附树脂吸附，用3-4倍柱体积的水洗，再用4-6倍柱体积量60％-80％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，加注射用水稀释至每1ml相当于原生药0.5g，用截...

【专利技术属性】
技术研发人员：张海峰，
申请(专利权)人：张海峰，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]