采用CD4结合肽和辐射的疗法制造技术

本发明专利技术涉及能够结合ＣＤ４的肽，例如抗体，及其调节临床疾病的辐射治疗的用途。辐射治疗例如可通过用ＰＵＶＡ治疗。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及采用辐射治疗临床疾病的领域。具体地说，本专利技术涉 及能够结合CD4的肽如抗体调节辐射治疗的用途。
技术介绍
辐射在诱导皮肤浸润性T细胞凋亡方面高度有效，并由此在患有 T细胞介导的皮肤病的患者中发挥有益作用。然而，为了足够的临床 效力，可增强(恶性)T细胞对辐射的敏感性。在淋巴瘤细胞UV暴露 后，观察到Gl期细胞累积和凋亡细胞百分率增加，其被采用Gl关卡 抑制剂2-AP的治疗增大(Takemura T等，Apoptosis. 4(4)， 245-53 (1999))。该研究还表明，Gl期p53表达水平增加与对UV辐射诱导的 细胞死亡的敏感性增加有关联。由于Gl期p53表达提升而增加放射 敏感性得到许多其它研究的支持(Cuddihy AR等，Cancer Metastasis Rev. 21(3-4), 237-57 (2004), Mcllwrath AJ等，Cancer Res. M(14)， 3718-3722 (1994), Bohnke A等，Int J Radiat Biol.艇l), 53-63 (2004)， Nagasawa M等，Oncogene.巡(23), 2889-99 (2001》。而且，已表明鳞状 细胞癌细胞通过由抗EGFR抗体C225诱导的Gl停滞对辐射敏感 (Huang SM等，Clin Cancer Res. g(6), 2166-74 (2000))。还发现Gl样静 止期的肿瘤细胞对辐射比增殖细胞更敏感(Ng CE等，Br J Cancer. f^(3), 301-307 (1987》。业已表明，p53的上调与T细胞中的重要信号途径磷脂酰肌醇3-激酶(P13K)的抑制相关(Grandage VL等，Leukemia. 1^(4), 586-94 (2005))。因为抑制性衔接分子SHIP-1是P13K抑制剂(Horn S等, Leukemia. 1^(11)， 1839-49 (2004》，所以SHIP-1的活化应因此导致p53 的上调。Dok-l和SHIP-1是所谓的在造血细胞中表达的抑制性衔接分 子，其用于减弱信号转导，由此防止不适宜的细胞活化(Veillette A等, ^(2), 301-8 (1988》。Dok-l的磷酸化触发了与SHIP画1的相互作用， 这导致P13K蛋白激酶B (PKB)/Akt途径的负调节。业已表明，Dok-l 在B细胞中的过表达引起细胞周期抑制剂p2lW^ciP1的表达增加、细 胞周期蛋白D2表达降低和抗凋亡蛋白bd-XL表达降低(Yamakawa N 等，E纖O J. 21(7)， 1684-94 (2002》。Gl/S抑制剂p21的增加和Gl细 胞周期蛋白D的降低应暗示在Dok-l活化时Gl期延长或停滞。通过在内源SfflP-l缺陷型JurkatT细胞中恢复SHIP-1表达而人 工诱导的SHIP-1表达已表明增加通过G1期的转变时间。Gl期的这 种延伸与细胞周期抑制剂p271^1的稳定性增加相关(Horn, 2004,同 上)。SHIP活化对通过Gl期前进的抑制性影响通过研究更遍在表达 的SHIP-1同源物SfflP-2得到证实，SfflP-2还在T细胞中表达(Bruyns 等，Biol Chem.里(7-8), 969-74 (1999》。