抗猪繁殖与呼吸综合征、猪2型圆环病毒二联高免免疫球蛋白制造技术

抗猪繁殖与呼吸综合征、猪２型圆环病毒二联高免免疫球蛋白，其免疫原用取细胞培养物经浓缩后加完全弗氏完全佐剂制备而成，浓缩后将这两种病毒抗原以体积比（１～３）∶（１～３）的比例混合后按照体积比１∶１加入弗氏完全佐剂作为免疫原免疫动物，同时使用吉林鲸象动物药业有限公司生产的苷肽注射液作为免疫增强剂，以提高抗体效价，其制备方法按照中华人民共和国兽用生物制品规程（２０００年版）规定的方法对制备的高免免疫球蛋白进行加工；本发明专利技术的产品主要是针对目前对我国养猪业威胁最为严重的两种疾病；具有组方科学，特异性高，针对性强，疗效确实、安全性好、不会产生药物残留、保存和使用方便的积极效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体涉及一种抗猪繁殖与呼吸综合征、猪2型圆环病毒的二联高免免疫球蛋白，国际专利分类号为A61K39/395。
技术介绍
猪繁殖与呼吸综合征和猪2型圆环病毒病是近年来在我国猪群发生的严重危害养猪业的新的传染病。这两种疾病来自于进口猪，在我国属于新近引进的疾病。由于目前我国属于新疫区，故这两种疾病在我国的流行以及危害程度也比较严重。往往造成母猪流产和仔猪成窝的死亡。对养猪业造成了巨大的损失。猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)又叫蓝耳病，是由披膜病毒科(Togaviridse)动脉炎病毒属(Arterivirus)的猪繁殖呼吸道综合征病毒(Porcinereproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)所引起以怀孕母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍及仔猪严重呼吸道症状和高死亡率为特征的一种传染病。在发现该病的初期，由于当时不明白其病因，因此将其称为“神秘猪病”(MSD)。直到1991年春季，荷兰科学家找到了导致“神秘猪病”的病毒，证实猪繁殖与呼吸综合征是由由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的疾病。上世纪90年代初，PRRS已成为一种全球性的流行病，至今还对养猪业造成着巨大的经济损失。在临床上猪繁殖与呼吸综合征以怀孕母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍及仔猪呼吸道症状和高死亡率为特征疾病。经产和初产母猪出现精神沉郁、冷漠、厌食、发热、呼吸困难等症状，有时还出现呕吐。重要的是出现这些症状后，大量怀孕母猪流产或早产，主要见于妊娠后期的母猪流产严重，表现为突然出现厌食，部分猪可能会出现呼吸道症状，如喷嚏、咳嗽等类似猪流感的症状，部分母猪体温稍高，但通常不出现高热稽留。有的母猪拉干粪。严重的病例出现沉郁、呼吸困难等。耳间、耳边呈现蓝紫色。有的四肢末端、腹侧有水肿，有的皮肤有红斑，大面积梗死和大的疹块，阴部肿胀。产出死胎、弱仔胎、木乃伊胎、组织自溶胎儿和假似健康胎儿。这些弱小仔猪出生后外表正常，不久便出现呼吸困难，在呼吸困难中可见到呃逆样表现，常会在24小时内死亡。有的出现腹泻，导致死亡或生长停止。有的产后母猪因发热、厌食、少奶或无奶而导致仔猪大批死亡。仔诸死亡率可达80％～100％。有的母猪断奶后发情时间延长。圆环猪病毒感染是由猪2型圆环病毒所引起的疾病。猪圆环病毒(Porcine Circovirus PCV)是圆环病毒科(Circoviridae)圆环病毒属成员，正二十面体对称，无囊膜，直径17-22nm，为单股环状DNA病毒，DNA长度约为1768bp，是迄今发现的最小的动物病毒。PCV存在两种基因型，即PCV-1和PCV-2。PCV-1无致病性，普遍存在于猪源细胞系及正常猪体内各组织中。PCV-2可引发猪发生多种疾病。病猪和隐性感染的带毒猪是主要的传染源。由猪2型圆环病毒所引起的主要疾病是(1)仔猪断奶后多系统衰竭综合症(Post-weaning multisystemicwasting sysdrome，PMWS)病猪精神、食欲不振，消化不良，腹泻，被毛粗乱，生长迟缓或停滞，进行性消瘦，肌肉无力。气喘，咳嗽，呼吸困难。皮肤苍白，贫血。体表淋巴结，尤其是腹股沟淋巴结肿大。偶见的临床症状有发热，胃溃疡，嗜睡，神经紊乱，猝死等。在临床上大约有20％左右的病猪呈现贫血与黄疸症状。