一种免疫磁性纳米微球及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了一种免疫磁性纳米微球及其制备方法和用途。首先在反相微乳液中一步直接制备出磁性纳米药物微球，然后在交联剂的作用下，将单克隆抗体连接在微球的表层，这样可制得具有良好磁相应性的，载药量可达１０．８％，２０ｄ药物缓释可达到９５．９％，粒径在１００～３００ｎｍ的免疫磁性纳米药物微球，同时该免疫微球具有特异靶向肿瘤的功能。本发明专利技术具有操作方法简单，药物含量可控，微球粒径可调节，药物长时间释放，以及磁靶向和抗体特异靶向性等特点。本发明专利技术可用于恶性肿瘤的靶向定位治疗。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物制剂领域，具体涉及具有免疫磁性的高分子纳米药物微球的制备方法以及这种药物的应用。
技术介绍
传统的抗肿瘤药物是通过各种途经给药后，达到一定的血药浓度分布于全身而产生治疗作用。这种治疗方法最大的缺陷是缺乏选择性，同时还产生毒副作用，从而导致治疗肿瘤的效果并不理想。为了提高化疗药物对肿瘤的靶向作用，增加药物的有效利用率，人们提出了导向药物的设想，即用某种具有特殊亲和力的载体将抗肿瘤药物选择性地分布于体内癌变部位，降低其对正常组织的毒副作用，并使癌变组织的药物浓度增大。其中阿霉素(英文名称为doxorubicin)是阻碍癌细胞中核酸合成的一种广谱抗癌药。它具有强效的抗癌活性，但临床应用毒副作用大，对正常组织和器官产生严重损伤(S.Mitra，U.Gaur，P.C.Ghosh，A.N.，et al.Tumour targeted delivery of encapsulateddextran-doxorubicin conjugate using chitosan nanoparticles as carrier.J Control Rel，74(2001)317-323)。为了提高其药物效果，减小毒副作用，人们将其负载于生物大分子，脂质体，纳米高分子微粒，聚合物结合体和聚合物胶束等一系列药物载体系统，从而达到控释药物和提高病灶部位药物浓度的目的。控释体系所用的载体材料须是可生物降解或生物相容性好的聚合物，可生物降解的聚合物包括天然和合成两类。天然可生物降解的高分子材料主要包括血清蛋白、明胶、壳聚糖、海藻酸钠等；合成类的可生物降解聚合物，如脂肪族聚酯、聚氰基丙烯酸烷基酯、聚原酸酯、聚己内酯、聚尿烷、聚氨基酸等(张蜀，谭载友，陈济民.聚乳酸类缓释、控释注射剂的研究进展。《中国药学杂志》，2002，37(11)810-812)。天然的高分子材料，具有良好的生物相容性，且海藻酸钠、壳聚糖等材料的价格又低廉，是比较理想的可降解载体材料。磁性抗癌微粒是新一代靶向给药系统，在足够强的外磁场作用下，药物微球可滞留于局部组织，缓慢释放高浓度抗癌药物，实现药物的定位释放，从而产生靶向的、高效低毒的药物效应(陶凯雄，陈道达，田源，吴在德，虎风仙，抗癌药物磁性微球靶向给药的药代动力学研究，实用癌症杂志，7(2000)，347-349)。其优点是，可以避免被网状内皮系统的巨噬细胞吞噬(朱盛山，药物新制剂，北京，人民卫生出版社，1993)。另外生物靶向治疗是随着现代生物技术的发展而发展起来的新型靶向给药系统，利用细胞膜表面受体、单克隆抗体的专一性，将配体、抗体结合在载体上与靶细胞表面受体特异性结合，使药物准确到达靶细胞(罗莎，吴华.肿瘤靶向诊断及治疗中的导向系统研究进展，放射学实践，2004，19(1)64-66)。这些药物载体，一方面可对药物起到缓释、控释作用，另一方面具有靶向功能，可对病变部位靶向给药，使阿霉素在病变部位聚集；同时载药量大且有缓释药物的特点，提高药物治疗效果，降低药物对正常组织的毒副作用，为抗肿瘤药物治疗提供新的具有靶向功能的药物。近年来，人们对各种载体及其制备进行了大量的研究。早在1978年，widder等就开始利用白蛋白制备亚微米级的药物控释粒子。作为药物载体，白蛋白是一种优良的天然高分子材料。但早期制备的白蛋白微球，粒径偏大，临床应用会引起栓塞，限制了其进一步的应用(Wedder KJ，Senyei AE，Scarpelli DG.Magnetic microspheresA model system for site specific drug deliveryin vivo.Proc Exp Bio Med，1978，158(1)141-146)。谭家驹等改进传统的方法，采用反相微乳液的方法，以油酸作为油相，span-85为表面活性剂，通过形成水相含有白蛋白和磁粉的反相微乳液，加热固化等步骤，制备出磁性白蛋白纳米粒子的粒径在200nm左右(谭家驹，张春富，冯彦林等.靶向治疗用Fe3O4及其白蛋白包被磁性纳米粒子的制备，中国医学工程杂志，2003，11(6)30-32)，适合靶向治疗癌症的进一步研究。董聿生等用反相悬浮包埋技术合成了粒径在43～295μm之间的磁性琼脂糖微球。