SHIP-2在成胶质细胞瘤细胞 中的过表达抑制P13K蛋白激酶B(PKB)途径，并引起在G1的细胞周 期停滞，这也与细胞周期抑制剂p27Kip的稳定性增加相关(Taylor V等, Mol Cell Biol. ,8), 6860-6871 (2000》。多种诱导DNA损伤的疗法，包括UVB辐射、补骨脂素和UVA (PUVA)疗法、电离辐射、电子束和x射线(Kacinski等，AnnNYAcad Sci. Mi, 194-199 (2001))以及光分离置换法(photopheresis)(血液体外循 环，接触UVA和补骨脂素)(Baron等，Dermatol Ther. 1^(4)， 303-310 (2003)),适用于CTCL。PUVA对由正常或胂瘤性T淋巴细胞的皮肤浸润引起的皮肤病是 高度有效的治疗。有报道指T淋巴细胞对PUVA的细胞毒性作用的敏感性比其它皮肤居住细胞如角质细胞大50倍以上(Johnson等, Photochem Photobiol. @(5)， 566-571 (1996》。Gl DNA亚峰表明细胞死 亡通过凋亡发生，PUVA治疗明显减慢细胞周期进展，最终产生细胞 周期停滞和凋亡进入(Johnson R等，Photochem Photobiol. @(5), 566-571 (1996))。还已经表明，PUVA在辐射过的皮肤中导致DNA链 之间交联，受损的DNA将活化DNA修复机制，在表皮细胞(Hashimoto Y等，J Dermatol Sci. 1^(1), 16-24 (1995)或成纤维细胞(Ma W等，Exp Dermatol. 12(5), 629-37 (2003)中细胞停滞在细胞周期的G2期。专利技术概述本专利技术涉及令人惊奇的发现能够结合CD4的抗体可诱导增加 的p56^磷酸化。另外，抗CD4单克隆抗体扎木单抗(zanolimumab) 对p56^的磷酸化与p56kk酪氨酸激酶的某些底物(例如抑制性衔接分 子Dok-l和/或SHIP-1)的增加的磷酸化有关联。这些抑制性衔接分子 的活化经常导致细胞周期在Gl期延长或停滞。在Gl期停滞的细胞可 能对辐射治疗敏感(Mcllwrath， 1994,出处同上)，因此增强随后的或 并行的辐射治疗的效力。另外，抑制性衔接分子如SHIP-1的活化经 常导致P13k抑制，这经常导致p53上调，并由此可促进放疗时的T 细胞凋亡(Okkenhaug K.等，Nature reviews i 317-330 (2003))。在一个实施方案中，本专利技术涉及能够结合CD4的肽，例如抗体， 以及其调节临床疾病的辐射治疗的用途。在本专利技术背景下，能够结合 CD4的肽还可被称为CD4结合肽，能够结合CD4的抗体还可被称 为抗-CD4抗体。在一个实施方案中，按照本专利技术使用的CD4结合 肽，例如抗CD4抗体或其抗原结合片段，能够实现以下的一项或多项， 例如以下的至少2项，例如以下的至少3项，例如以下的至少4项， 例如以下的至少5项，例如以下的至少6项，例如以下的至少7项， 例如以下的至少8项，例如以下的全部-通过p56欣诱导a-酪蛋白的磷酸化，-诱导p56kk自体磷酸化，國诱导抑制性衔接分子Dok-l和/或SHIP-1和/或SfflP-2的磷酸化，画诱导p5^、介导的Dok画l磷酸化，-PKB/Akt途径的抑制，-远离TCR的CD4隐匿，國增加和/或上调p53表达，-诱导细胞周期的Gl期停滞或延长， -增加CD4+细胞、优选CD4+ T细胞对辐射的敏感性。 按照本专利技术使用的CD4结合肽，例如抗CD4抗体或其抗原结合 片段，能够结合CD4，并由此诱导p56^酪蛋白激酶的某些底物的磷 酸化。p56kk酪氨酸激酶的活化一般通过磷酸化导致酪氨酸激酶下游的 抑制性衔接蛋白(Dok-l)(Martelli MP等，J Biol Chem.本文档来自技高网...

