蒽环类药物纳米制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，具体涉及阿霉素等蒽环类药物的一种纳米新制剂及其制备方法，本制剂由阿霉素等蒽环类药物、核酸和阳离子化合物组成。具体制备过程为蒽环类药物先与核酸复合，再与阳离子化合物复合形成纳米颗粒。该制剂具有降低了蒽环类药物的生理毒性而不降低其抗癌活性，具有肿瘤靶向性的特点，可以制备成治疗肿瘤的药物。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药
，具体涉及阿霉素等蒽环类药物的一种纳米新 制剂及其制备方法。二、
技术介绍
阿霉素等蒽环类药物是临床最常用的抗肿瘤药物。其作用机制主要是其分子 的蒽环平面结构插入到DNA分子双链结构中，影响DNA的功能，抑制DNA复制和 RNA转录，从而抑制肿瘤的增殖，为细胞周期非特异性药物。其特点主要有抗癌 谱广，化疗指数高等。但是其除了存在骨髓抑制、恶心、呕吐、口炎、脱发、高 热、出血症状、静脉炎和皮肤色素沉着等毒副反应外，还存在剂量依赖的心脏毒 性，表现为各种心律失常，累计剂量大时还会发生心肌坏死甚至充血性心力衰竭。 这些毒副作用大大限制了该类药物的临床应用。为此，人们正在努力寻找降低该 类毒性的有效办法，包括开发的新剂型，大分子修饰，联合用药等等。而蒽环类 抗肿瘤药物的新纳米剂型成为一个新兴的增长点，如阿霉素脂质体等。近年来，纳米技术为药物的传输提供了新的方式和途径。药剂学中的纳米粒 可以分成两类纳米载体和纳米药物。纳米载体系指溶解或分散有药物的各种纳 米粒，如纳米脂质体、聚合物纳米囊、纳米球、聚合物胶束等。纳米药物则是指 直接将原料药物加工成的纳米粒。纳米粒在体内有延长循环时间、增加药物稳定 性，靶向性等特点，是抗肿瘤药物、抗寄生虫药物的良好载体。而纳米载体中的 纳米囊和纳米球主要由聚乳酸、聚丙交酯-乙交酯、壳聚糖、明胶等高分子材料 制备而成。可用于包裹亲水性药物。也可包裹疏水性药物。根据材料的性能，适 合于不同给药途径如静脉注射的靶向作用、肌肉或皮下注射的缓控释作用。但是，传统的纳米制剂存在着制备过程复杂，制备条件要求较高，制备要求 仪器较为昂贵，从而导致生产成本较高的缺点。另外，传统的纳米制剂还存在着 QCQA难以控制，包封率低，生物利用度低等缺点。本专利技术通过常温下的物理复 合，工艺简单，有效解决了传统纳米制剂的高成本，QCQA难以控制，包封率低， 生物利用度低等缺点，同时阳离子聚合物的引入， 一方面可以提高药物的利用度, 同时还为增加靶向性所进行的配体修饰提供了极大的便利。 三、
技术实现思路
本专利技术需要解决的问题是公开了一种阿霉素等蒽环类药物的新的纳米制剂，具体涉及蒽环类药物与阳离子化合物的有效复合，复合的媒介物质为核酸。 本专利技术蒽环类药物-核酸-阳离子化合物纳米颗粒的制备过程1. 将蒽环类药物和核酸按照质量比为20:1， 8:1， 4:1， 2:1， 1:1， 1:2复 合，在激发光480 nm、发射光570 nm处测试荧光强度，选择最佳的复 合比。2. 将蒽环类药物-核酸复合物与阳离子化合物按照质量比为8:l， 4:1， 2:1， 1:1， 1:2复合，进行凝胶阻滞试验，获得最佳复合比。本专利技术阿霉素-核酸-阳离子化合物纳米颗粒的制备方法1. 将不同的蒽环类药物与核酸按上述最佳复合比复合，震荡混匀后静置 1. 5小时，2. 将上述蒽环类药物-核酸复合物与不同的阳离子化合物按上述最佳复合 比复合，震荡混匀后即得本专利技术制剂。本专利技术蒽环类药物-核酸-阳离子化合物纳米颗粒可以用于抗肿瘤的研究，制 备抗肿瘤药物。为在S180荷瘤小鼠种瘤后五天局部进行瘤内注射，然后每天测 量肿瘤直径。在药物治疗后两周，处死小鼠，取出肿瘤，称重比较。本专利技术的有益效果是改变了蒽环类药物的体内分布，有效降低了蒽环类药物 的心脏毒副作用，增强了蒽环类药物的抗肿瘤活性。同时，本法制备原料易于获 取，简单便宜，制备过程全部为常规条件下物理复合，不改变药物的性质，并能 够有效降低成本。另外，本法制备蒽环类药物新剂型包封率高，性质稳定，便于 保存和运输。 四附图说明图1:表柔比星-DNA-阳离子化的明胶复合物的荧光光谱，曲线由上到下以此代 表表柔比星的荧光光谱图；表柔比星-DNA-阳离子化的明胶复合物的荧光光谱 图；表柔比星-DNA复合物的荧光光谱图；生理盐水的荧光光谱图。