新的硫酸化寡糖衍生物制造技术

本发明专利技术涉及具有作为硫酸乙酰肝素－结合蛋白的抑制剂作用的新的化合物；包含所述化合物的组合物，和所述化合物及其组合物在用于治疗哺乳动物受试者抗血管生成、防转移、抗炎、抗微生物、抗凝和／或抗血栓形成中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本文所述的 专利技术涉及具有作为硫酸乙酰肝素-结合蛋白包括类肝素酶的抑制剂 活性的化合物。尤其，本专利技术涉及硫酸化寡糖衍生物，虽然本专利技术的范围并不一定局限于 此，但特别地，本专利技术涉及用特定的、高亲脂性基团修饰的多硫酸化寡糖。本专利技术还涉及制 备所述化合物、包含所述化合物的组合物的方法、以及所述化合物及其组合物在用于哺乳 动物受试者抗血管生成、防转移、抗炎、抗微生物、抗凝和/或抗血栓形成治疗中的用途。当 将其施用于哺乳动物受试者时，该化合物还具有预防上述病症的作用。
技术介绍
被称作PI-881’2的硫酸化寡糖剂是一种有前途的肿瘤生长和转移抑制剂3’4a并已 在癌症患者中进了临床试验5’6。PI-88是大小在二糖至六糖范围的高度硫酸化、单磷酸化 的甘露糖寡糖混合物7’8。PI-88通过抑制血管生长因子(主要是FGF-I、FGF-2和VEGF)及 其受体与硫酸乙酰肝素的相互作用9a来发挥抗血管生成作用。此外，PI-88是一种有效的 类肝素酶抑制剂，类肝素酶是一种裂解蛋白聚糖的硫酸乙酰肝素侧链的糖苷酶，该蛋白聚 糖是肿瘤细胞周围细胞外基质(ECM)和基底膜的主要成分工’2。类肝素酶与血管生成密切相 关它能从ECM中释放活性的与硫酸乙酰肝素_结合的血管生长因子并且它还参与ECM的 降解和随后的与新血管的生长有关的组织重塑1(1。通过类肝素酶进行的ECM降解在肿瘤细 胞的扩散(转移)中也是至关重要的lia°，允许肿瘤细胞进入血流并停留在远处(在此处其 可形成继发性肿瘤)。除了其抗血管生成作用外，PI-88可通过(i)抑制内源性途径中的蛋白酶，(ii)刺 激组织因子途径抑制物(TFPI)释放，和(iii)激活肝素辅因子II介导的凝血酶抑制来抑 制凝血级联系统。但PI-88不与ATIII相互作用，并因此没有表现出抗-Xa或AT III介导 的抗-IIa活性12’13。在猴子的体内研究表明低剂量的PI-88会刺激所有硫酸乙酰肝素_结 合TFPI从血管细胞壁释放12。除了其对凝血的作用外，TFPI还是一种抗血管生成剂14和 转移抑制剂15。PI-88还显示出阻滞血管平滑肌细胞增殖和内膜增厚16，抑制细胞的单纯疱 疹病毒(HSV)感染和HSV-I及HSV-2的细胞间播散17，抑制登革热和脑炎虫媒病毒小鼠模 型中的传染性和提高存活率，18抑制被动海曼肾炎中的蛋白尿19和在体外对抗恶性疟原虫 (Plasmodium falciparum)的抗疟疾活性 2°。各种其他的多硫酸化寡-和多糖及其衍生物显示出与PI-88类似的生物活性类型 已为人们所熟知21_26。这些生物活性归结于各种硫酸乙酰肝素(HS)-结合蛋白的抑制。近 来，公开了某些具有改善的药物代谢动力学和/或ADME(吸收、分布、代谢、排泄)特征的 硫酸化寡糖衍生物27’28。所述化合物包含一个单一的碳骨架，并因此具备了优于混合物如 PI-88的合成和表征优势。本专利技术的目的是产生具有更强效力、改善的药物代谢动力学性质和减少了副作用 的HS-类似物。