【技术保护点】
ＣＤ４结合肽在制备用于在接受或将接受辐射治疗的个体中治疗临床疾病的药物组合物中的用途。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2005-8-18 60/709,9431.CD4结合肽在制备用于在接受或将接受辐射治疗的个体中治疗临床疾病的药物组合物中的用途。2. CD4结合肽在制备用于与辐射治疗组合治疗临床疾病的药物 组合物中的用途。3. CD4结合肽在制备用于调节临床疾病的辐射治疗的药物组合 物中的用途。4. CD4结合肽和补骨脂素化合物在制备用于临床疾病治疗的药 盒组件中的用途。5. 权利要求4的用途，其中所述药盒组件用于调节辐射治疗。6. 权利要求1-5中任一项的用途，其中所述CD4结合肽能够结 合人CD4。7. 权利要求1-6中任一项的用途，其中所述CD4结合肽使用哺 乳动物细胞培养物生产。8. 权利要求1-7中任一项的用途，其中所述CD4结合肽能够活 化p56^激酶。9. 权利要求8的用途，其中p56欣激酶的活化增加至少一种抑制 性衔接分子Dok-l和/或SHIP-1的磷酸化。10. 权利要求1-9中任一项的用途，其中用于本发明的CD4结合 肽选自在结合至CD4阳性细胞时能够活化天然杀伤细胞的CD4结合 肽。11. 权利要求10的用途，其中用于本发明的CD4结合肽在结合 至CD4阳性细胞时能够结合天然杀伤细胞上的CD16,并由此活化天 然杀伤细胞。12. 权利要求1-11中任一项的用途，其中所述CD4结合肽为抗 CD4抗体或其CD4结合片段。13. 权利要求12的用途，其中所述抗体为单克隆抗体。14. 权利要求12或权利要求13的用途，其中所述抗体为人源化 抗体。15. 权利要求12-13中任一项的用途，其中所述抗体为人抗体。16. 权利要求12-15中任一项的用途，其中所述抗体具有k型(k) 轻链。17. 权利要求12-16中任一项的用途，其中所述抗体选自扎木单 抗、凯利昔单抗、克立昔单抗、TNX/355、 TRX/1、 K)T4a、普立昔单 抗和4162W94。18. 权利要求17的用途，其中所述抗体为扎木单抗。19. 权利要求1-18中任一项的用途，其中所述辐射治疗选自补骨 脂素化合物与长波紫外线辐射(PUVA)、 UVB、窄谱UVB、高剂量 UVA、电子束和x射线的施用组合。20. 权利要求19的用途，其中所述辐射治疗为补骨脂素化合物与 长波紫外线辐射(PUVA)的施用组合。21. 权利要求20的用途，其中所述补骨脂素化合物具有以下通式<formula>formula see original document page 3</formula>或<formula>formula see original document page 3</formula>其中Rp R2、 R3、 R4、 RV和Rs独立地选自氢、卤素、C(wo)-烷 基和用面素、胺或羟基取代的Cn-io)-烷基，以及任选地用羟基取代的C(1-10)醚；或者R！和R5 —起形成吡咬并。22. 权利要求1-21中任一项的用途，其中所述补骨脂素化合物选 自吡啶并-[3,4-c]补骨脂素、7-曱基吡啶并-[3,4-c]补骨脂素、5-甲氧基 补骨脂素、8-曱氧基补骨脂素、4,5',8-三甲基补骨脂素、4-曱基补骨脂 素、4,4-二甲基补骨脂素、4-5'-二曱基补骨脂素、4',8-甲氧基补骨脂素、 4'-(co-氨基-2-氧杂)烷基-4,5',8-三甲基补骨脂素、4'-(4-氨基-2-氧杂)-丁 基-4,5'，8-三甲基补骨脂素、4'-氯曱基-4,5',8-三曱基补骨脂素、4'-氨基-曱基-4,5',8-三曱基补骨脂素、4'-(2-羟基乙氧基)-甲基-4,5',8-三甲基-补 骨脂素、4'-(6-羟基己氧基)-曱基-4,5',8-三甲基补骨脂素、4'-羟曱基 -4,5',8-三甲基补骨脂素、5-甲基-白芷素和2H-呋喃并[2,3-h][l]苯并吡 喃-2-酮。