PMWS的发病率一般为5％～30％，死亡率可达70％～80％。(2)猪皮炎与肾病综合症(PDNS)病猪厌食，消瘦和生长停滞，皮肤苍白，少数病猪皮肤发黄。部分病猪体温升高，后期喘气症状明显，咳嗽不一定很严重。有些病猪发生腹泻，关节肿胀或跛行。多数发病仔猪的腹股沟淋巴结明显肿大。(3)母猪繁殖障碍发病猪体温升高，可达41℃～42℃。食欲减退，出现流产，产死胎、木乃伊胎、弱胎，断奶前仔猪死亡率上升，病后母猪受胎率降低或不孕。(4)猪间质性肺炎其临床表现主要为猪呼吸道病综合症(PRDC)，多见于保育期和育肥期的猪。病猪咳嗽，流鼻涕，呼吸加快，精神沉郁，食欲不振，生长缓慢。在PCV-2与蓝耳病(PRRS)混合感染时，可使临床症状加剧并大大增加死亡率。(5)仔猪先天性震颤发病仔猪站立时震颤，由轻变重，卧下或睡觉时震颤消失，受外界刺激时可以引发或加重震颤，严重时可影响吃奶，以致死亡。目前我国用于预防PRRS病毒疫苗有弱毒疫苗和灭活疫苗。毫无疑问，这两种疫苗在控制PRRS的发生和流行中都起到了积极的作用。弱毒疫苗的优点是免疫保护效果确实，免疫期长。肌肉接种弱毒疫苗后，会在猪体内复制产生病毒血症，病毒血症的持续期大约为2～4周时间。种公猪接种后会从精液排出疫苗病毒，妊娠母猪接种后，可产出获得免疫的健康仔猪。其缺点是在使用过程中，有些弱毒疫苗的毒株可能会与野毒株杂交，使其毒力返强，存在安全隐患。灭活疫苗的优点是比较安全，但其免疫保护其较短，需要多次注射加强免疫。但也可产生一定的免疫保护并能减少PRRS感染带来的损失。对PRRS而言，在自然条件下，受到PRRS病毒感染的猪不会很快的产生保护性免疫应答而从动物体内清除病毒，正常猪的免疫系统可能要花上几个月的时间才能从机体内清除PRRS病毒。而且，疫苗所诱导出的免疫应答要比猪对野毒的免疫应答弱。对于2型圆环病毒感染目前我国还没有可供使用的商品化疫苗。在我国目前的情况下，对于这两种疾病，由于没有特效的治疗药物以及饲养条件及其它方面条件的制约，加之又是新发生的疾病，饲养者几乎没有对这两种疾病进行免疫的概念，经常不使用PRRS疫苗进行免疫。加之这两种疾病又经常会出现混合感染并引起感染猪机体发生免疫障碍，从而引起其他疾病的的继发感染(如猪链球菌病的继发感染)，使猪群的死亡率急剧增加，尤其是对于饲养商品猪的养殖场、户，经常造成全军覆没的后果。在动物发病后，只能使用抗生素类药物或免疫调节制剂，控制并发的细菌性感染和提高动物机体的非特异性免疫功能，不能从根本上解决问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种采用两种免疫原制备的具有特异性高，针对性强，疗效确实的抗猪繁殖与呼吸综合征、猪2型圆环病毒二联高免免疫球蛋白。本专利技术的免疫原用取细胞培养物经浓缩后加完全弗氏佐剂制备而成，用Marc-145细胞培养猪繁殖与呼吸综合征病毒，病毒校价达到106～8。用PK-15细胞培养猪2型圆环病毒，病毒校价达到105～6，将这两种免疫原以(1～3)∶(1～3)的比例混合后按照体积比加入1∶1弗氏佐剂作为免疫原免疫动物。同时使用吉林鲸象动物药业有限公司研制成的苷肽注射液(专利技术名称为一种提高动物免疫功能的苷肽注射液，中国专利申请号为2005 1 0016626.2)作为免疫增强剂，5毫升/支，以提高抗体效价。本专利技术的免疫动物使用经过严格检疫的猪、马(骡、驴)作为免疫动物。本专利技术的免疫程序免疫途径采用皮内、皮下或穴位、肌肉多点注射。基础免疫剂量为每头猪3ml，马(骡、驴)5ml。免疫方式猪为皮下或肌肉多点注射，马(骡、驴)用皮内、皮下或穴位多点注射。间隔28天进行第一次加强免疫，免疫剂量为猪8ml，马(骡、驴)12ml。以后每间隔14天抗体效价达不到此标准，继续加强免疫一次，然本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗猪繁殖与呼吸综合征、猪２型圆环病毒二联高免免疫球蛋白，免疫原采用取细胞培养物经浓缩后加完全弗氏佐剂制备而成，其中用Ｍａｒｃ－１４５细胞培养猪繁殖与呼吸综合征病毒，其病毒校价达到１０↑［６～８］和用ＰＫ－１５细胞培养猪２型圆环病毒，其病毒校价达到１０↑［５～６］；免疫佐剂为弗氏完全佐剂；免疫增强剂为吉林鲸象动物药业有限公司生产的苷肽注射液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张中洋，
申请(专利权)人：张中洋，
类型：发明
国别省市：22[中国|吉林]