技术实现思路
根据本专利技术的第一个实施方案，本专利技术提供了一种以下通式的化合物[XJn-Y-ZR1R2I其中X和Y各为一个单糖单元，其中不参与形成糖苷键的各个羟基独立地被SO3M或H 所取代，其中M是任何可药用的阳离子；X和Y是任何D-或L-己糖或戊糖；Y是环状或开环的形式；当Y是还原单糖时，Z是0、N、S或C或其更高的氧化态，或是一个键，与端基碳相 连；R1是选自包括烷基、烯基、炔基、芳基、杂烷基、杂芳基、酰基、芳酰基、烷基酰胺基、 烷基硫酰胺基(alkylthioamido)、三唑基的组的联结子(linker)，或是一个键；R2是选自包括胆留醇基、胆留烷基、胆酸盐、脱氧胆酸盐、直链烷基、支链烷基、取 代烷基、直链酰基，支链酰基、取代酰基的组的亲脂部分；η是0-6的整数；各个化合物的硫酸化程度为总羟基的70至100%，其中当R1是一个键时，则R2不为甘草次酸或其衍生物；当R1是一个键，和η = 0或1，和Z是S时，则R2不为C8或C18直链烷基；当η是3-6，和R1是一个键，及X和Y是α (1 — 4)-连接的葡萄糖时，则R2不为 C12至C18直链烷基；当η是3-5，和R1是一个键，及X和Y是β (1 — 3)-连接的葡萄糖时，则R2不为 C4至C12直链烷基或胆留醇基；和当X和Y是核糖，和R1是一个键时，则R2不为C18基团。根据本专利技术的第二个实施方案，其提供了一种用于预防或治疗哺乳动物患者的由 血管生成、转移、发炎、凝血/血栓形成、血液甘油三酯浓度升高、微生物感染和/或心血管 疾病引起的病症的药物或兽药组合物，该组合物包含至少一种如第一个实施方案所述的化 合物和用于至少一种所述化合物的可药用或兽用的载体或稀释剂。本专利技术的第三个实施方案包含式II化合物在用于生产预防或治疗患有由血管生 成、转移、发炎、凝血/血栓形成、血液甘油三酯浓度升高、微生物感染和/或心血管疾病引 起的病症的哺乳动物患者的药物中的用途[XJn-Y-ZR1R2 II其中X和Y各为一个单糖单元，其中不参与形成糖苷键的各个羟基独立地被SO3M或H 所取代，其中M是任何可药用的阳离子；X和Y是任何D-或L-己糖或戊糖；Y是环状或开环的形式；当Y是还原单糖时，Z是0、N、S或C或其更高的氧化态，或是一个键，和与端基碳 相连；R1是选自包括烷基、烯基、炔基、芳基、杂烷基、杂芳基、酰基、芳酰基、烷基酰胺基、烷基硫酰胺基、三唑基的组的联结子(linker)，或是一个键；R2是选自包括胆留醇基、胆留烷基、胆酸盐、脱氧胆酸盐、直链烷基、支链烷基、取 代烷基、直链酰基，支链酰基、取代酰基的组的亲脂部分；n是0-6的整数；和各个化合物的硫酸化程度为总羟基的70至100%。根据本专利技术的第四个实施方案，本专利技术提供了一种预防或治疗哺乳动物患者的由 血管生成、转移、发炎、凝血/血栓形成、血液甘油三酯浓度升高、微生物感染和/或心血管 疾病引起的病症的方法，该方法包含给予受试者有效量的至少一种式II的化合物，或包含 至少一种所述化合物的组合物。为了使本专利技术可以被更容易地理解和实施，现将仅以实施例的方式参照附图，对 其一个或多个优选的实施方案进行描述。