23. 权利要求22的用途，其中所述补骨脂素化合物为5-曱氧基 补骨脂素或8-甲氧基补骨脂素。24. 权利要求1-23中任一项的用途，其中所述临床疾病为恶性疾 病或炎性皮力夫病。25. 权利要求24的用途，其中所述临床疾病为恶性疾病。26. 权利要求24或权利要求25的用途，其中所述恶性疾病选自 白血病和淋巴瘤。27. 权利要求24-26中任一项的用途，其中所述恶性疾病为T细 胞前淋巴细胞性白血病。28. 权利要求24-26中任一项的用途，其中所述恶性疾病选自 CD4+皮肤T细胞淋巴瘤。29. 权利要求28的用途，其中所述恶性疾病选自蕈样肉芽肿病、 赛谢综合征、淋巴瘤样丘瘆病和间变性大细胞淋巴瘤。30. 权利要求24-26中任一项的用途，其中所述恶性疾病选自 CD4+结节性T细胞淋巴瘤。31. 权利要求30的用途，其中所述恶性疾病选自外周T细胞淋 巴瘤、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤和间变性大T细胞淋巴瘤。32. 权利要求24-31中任一项的用途，其中所述恶性疾病为至少 一种其它治疗方法难以治疗的。33. 权利要求24的用途，其中所述临床疾病为炎性皮肤病。34. 权利要求24或权利要求33的用途，其中所述炎性皮肤病选 自银屑病、皮炎湿渗、特应性皮炎、硬皮病、扁平苔藓和斑秃。35. 权利要求24、 33或34中任一项的用途，其中所述炎性皮肤 病为至少一种其它治疗方法难以治疗的。36. —种治疗恶性疾病的方法，所述方法包括给予其需要的患者 治疗有效量的CD4结合肽，并对所述患者进行辐射治疗。37. 权利要求36的方法，其中所述恶性疾病选自白血病和淋巴瘤。38. 权利要求36或权利要求37的方法，其中所迷恶性疾病为T 细胞前淋巴细胞性白血病。39. 权利要求36或权利要求37的方法，其中所述恶性疾病选自 CD4+皮月夫T细胞淋巴瘤。40. 权利要求39的方法，其中所述恶性疾病选自蕈样肉芽肿病、 赛谢综合征、淋巴瘤样丘瘆病和间变性大细胞淋巴瘤。41. 权利要求36或权利要求37的方法，其中所述恶性疾病选自 CD4阳性结节性T细胞淋巴瘤。42. 权利要求41的方法，其中所述恶性疾病选自外周T细胞淋 巴瘤、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤和间变性大T细胞淋巴瘤。43. 权利要求36-42中任一项的方法，其中所述恶性疾病是至少 一种其它治疗方法难以治疗的。44. 一种治疗炎性皮肤病的方法，所述方法包括给予其需要的患 者治疗有效量的CD4结合肽，并对所述患者进行辐射治疗。45. 权利要求44的方法，其中所述炎性皮肤病选自银屑病、皮炎 湿渗、特应性皮炎、硬皮病、扁平苔藓和斑秃。46. 权利要求44-45中任一项的治疗方法，其中所述炎性皮肤病是至少 一 种其它治疗方法难以治疗的。47. —种调节临床疾病的辐射治疗的方法，所述方法包括给予其 需要的患者治疗有效量的CD4结合肽，并对所述患者进行辐射治疗。48. 权利要求36-47中任一项的方法，其中所述CD4结合肽能够 结合人CD4。49. 权利要求36-48中任一项的方法。其中所述CD4结合肽使用 哺乳动物细胞培养物生产。50. 权利要求36-49中任一项的方法。其中所述CD4结合肽能够 活化p56^激酶。51. 权利要求50的方法，其中所述p56^激酶的活化增加至少一 种抑制性衔接分子Dok-l和/或SfflP-l的磷酸化。