图2:柔红比星-DNA-壳聚糖复合物电泳阻滞实验图，1:第一泳道为DNA， 2: 第二泳道为柔红比星-DNA复合物，3:第三泳道为DNA-壳聚糖复合物，4:第四 泳道为柔红比星-DNA-壳聚糖复合物。图3: DNA、阳离子化的明胶和DNA-阳离子化的明胶复合物对Hela的细胞毒性结果參DNA，翻阳离子化的明胶，ADNA-阳离子化的明胶复合物。图4:表柔比星-DNA-阳离子化的明胶复合物、表柔比星对Hela的细胞毒性结果參表柔比星-DNA-阳离子化的明胶复合物，B表柔比星。图5: DNA、壳聚糖和DNA-壳聚糖复合物对HepG2的细胞毒性结果，暴DNA， ■ 壳聚糖，ADNA-壳聚糖复合物。图6:柔红比星-DNA-壳聚糖复合物、柔红比星对HepG2的细胞毒性结果參柔 红比星-DNA-壳聚糖复合物，B柔红比星。图7:多柔比星-DNA-多聚赖氨酸复合物与多柔比星的体内分布图，白柱状图多 柔比星-DNA-多聚赖氨酸复合物，斜影柱状图多柔比星。图8:伊达柔比星-DNA-多聚组氨酸复合物抑瘤实验中肿瘤大小的测量结果■生理盐水组，參单纯伊达柔比星组，A伊达柔比星-DNA-多聚组氨酸复合物组。图9:伊达柔比星-DNA-多聚组氨酸复合物抑瘤实验中肿瘤的实物照片图。图10:多柔比星-DNA-聚二甲氨基甲基丙烯酸乙酯复合物抑瘤实验中肿瘤的重量统计图。图11:多柔比星-RNA-聚二甲氨基甲基丙烯酸乙酯复合物小鼠体内毒性试验中小 鼠生存率统计图B10mg/kg体重多柔比星组，參20mg/kg体重多柔比星组，▲30mg/kg体重的多柔比星组，，相当于10mg/kg多柔比星-RNA-聚二甲氨基甲基 丙烯酸乙酯复合物组，令相当于20mg/kg多柔比星-RNA-聚二甲氨基甲基丙烯酸 乙酯复合物组，口相当于30mg/kg多柔比星-RNA-聚二甲氨基甲基丙烯酸乙酯复 合物组。图12:多柔比星-DNA-聚二甲氨基甲基丙烯酸乙酯复合物小鼠体内毒性实验中小 鼠肌酐激酶变化统计图，1号复合物组，多柔比星剂量为10mg/kg， 2号复 合物组，多柔比星剂量为20mg/kg， 3号复合物组，多柔比星剂量为30mg/kg，4号10mg/kg裸多柔比星组，5号20mg/kg裸多柔比星组，6号生理盐水组。五具体实施方式本专利技术据涉及蒽环类药物与核酸的有效复合后再与阳离子化合物复合，在具 体实施过程中我们主要考查的阳离子化合物主要包括壳聚糖，聚乙烯亚胺 (polyethylenimine， PEI)、多聚赖氨酸(poly-L-lysine PLL)、多聚组氨酸、多聚精 氨酸、聚二甲氨基甲基丙烯酸乙酯(poly(2-(dimethylamino)ethyl methacrylate) ,pDMAEMA)、和阳离子化的明胶；考查的核酸包括脱氧核糖核酸 (DNA)和核糖核酸(RNA);考査的蒽环类药物主要包括柔红比星(daunorubicin， 柔红霉素，daunomycin, DNR)、多柔比星(doxorubicin, D0X, 阿霉素， adriamycin, ADM)、表柔比星(epirubicin， EPI)禾口伊达柔比星(idarubicin， 去甲氧柔红霉素，demethoxydaunorubicin， IDA)以及人工合成的米托蒽醌(mitoxatrone)。具体组合为表柔比星-DNA-本文档来自技高网...

【技术保护点】
蒽环类药物的纳米制剂，其特征是由蒽环类药物的蒽环平面插入核酸中，核酸与阳离子化合物复合形成的纳米颗粒。

【技术特征摘要】
1. 蒽环类药物的纳米制剂，其特征是由蒽环类药物的蒽环平面插入核酸中，核酸与阳离子化合物复合形成的纳米颗粒。2、 根据权利要求1所述的蒽环类药物纳米制剂的制备方法，其特征是由以下步骤构成(1) 、蒽环类药物与核酸的复合将不同的蒽环类药物与核酸按最佳复合比复 合，震荡混匀后静置1.5小时；(2) 、蒽环类药物-核酸复合物与阳离子化合物的复合将上述蒽环类药物-核 酸复合物与不同的阳离子化合物按最佳复合比复合，震荡混匀后即得蒽环类药 物纳米制剂。3、 根据权利要求1所述蒽环类药物纳米制剂，其特征是该制剂中的蒽环类药物 为柔...

【专利技术属性】
技术研发人员：张峻峰，董磊，夏苏华，陈江宁，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]