植物中果胶含量的连续流动测定方法技术

本发明专利技术公开一种植物中果胶含量的连续流动测定方法，包括如下步骤：1)将植物样品加入前处理液中，在水浴中加热回流；2)然后进行初次过滤，将初次过滤的滤渣用酸醇溶液冲洗；3)再将冲洗后的滤渣加入到氢离子浓度为1.5mol/L～2.5mol/L的提取液中，在水浴中加热回流；4)然后进行二次过滤，将二次过滤后的滤渣用酸溶液冲洗多次，随后将二次过滤后的滤液与冲洗液合并、定溶，得到待检测液；5)将待检测液吸入到连续流动分析仪中，所述待检测液与吸入到连续流动分析仪中的强酸性分解试剂反应，分解成糠醛碱的衍生物，而后与加入的显色剂反应显色，在490nm～540nm波长下进行检测。本发明专利技术具有检测结果准确的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物组分的提取，尤其涉及一种植物中果胶含量的连续流动测定方 法。
技术介绍
在植物中果胶含量的测定中，常需用到显色法检测，但在显色法检测时，由于色素 会有一定吸光度，从而对显色法造成干扰，同时糖会与显色剂反应形成有色物质，这也会对 显色法造成干扰，所以在测定过程中，通常都需要先进行除糖、除色素的前处理。在植物中 果胶含量的测定中，常用的样品前处理方法是将植物粉末样品用浓度为80%的乙醇溶液 加热回流1小时，去除滤液，余下滤渣再做进一步的提取处理，用于其它检测，此种方法一 般称为乙醇处理法，但这种乙醇处理法存在的问题是只能除去小分子水溶性糖，同时对色 素的提取也有一定局限性。而在滤渣处理时，有时候需要用酸液提取，这就造成之前来被提 取出来的多糖水解而被提取出来，而由于酸的作用破坏了细胞壁，使之前来能溶解出来的 色素也被提取出来，从而影响最终检测结果。在进行完前处理后，要对经过前处理的样品进 行检测。现有的检测方法有重量法，由于果胶不是单纯半乳糖醛酸的聚合，在采用重量法检 测时，支链上的中性糖和a-L-(l —2)鼠李糖，以及甲酯化基团、乙酰化基团同时被沉淀下 来，所以其重量必然高于对半乳糖醛酸累计量。因此，重量法检测结果无法反映出样品中半 乳糖醛酸的含量情况，即无法反映出样品中表征果胶特性的半乳糖醛酸支链骨架的含量情 况。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术存在的缺陷，提供一种植物中果胶含量 的连续流动测定方法，检测结果更加准确。本专利技术提供的一种，包括如下步骤1)将植物样品加入前处理液中，在水浴中加热回流；2)然后进行初次过滤，将初次过滤的滤渣用酸醇溶液冲洗；3)再将冲洗后的滤渣加入到氢离子浓度为1. 5mol/L 2. 5mol/L的提取液中，在 水浴中加热回流；4)然后进行二次过滤，将二次过滤后的滤渣用酸溶液冲洗多次，随后将二次过滤 后的滤液与冲洗液合并、定容，得到待检测液；5)将待检测液吸入到连续流动分析仪中，所述待检测液与吸入到连续流动分析 仪中的强酸性分解试剂反应，分解成糠醛碱的衍生物，而后与加入的显色剂反应显色，在 490nm 540nm波长下进行检测；其中，所述前处理液为酸醇溶液，所述酸醇溶液的氢离子浓度为0. 005mol/L 0. 05mol/L,以体积百分比计，所述酸醇溶液的醇浓度为60% 80%。优选地，所述酸醇溶液选用盐酸或醋酸制成。优选地，所述酸醇溶液选用乙醇、异丙醇、甲醇中的任一种制成。优选地，所述提取液为氢离子浓度为1. 5mol/L 2. 5mol/L的盐酸溶液。优选地，步骤1)中，在80°C 100°C的水浴中加热回流IOmin 60min。优选地，步骤3)中，在80°C 100°C的水浴中加热回流Ih 汕。优选地，所述初次过滤、二次过滤均采用玻璃纤维滤片、活性炭纤维滤片、聚乙烯 滤片、不锈钢烧结滤片、陶瓷烧结坩埚、玻璃烧结坩埚中的任一种进行过滤。优选地，步骤幻中将待检测液与强酸性分解试剂通过螺旋管混合，在待检测液与 强酸性分解试剂反应过程中加热，而后冷却。优选地，所述植物样品为粉末状。优选地，步骤1)中，所述植物样品体积较大时，加入前处理液后先搅拌成浆，再进 行水浴加热回流。优选地，所述显色剂为对羟基联苯溶液，所述对羟基联苯溶液中的各组分配比为 IOOOmL蒸馏水中溶解300mg 500mg对羟基联苯及3g 5g氢氢化钠。优选地，所述强酸性分解试剂为含有四硼酸钠的浓硫酸溶液，其中，四硼酸钠与浓 硫酸的配比为1000mL浓度为92% 99%的浓硫酸中溶解3g 6g的四硼酸钠。优选地，在待检测液与强酸性分解试剂反应过程中加热的温度为90°C 99°C。优选地，冷却采用匝数为20匝 50匝的冷却管冷却。