52. 权利要求36-51中任一项的方法，其中用于本发明的CD4结 合肽选自在结合至CD4阳性细胞时能够活化天然杀伤细胞的CD4结 合肽。53. 权利要求36-52中任一项的方法，其中用于本发明的CD4结 合肽在结合至CD4阳性细胞时还能够结合天然杀伤细胞上的CD16, 并由此活化天然杀伤细胞。54. 权利要求36-53中任一项的方法，其中CD4结合肽为抗CD4 抗体或其CD4结合片段。55. 权利要求54的方法，其中所述抗体为单克隆抗体。56. 权利要求54或权利要求55的方法，其中所述抗体为人源化 抗体。57. 权利要求54或权利要求55的方法，其中所述抗体为人抗体。58. 权利要求54-57中任一项的方法，其中所述抗体具有k型(k)轻链。59. 权利要求54-58中任一项的方法，其中所述抗体选自扎木单 抗、凯利昔单抗、克立昔单抗、TNX/355、 TRX/1、 K)T4a、普立昔单 抗和4162W94。60. 权利要求59的方法，其中所述抗体为扎木单抗。61. 权利要求36-60中任一项的方法，其中所述辐射治疗选自补 骨脂素与长波紫外线辐射(PUVA)、 UVB、窄谱UVB、高剂量UVA、 电子束和x射线。62. 权利要求61的方法，其中所述辐射治疗为补骨脂素与长波紫 外线辐射(PUVA),其中补骨脂素化合物在UVA治疗之前施用。63. 权利要求62的方法，其中所述补骨脂素化合物具有以下通式<formula>formula see original document page 7</formula>或<formula>formula see original document page 7</formula>其中R、R2、 R3、 R4、 RV和Rs独立地选自氢、卤素、C(!-K))-烷 基和用由素、胺或羟基取代的C(wo)-烷基，以及任选地用羟基取代的 C(w。)醚；或者R和R5 —起形成吡啶并。64.权利要求36-63中任一项的方法，其中所述补骨脂素化合物 选自吡啶并-[3,4-c]补骨脂素、7-甲基吡啶并-[3,4-c]补骨脂素、5-甲氧 基补骨脂素、8-曱氧基补骨脂素、4，5',8-三甲基补骨脂素、4-甲基补骨 脂素、4,4-二曱基补骨脂素、4-5'-二曱基补骨脂素、4',8-甲氧基补骨脂 素、4'-(co-M-2-氧杂)烷基-4,5',8-三曱基补骨脂素、4'-(4-#^-2-氧杂)-丁基-4，5'，8-三曱基补骨脂素、4'-氯甲基-4,5',8-三甲基补骨脂素、4'-氨 基-甲基_4,5',8-三曱基补骨脂素、4'-(2-羟基乙氧基)-曱基-4,5'，8-三曱基-补骨脂素、4'-(6-羟基己氧基)-曱基-4,5',8-三甲基补骨脂素、4'-羟曱基 -4，5',8-三甲基补骨脂素、5-甲基-白芷素和2H-呋喃并[2,3-h][l]苯并吡 喃-2誦酮。65. 权利要求64的方法，其中所述补骨脂素化合物为5-甲氧基 补骨脂素或8-甲氧基补骨脂素。66. 权利要求62-65中任一项的方法，其中所述补骨脂素化合物 在辐射治疗前的5-0.5小时的时间段内给予。67. 权利要求66的方法，其中所述补骨脂素化合物在辐射治疗前 的2-1小时的时间段内给予。68. 权利要求36-67中任一项的方法，其中所述CD4结合肽通过 静脉内、皮下或肌内注射给予。69. 权利要求36-68中任一项的方法，其中所述CD4结合肽在辐 射治疗前给予至少一次。70. 权利要求36-69中任一项的方法，其中所述CD4结合肽每周...

【专利技术属性】
技术研发人员：P帕伦，O巴德斯加德，D亚历山大，
申请(专利权)人：根马布股份公司，
类型：发明
国别省市：DK[丹麦]