附图的简要说明附图说明图1所示为在用于证明化合物的抗血管生成活性的大鼠主动脉血管生成试验中， 血管生成萌芽(angiogenic sprouting)的范围的实例。图2所示为从第0天开始每48天用培养基(用于未经处理的对照组)或试验化 合物处理7天的主动脉培养物的数据。在第7天，在随后的7天中每2-3天向培养物中加 入VEGF(10mg/mL)，然后对血管生成范围进行评分，从而证明该化合物是通过抗血管生成机 制而不是诱导对组织的毒性作用来发挥其抑制作用的。所有这三个化合物都有效抑制了血 管生成(参见表4)。图3所示为在B16小鼠黑色素瘤模型中，未经处理的对照组小鼠和用所选的试验 化合物处理的小鼠的肿瘤体积的中值。就本专利技术的化合物而言尽管减少了剂量水平，或限 定了暴露时间，但抗肿瘤活性与PI-88或非亲脂性类似物相比仍有所增加。Bid = —日二次 (每天两次)，sid= —日一次(每日一次)，qd=每天(每天)。图4所示为在B16小鼠黑色素本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种通式化合物：［Ｘ］↓［ｎ］－Ｙ－ＺＲ↑［１］Ｒ↑［２］Ⅰ其中：Ｘ和Ｙ各自是单糖单元，其中不参与形成糖苷键的各个羟基独立地被ＳＯ↓［３］Ｍ或Ｈ所取代，其中Ｍ是任何可药用的阳离子；Ｘ和Ｙ是任何Ｄ－或Ｌ－己糖或戊糖；Ｙ是环状或开环形式；当Ｙ是还原单糖时，Ｚ是Ｏ、Ｎ、Ｓ或Ｃ或其更高的氧化态，或是一个键，和与端基碳相连；Ｒ↑［１］是选自包括烷基、烯基、炔基、芳基、杂烷基、杂芳基、酰基、芳酰基、烷基酰胺基、烷基硫酰胺基、三唑基的组的联结子，或是一个键；Ｒ↑［２］是选自包括胆甾醇基、胆甾烷基、胆酸、脱氧胆酸、直链烷基、支链烷基、取代烷基、直链酰基、支链酰基、取代酰基的组的一个亲脂部分；ｎ是０－６的整数；每个化合物的硫酸化程度为总羟基的７０至１００％，其中当Ｒ↑［１］是一个键时，则Ｒ↑［２］不为甘草次酸或其衍生物；当Ｒ↑［１］是一个键，和ｎ＝０或１，和Ｚ是Ｓ时，则Ｒ↑［２］不为Ｃ８或Ｃ１８直链烷基；当ｎ是３－６，和Ｒ↑［１］是一个键，及Ｘ和Ｙ是α（１→４）连接的葡萄糖时，则Ｒ↑［２］不为Ｃ１２至Ｃ１８直链烷基；当ｎ是３－５，和Ｒ↑［１］是一个键，及Ｘ和Ｙ是β（１→３）－连接的葡萄糖时，则Ｒ↑［２］不为Ｃ４至Ｃ１２直链烷基或胆甾醇基；和当Ｘ和Ｙ是核糖，和Ｒ↑［１］是一个键时，则Ｒ↑［２］不为Ｃ１８基团。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】AU 2007-10-16 2007905680一种通式化合物[X]n-Y-ZR1R2 I其中X和Y各自是单糖单元，其中不参与形成糖苷键的各个羟基独立地被SO3M或H所取代，其中M是任何可药用的阳离子；X和Y是任何D-或L-己糖或戊糖；Y是环状或开环形式；当Y是还原单糖时，Z是O、N、S或C或其更高的氧化态，或是一个键，和与端基碳相连；R1是选自包括烷基、烯基、炔基、芳基、杂烷基、杂芳基、酰基、芳酰基、烷基酰胺基、烷基硫酰胺基、三唑基的组的联结子，或是一个键；R2是选自包括胆甾醇基、胆甾烷基、胆酸、脱氧胆酸、直链烷基、支链烷基、取代烷基、直链酰基、支链酰基、取代酰基的组的一个亲脂部分；n是0-6的整数；每个化合物的硫酸化程度为总