用于生物传感的基于萤光素－荧光素酶的微装置制造方法及图纸

提供了用于测定样品中的一种或多种微生物的浓度的方法和装置。该方法包括将样品过滤通过在样品管内部的过滤器以将该一种或多种微生物保留在该过滤器上。所得到的包含或生成三磷酸腺苷的滤出液通过该样品管并进入该报道分子区域。在该报道分子区域中，该滤出液中的该三磷酸腺苷与包括萤光素－荧光素酶络合物的透明多孔基质接触。该三磷酸腺苷与该萤光素－荧光素酶络合物相互作用以提供用检测器测定的光响应。将该光响应与校准曲线相比较以测定样品中一种或多种微生物的总浓度。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于生物传感的基于萤光素-荧光素酶的微装置
技术介绍
生物发光是天然发生的现象，其已经用于多种应用，特别是在分子生物学中，在分 子生物学中与其相关的酶已经用作遗传报道分子。生物发光对于用作遗传标记几乎是理想 的。典型地，在哺乳动物细胞中没有内生性发光活性，而实验引入的生物发光几乎是瞬间 的、灵敏的且可定量的。尽管多种物种都显示出生物发光，但仅有相对很少的已经表征和克 隆。其中，仅萤火虫(Photinus pyralis)荧光素酶、海肾(Renilla)荧光素酶和水母发光 蛋白已经有了很多实用。在产生生物发光的萤火虫荧光素酶的机制中对分子组分的研究 显示该酶的基质是萤火虫荧光素，也即多杂环有机酸，D-(-)-2-(6’ -羟基-2’ -苯并噻唑 基)-δ 2-噻唑啉-4-羧酸(下文称作“荧光素”)。萤火虫荧光素酶是单体61 kD酶，其对两步工艺中的荧光素的氧化起催化作用，其 在560nm发光。第一步包括通过用三磷酸腺苷(ATP)的α -磷酸盐在镁的存在下的酰化使 荧光素的羧酸酯基团活化以生成luciferyl adenylate并除去无机焦磷酸盐。在第二步中， 用分子氧氧化该lucifery本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于测定样品中一种或多种微生物的浓度的方法，包括以下步骤：　　（ａ）将包含一种或多种微生物的第一样品过滤通过样品管内的过滤器以将该一种或多种微生物保留在该过滤器上并提供第一滤出液；　　（ｂ）将该第一滤出液过滤通过该样品管内的报道分子区域，其中该报道分子区域包括包含荧光素－荧光素酶络合物的透明多孔基质；　　（ｃ）检测来自该报道分子区域的第一光响应，其中该光响应是由该滤出液与该荧光素－荧光素酶络合物的相互作用提供的；　　（ｄ）将该第一光响应与校准曲线比较以测定该样品中的该一种或多种微生物的浓度；　　（ｅ）任选地将包含一种或多种微生物和试剂的第二样品过滤通过该样品管内的该过滤器以将该一种或多种微生物...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：T潘，Z孙，W王，X刘，
申请(专利权)人：霍尼韦尔国际公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]