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点一、由于采用酸醇溶液作为前处理液对植物样品进行处理，再用氢离子浓度为 1. 5 2. 5mol/L的提取液进行提取，从而得到待检测液，因此，具有如下优点1、由于前处理液含有醇，醇可以有效提取植物样品中的糖和色素，并可以沉淀果 胶；2、由于前处理液含有酸，在酸性条件下，使植物样品中部分多糖水解成低分子糖， 一并被提取出来，避免多糖在其后酸解时水解释放出来而干扰样品的显色检测；通过酸化作用可以破坏植物样品的细胞壁，使包裹在里面的色素和糖类组分更容 易被提取出来，从而大幅缩短除糖、除色素的时间，也有利于其后果胶的提取，可减少其后 的样品果胶萃取时间；此外，适当浓度氢离子的存在，可以破坏植物组分表面的水化层和电荷，从而有利 于果胶、蛋白质等大分子植物组分的沉淀，减小植物组分的溶解和水解造成的损失，提高后 续测定的准确性。但酸性过强会使植物组分水解成为水溶性组分，本专利技术中的酸醇溶液，氢 离子浓度在0. 005mol/L 0. 05mol/L之间，能够有利于植物组分的沉淀，而又不会使植物 组分水解成为水溶性组分；3、较之现有技术-乙醇处理法只能除去小分子水溶性糖的局限，本专利技术采用酸醇 溶液处理可以使植物中的多分子糖类水解并被提取出来，避免了在其后酸解浸提果胶时， 多分子糖类水解被提取出来，避免糖类组分与显色剂发生反应显色而对检测造成干扰；二、由于采用连续流动法对经过处理得到的待检测液进行检测，将待检测液吸入 连续流动分析仪中，与强酸性分解试剂反应，对待检测液中果胶进行腐化、分解，因而使得 检测过程更加容易。附图说明图1是本专利技术的流程图2是本专利技术中利用连续流动分析仪的检测流程图3是半乳糖醛酸标准溶液显色后的吸光度扫描谱图4是样品提取液显色后的吸光度扫描谱图5是分析仪吸光度扫描图之一；图6是标准曲线描图之一；图7是分析仪吸光度扫描图之二 ；图8是标准曲线扫描图之二。具体实施方式为使本专利技术的专利技术目的、技术方案更加清楚，以下通过实施例进行详细说明。参见图1，本专利技术的，包括如下步骤Si、将植物样品加入前处理液中，在水浴中加热回流；设置此步骤，可以使植物样品中的糖和色素被前处理液提取，除去植物样品中影 响检测结果的糖和色素；S2、然后进行初次过滤，将初次过滤的滤渣用酸醇溶液冲洗多次；经过过滤得到的滤渣，再用酸醇溶液冲洗多次，可以将滤渣上附着的滤液极大程 度地去除；S3、再将冲洗后的滤渣加入到氢离子浓度为1. 5 2. 5mol/L的提取液中，在水浴 中加热回流；通过此步骤，使得滤渣中的果胶被提取液提取出来；S4、然后进行二次过滤，将二次过滤后的滤渣用酸溶液冲洗多次，随后将二次过滤 后的滤液与冲洗液合并、定容，得到待检测液；通过此步骤，使得提取液中提取得到的果胶能够充分收集，得到待检测液，以使最 终检测结果更加准确；S5、将待检测液吸入到连续流动分析仪中，所述待检测液与吸入到连续流动分析 仪中的强酸性分解试剂反应，分解成糠醛碱的衍生物，而后与加入的显色剂反应显色，在 490nm 540nm波长下进行检测；待检测液通过与强酸性分解试剂反应，使得果胶腐化，转化为可以显色的衍生物， 从而更便于光度检测；其中，前处理液为酸醇溶液，该酸醇溶液的氢离子浓度为0. 005mol/L 0. 05mol/ L,以体积百分比计，该酸醇溶液的醇浓度为60% 80%。其中，显色剂为对羟基联苯溶液，该对羟基联苯溶液中的各组分配比为1000mL 蒸馏水中溶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种植物中果胶含量的连续流动测定方法，其特征在于，包括如下步骤：１）将植物样品加入前处理液中，在水浴中加热回流；２）然后进行初次过滤，将初次过滤的滤渣用酸醇溶液冲洗；３）再将冲洗后的滤渣加入到氢离子浓度为１．５ｍｏｌ／Ｌ～２．５ｍｏｌ／Ｌ的提取液中，在水浴中加热回流；４）然后进行二次过滤，将二次过滤后的滤渣用酸溶液冲洗多次，随后将二次过滤后的滤液与冲洗液合并、定容，得到待检测液；５）将待检测液吸入到连续流动分析仪中，所述待检测液与吸入到连续流动分析仪中的强酸性分解试剂反应，分解成糠醛碱的衍生物，而后与加入的显色剂反应显色，在４９０ｎｍ～５４０ｎｍ波长下进行检测；其中，所述前处理液为酸醇溶液，所述酸醇溶液的氢离子浓度为０．００５ｍｏｌ／Ｌ～０．０５ｍｏｌ／Ｌ，以体积百分比计，所述酸醇溶液的醇浓度为６０％～８０％。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孔浩辉，程志颖，周瑢，
申请(专利权)人：广东中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：81