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一种检测淀粉样多肽聚集及其聚集抑制剂评估的方法技术

技术编号:11645051 阅读:154 留言:0更新日期:2015-06-25 04:17
本发明专利技术涉及淀粉样多肽,特指一种检测淀粉样多肽聚集及其聚集抑制剂评估的方法。该方法利用石英晶体微天平(QCM)能检测质量微小变化的优势,将淀粉样蛋白(多肽)及其淀粉样蛋白(多肽)与聚集抑制剂分子混合溶液在石英晶体微天平的芯片表面上孵育,经过一定时间后,淀粉样蛋白(多肽)将在芯片表面集聚,引发石英晶体微天平信号,由石英晶体微天平产生信号强弱可判断多肽聚集抑制剂分子的抑制作用,另外结合原子力显微镜(AFM)表征可以对QCM结果进行确认,综合两种测量方法综合评估淀粉样多肽抑制剂效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及淀粉样多肽,特指一种检测淀粉样多肽聚集及其聚集抑制剂评估的方 法。
技术介绍
目前已知蛋白质及多肽的异常集聚和40多种疾病相关,如神经退行性疾病阿尔 茨海默氏病和帕金森综合症等;淀粉样蛋白质(多肽)的寡聚体及其集聚所形成的斑块被认 为是这些疾病的主要病因之一;基础医学以淀粉样蛋白为靶点开始进行研宄,发展药物减 少淀粉样多肽的产生和降低淀粉样多肽的集聚及毒性;目前在科研和医药产业中,针对疾 病的相关靶多肽和蛋白的特效药物开发是十分重要的研宄领域,具有极其重要的研宄价值 和经济价值。 医药学关于药物研发的严肃性要求新发现的抑制剂在进入临床使用前需要进行 严格的使用效果及安全性的评价,主要是基于生物细胞毒理性实验和动物模型实验,这些 评价流程非常严格和繁琐复杂;阿尔茨海默氏病的药物研宄通常需要培养大批量细胞供实 验使用并建立特殊的动物模型,例如人神经细胞瘤细胞系SK-N-SH和通过分子生物学方 式诱导产生淀粉样多肽在动物脑内来构建阿尔茨海默氏病的动物模型,而实验结果读取需 要使用酶联免疫吸附测定法和蛋白质印迹法获得,虽然实验结果相对可靠,但实验周期很 长而且成本本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测淀粉样多肽聚集及其聚集抑制剂评估的方法,其特征在于具体步骤如下:将淀粉样多肽充分溶解分散在六氟异丙醇中得到溶液A,对溶液A进行干燥,干燥后的淀粉样多肽使用去离子水进行溶解,配置成浓度为250‑1000 μg/mL的淀粉样多肽水溶液,称为溶液B;得到QCM共振频率基线后,取上述溶液B溶液通入石英晶体微天平传感器中,随着多肽分子在芯片表面的吸附集聚,QCM频率信号和能量耗散将发生改变,检测到的信号作为抑制剂组的阳性对照B;将浓度为10‑200μg/mL的聚集抑制剂的水溶液称为溶液C,在得到QCM共振频率基线后,将溶液C通入QCM传感器得到的QCM 频率和能量耗散信号作为聚集抑制剂评价的阴性...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:汪杰刘磊董明东
申请(专利权)人:江苏大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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