本发明专利技术公开了分离的抗体，其选择性地结合Ａｂｅｔａ的Ｃ－末端部分，并且是人源化的或完全人类的。本发明专利技术的抗体能够防止Ａｂｅｔａ的寡聚化。此外，公开了诊断的方法，其包括步骤：（ｉ）标记抗体；（ｉｉ）向受试者鼻内地或全身地施用有效剂量的所述抗体；和（ｉｉｉ）检测所述受试者的身体部分中所述标记的抗体的浓度和／或存在。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及抗体技术的领域，更具体地涉及针对β -淀粉样肽的人源化抗体的领 域。
技术介绍
阿尔茨海默氏病(AD)是年龄相关的神经变性失调，在2006年其影响了 2660万 人。一些预测预计，到2050年，发病率将是四倍，到时，在世界范围内每85人中有1人将患 有该疾病(Brookmeyer et al. (2007))。AD自身显现为渐进性的认知缺陷，例如记忆丧失 和认知能力的降低。AD的病理的中心是脑部β -淀粉样肽(Abeta)的积累。Abeta是淀粉样前体蛋白 质(APP)的裂解产物，其在淀粉样变性途径中首先被分泌酶、然后被Y分泌酶相继裂 解。产生的Abeta片段具有可变的大小，而40个氨基酸的肽(Abeta4ci)是最丰富的种类，42 个氨基酸的肽(所谓的Abeta42)被认为是最有害的种类。Abeta可以在脑的细胞外隙中积 累，在此它在多步骤的过程中聚集，形成神经毒性寡聚体，最后与其他物质一起产生淀粉样 斑块，其是阿尔茨海默氏病的典型标志。治疗阿尔茨海默氏病的有前景的临床免疫学方法是被动免疫，在其中，针对Abeta 的抗体被施用给受试者来从脑从除去Abeta。已经提出了通过抗Abeta抗体的三种不同 但不互相排斥的Abeta清除机制(1)纤维状Abeta向较低毒性形式的催化转化(Bard et al. (2000) ；Bacskai et al. (2001) ；Frenkelet al. (2000)) ； (2) Abeta 沉积的调理作 用，引起小胶质细胞吞噬作用(Bardet al. (2000) ；Bacskai et al. (2002) ；Frenkel et al. (2000)；和(3)促进Abeta从脑向循环的流出(DeMattos et al. (2001))，所谓的外周 沉没假说。苏黎士大学的Mohajera等人(2004)和Gaugler等人(2005)产生了针对Abeta 的小鼠抗体，并研究了单克隆鼠抗Abeta抗体在体内的生物活性。然而，当施用给人类时，鼠抗体常常产生免疫原性。引发的抗球蛋白反应限制了鼠 抗体的临床实用性(Miller et al. (1983) ；Schroff et al. (1985))。因此，需要新的、非免疫原性的和有效的抗体，用于Abeta相关疾病、特别是阿尔 茨海默氏病的治疗和/或诊断
技术实现思路
因此，本专利技术的一般目的是提供特异性结合Abeta (特别是Abeta的C-末端部分) 的且被人类免疫系统良好地耐受的抗体。在第一个方面，本专利技术提供了分离的抗体，其选择性地在C-末端区域与Abeta结 合，特别是氨基酸30到40 (SEQ ID NO :26)之间，并且是人源化的或完全人类的。所述抗 体展示了对Abeta42和Abeta4ci的高亲和力，此外，在体内基本上不识别淀粉样前体蛋白质 (APP)。所谓的人源化抗体的优点在于它们引发人类免疫系统的一般是最小的反应、或没有反应的能力，因而可以被认为是在人类施用时是低免疫原性的或非免疫原性的。因而，与 鼠抗体相反，人源化的抗体适合于治疗目的和临床应用。术语“人源化”是指降低异种抗体的免疫原性的公认的技术。人源化抗体被遗传工 程化，从而存在尽可能少的非人类结构。一种策略是基于异种抗体的互补决定区(CDR)移 植到人类接受体框架的可变轻链VL和可变重链VH上。在另一种策略中，异种抗体的框架向 人类框架突变。在两种情况中，抗原结合部分的功能的保存是关键的。为了这个目的，例如， 通过使用技术人员公知的分子建模的计算机程序，分析亲本序列和各种概念上的人源化产 物的三维模型。