羟基的70至100％，其中当R1是一个键时，则R2不为甘草次酸或其衍生物；当R1是一个键，和n＝0或1，和Z是S时，则R2不为C8或C18直链烷基；当n是3-6，和R1是一个键，及X和Y是α(1→4)连接的葡萄糖时，则R2不为C12至C18直链烷基；当n是3-5，和R1是一个键，及X和Y是β(1→3)-连接的葡萄糖时，则R2不为C4至C12直链烷基或胆甾醇基；和当X和Y是核糖，和R1是一个键时，则R2不为C18基团。2.如权利要求1所述的化合物，其中R2是胆留烷基。3.如权利要求1所述的化合物，其中R2是丙基硬脂酰胺。4.如权利要求1-3中任意一项所述的化合物，其中R1是氧甲基[1，2，3]_三唑-1-基联结子。5.一种选自由30-胆甾烷基2，3，4，6_四-0-磺酸钠-a-D-吡喃葡萄糖 基-(1 — 4)-2，3，6_三-0-磺酸钠-a-D-吡喃葡萄糖基-(1 — 4)_2，3，6_三_0_磺酸 钠- a -D-吡喃葡萄糖基-(1 — 4)-2，3，6-三_0_磺酸钠-D-吡喃葡萄糖苷(化合物 65) ；4-(胆甾烷-3-基-氧甲基)[1，2，3]三唑-1-基2，3，4，6_四_0_磺酸钠-a-D-口比 喃葡萄糖基_ (1 — 4) -2，3，6-三-0-磺酸钠-a _D_吡喃葡萄糖基-(1 — 4) 脱氧_2，3， 6-三-0-磺酸钠-3 -D-吡喃葡萄糖苷(化合物70) ;4_ (胆甾烷-3 0 -基-氧甲基)[1，2， 3]三唑-1-基2，3，4，6-四-0-磺酸钠-a _D_吡喃葡萄糖基-(1 — 4) _2，3，6-三-0-磺 酸钠-a -D-吡喃葡萄糖基_ (1 — 4) -1-脱氧-2，3，6-三_0_磺酸钠-3 _D_吡喃葡萄糖苷 (化合物76) ;3 0 -胆甾烷基2，3，4，6-四-0-磺酸钠-a -D-吡喃葡萄糖基-(1 — 4) -2，3， 6-三-0-磺酸钠-a -D-吡喃葡萄糖基-(1 — 4) -2，3，6-三-0-磺酸钠-3 _D_吡喃葡萄糖 苷(化合物87) ；3-硬酯酰胺丙基2，3，4，6-四-0-磺基-a -D-吡喃葡萄糖基-(1 — 4) -2， 3，6-三-0-磺基-a-D-吡喃葡萄糖基-(1 — 4)-2，3，6-三-0-磺基-0-0_吡喃葡萄 糖苷，十钠盐(化合物123)；和3-硬酯酰胺丙基2，3，4，6_四_0_磺基-a-D-卩比喃葡 萄糖基-(1 — 4)-2，3，6-三-0-磺基-a-D-吡喃葡萄糖基-(1 — 4) _2，3，6_三_0_磺基-a -D-吡喃葡萄糖基-(1 — 4) -2，3，6-三_0_磺基-0 _D_吡喃葡萄糖苷，十三钠盐(化 合物128)组成的组中的化合物。6.一种用于预防或治疗哺乳动物受试者的由血管生成、转移、发炎、凝血/血栓形成、 血液甘油三酯浓度升高、微生物感染和/或心血管疾病引起的病症的药物或兽药组合物， 所述组合物包含至少一种如权利要求1或权利要求5所述的化合物和一种用于至少一种所 述化合物的可药用或兽用的载体或稀释剂。7.如式II所示的化合物在用于生...

【专利技术属性】
技术研发人员：V费尔罗，T卡洛丽，刘立功，PN汉德雷，KD约翰斯通，N韦默，ET哈蒙德，
申请(专利权)人：普罗吉恩制药有限公司，
类型：发明
国别省市：AU[澳大利亚]