(董聿生，梁峰，余向阳，常建华，郭立安，磁性琼脂糖亲和吸附剂的合成与应用，2001，31(2)121-123)Fe3O4含量5.5％，形状规则，表面光滑，具有良好的磁响应性。Tadahiko等应用逆相蒸发法(reverse-phase evaporation method)制备磁性阿霉素脂质体治疗大鼠骨肉瘤，脂质体平均直径146nm。在肿瘤内植入磁场的引导下，静脉注射磁性阿霉素脂质体后其肿瘤内阿霉素浓度比静脉注射同剂量的游离阿霉素高出4倍，而心脏、肾脏内的阿霉素浓度要比静脉注射同剂量的游离阿霉素低(Tadahiko K，Takashi S，Shoji S，et al.Targeted systemicchemotherapy using magnetic liposomes with incorporated adriamycin forosteosarcoma in hamsters.Int.J Oncology，2001，18121)。上述的制备方法中，没有磁性的微球，粒径小，达到纳米级，但载药量都不高，在加入磁粉后，微球的粒径变得很大，达到几百微米，从而阻碍了进一步的应用。Suzawa等将阿霉素，通过聚乙二醇和二肽构成的复合物与单克隆抗体结合形成药物偶联物。结果显示，这种药物偶联物能够特异靶向肿瘤细胞，并被肿瘤细胞表达的特定酶所分解而释放出药物，从而起到提高药物浓度，减少毒副作用(Suzawa T，Nagamura S，Saito H，et al.Enhanced tumor cell selectivityof adriamycin-monoclonal antibody conjugate via a poly(ethyleneglycol)-based cleavable linker[J] J ControlledRelease，2002，19(1-3)229-242)。Kader Abdul等将低密度脂蛋白结合抗肿瘤药物如5-氟尿嘧啶、多柔比星阿霉素，靶向人宫颈癌细胞、乳腺癌细胞，通过受体介导的摄取和细胞内化，药物能成功地在脂蛋白受体中释放，提高了药物利用率，减少了副作用(Kader Abdul，Pate Alan.Loading anticancer drugs into HDLas well as LDL has little affect on properties of complexes and enhancescytotoxicity to human carcinoma cells[J].J Control Release，2002，80(1-3)29-44)。Yokoyama H等将肿瘤细胞坏死因子(TNF)与无唾液酸糖蛋白受体的配体(ASGP-R)的特异性配基半乳糖偶联，再进行放射性核素标记得TNF-Gal-核素复合物，通过ASGP-R将TNF-Gal-核素复合物导入肝脏，利本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种免疫磁性纳米微球，其中以生物可降解高分子材料为高分子包裹层，包裹层内包含缓释药物和纳米磁性材料，表层连接有单克隆抗体，纳米微球的粒径范围在６０～８００ｎｍ。

【技术特征摘要】
1.一种免疫磁性纳米微球，其中以生物可降解高分子材料为高分子包裹层，包裹层内包含缓释药物和纳米磁性材料，表层连接有单克隆抗体，纳米微球的粒径范围在60～800nm。2.根据权利要求1所述的纳米微球，其中所述纳米微球的平均粒径100-300nm。3.根据权利要求1所述的纳米微球，其中所述的缓释药物含量占整个微球重量的0---20％(w/w)。4.根据权利要求3所述的纳米微球，其中所述的缓释药物含量占整个微球重量的0---15％(w/w)。5.根据权利要求1、3或4所述的纳米微球，所述的缓释药物选自水溶性的化疗药物。6.根据权利要求5所述的纳米微球，所述的水溶性的化疗药物选自阿霉素、顺铂、表阿霉素的一种或其组合。7.根据权利要求6所述的纳米微球，所述的水溶性的化疗药物选自阿霉素。8.根据权利要求1-4任一所述的纳米微球，所述的以生物可降解高分子材料选自琼脂糖、壳聚糖、葡聚糖、海藻酸钠的一种或其组合。9.根据权利要求8所述的纳米微球，所述的以生物可降解的高分子材料选自海藻酸钠，其含量占整个微球重量的60-75％(w/w)。10.根据权利8所述的纳米微球，所述的单克隆抗体是异靶向性的单克隆抗体，选自人乳腺癌单抗M4G3Ab、抗肺癌单抗CD3抗体、抗大肠癌CL-3单抗转铁蛋白受体单抗WuT9、抗胃癌细胞单抗、抗PSMA单克隆抗体Ed-5、人肝癌单抗Hab18之一或其组合。11.根据权利10所述的纳米微球，所述的单克隆抗体选自Hab18。12.根据权利11所述的纳米微球，所述的单克隆抗体含量为每毫克微球含Hab18为35-65ug。13.根据权利1-6所述的纳米微球，所述的包裹层内的纳米磁性材料为纳米碳包铁粉末，其含量占整个微球重量的10-20％(w/w)，14...

【专利技术属性】
技术研发人员：周汉新，李富荣，颜秋平，齐晖，任莉莉，汤顺清，
申请(专利权)人：深圳市人民医院，
类型：发明
国别省市：94[中国|深圳]