所述分析，除其它之外例如允许鉴定可能直接或间接涉及抗原结合的框架 残基。通常，少量的供体框架残基对于抗原结合是重要的，因为它们进入与抗原的直接接 触，或者它们影响特定CDR的构象(Davies et al (1990) ；Chothia et al (1987))。因此，如 果尚不存在，希望的是朝着被鉴定为对于抗原结合重要的那些供体框架残基来突变相应的 接受体框架残基。还可能的是，人源化抗体包含既不在体内的人类种系全集(repertoire) 中、也不在供体CDR或甚至供体框架中存在的残基。抗体的人源化的程度可以通过计算人源化抗体的框架与原始人类接受体框架的 序列同一性百分比来表明，所述原始的人类接受体框架被用于产生人源化抗体并且是可从 人类文库获得的。优选的，本专利技术的抗体包含与可从人类文库获得的框架具有至少60%的 同一性、(按以下顺序)更优选至少75 %、至少80 %、至少85 %、至少90 %和最优选95 %或 甚至100%同一性的框架。在本专利技术的上下文中，术语“互补决定区”或“⑶R”是指构成由 Kabat et al. (1991)所定义的抗原结合环体的、抗体的互补决定区。本专利技术的⑶R和框架 残基根据Kabat (Kabat et al. (1987))的定义来确定。在此使用的术语“抗体”是指全长抗体，例如单克隆抗体，以及具有对选定抗原足 够的结合能力的其任何抗原结合片段或单链。本专利技术涵盖的抗原结合片段的实例包括Fab 片段、F(ab' ) 2片段、Fd片段、Fv片段；单结构域或dAb片段、分离的互补决定区(CDR)； 可任任选地通过合成的接头连接的两个或更多个分离的CDR的组合以及单链可变片段 (scFv)。“全长抗体”包括嵌合抗体，其中一个来源的抗原结合可变域联结到不同的来源的 恒定域，例如，鼠抗体的可变域Fv结合到人类抗体的恒定域Fe。以上例举的抗体片段使用本领域普通技术人员已知的常规技术获得，与完整抗体 一样来筛选所述片段的有用性。在本专利技术中，CDR来自单克隆的小鼠抗体22C4(Moha jeri et al. (2002), J. Biol. Chem. 277, pp. 33012-33017 and Neurodegenerative Dis. 1(2004), pp. 160-167)。所述鼠抗 体针对Abeta的C-末端部分，更具体地针对氨基酸30到40之内的表位(SEQ ID NO 26)。在优选的实施方式中，所述抗体通过与它的目标结合来阻止Abeta、特别是 Abeta40和/或Abeta42的寡聚化。本专利技术提供了包含一个或更多个互补决定区(OTR)序列的抗体，所述互补决定区 序列具有与由 SEQ ID NO :1、SEQ ID NO :2、SEQ ID NO :3、SEQ ID NO :4、SEQ ID NO 5 和 SEQ ID NO :6构成的组的序列的至少80%的同一性。如已经提及的，本专利技术的CDR，即，SEQID NO =USEQ ID NO :2、SEQ IDNO :3、SEQ ID N0:4、SEQ ID NO :5和SEQ ID NO :6，可以移植到适合的接受体框架中。术语“框架”是指存在于更为趋异的CDR区域之间的、抗体可变区的本领域公认的部分。这样的框架区域一般被称为框架1到4(FR1、FR2、FR3和FR4)，提供了将重链和轻链抗体可变区内存在的三个 CDR保持在三维空间中的支架，从而所述CDR可以形成抗原结合表面。适合的接受体框架优 选的是免疫球蛋白衍生的抗原本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种分离的抗体，其选择性地结合Ａｂｅｔａ的Ｃ－末端部分，并且是人源化的或完全人类的。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：S埃韦尔特，A奥弗德毛尔，S凯特波伊尔，R尼奇，
申请(专利权)人：德勒尼克斯治疗股份公司，苏黎世大学，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。