一种筛选α–淀粉酶抑制剂的方法技术

本发明专利技术公开了一种筛选α-淀粉酶抑制剂的方法，所述方法包括：配制酶促反应缓冲液、底物溶液、α-淀粉酶溶液、显色剂溶液和供试品溶液，备用；将供试品溶液点样于薄层板上，挥去溶剂后或使用适宜的展开剂展开晾干后浸渍于底物溶液中，然后取出、挥干溶剂，再浸渍于α-淀粉酶溶液中，在5～50℃进行酶促反应10～60分钟；反应完成后，取出薄层板、挥干溶剂后浸渍于显色剂溶液中进行显色反应；在可见光下进行检视：出现的白色或黄色或棕色背景下的蓝色斑点即为α-淀粉酶抑制剂。本发明专利技术提供了一种可方便、快捷地筛选α-淀粉酶抑制剂的方法，为从天然物质中筛选出具有α-淀粉酶抑制活性成分的研究提供了一条理想途径。

【技术实现步骤摘要】
一种筛选α–淀粉酶抑制剂的方法
本专利技术是涉及一种筛选α–淀粉酶抑制剂的方法，具体说，是涉及一种利用薄层色谱-生物自显影技术筛选α–淀粉酶抑制剂的方法。
技术介绍
糖尿病是一种因体内胰岛素绝对或相对分泌不足所致的内分泌代谢疾病，具有高致死率、高致残率和高医疗费的特征，是继肿瘤、心脑血管病变之后第三大严重威胁人类健康的慢性非传染性疾病。目前临床降糖药有磺脲类、双胍类、胰岛素增敏药、非磺脲类胰岛素促泌药、葡萄糖苷酶抑制剂等，其中，α–葡萄糖苷酶抑制剂是通过竞争性抑制小肠上皮绒毛膜上的糖苷酶的作用来减少糖类的降解，延缓糖类的消化和吸收，从而有效地降低糖尿病人餐后血糖浓度。胰α–淀粉酶是消化系统中的另一个关键酶，属于α–糖苷酶范畴。胰α–淀粉酶是淀粉的第一步水解酶，将淀粉水解成小分子寡糖，包括麦芽糖、麦芽三糖和许多α–(l–6)和α–(l–4)寡糖。这些寡糖在α–葡萄糖苷酶的作用下进一步降解为葡萄糖，吸收入血液循环。因此，胰α–淀粉酶能导致对膳食淀粉的快速降解，从而升高餐后血糖(PPHG)。20世纪70年代，人们开始意识到一些抑制剂能够抑制或部分抑制小肠二糖酶和胰α–淀粉酶的活性，这些抑制本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种筛选α–淀粉酶抑制剂的方法，其特征在于，包括如下步骤：a)配制酶促反应缓冲液、底物溶液、α‑淀粉酶溶液、显色剂溶液和供试品溶液，备用；所述的酶促反应缓冲液选用pH值为6.5～9.0的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液；所述的底物溶液选用pH值为6.0～7.0、含0.05wt％～1wt％可溶性淀粉的磷酸盐缓冲溶液；所述的α‑淀粉酶溶液选用含α‑淀粉酶的活性浓度≥6U/mL的酶促反应缓冲液；所述的显色剂溶液选用碘含量为0.1～20mg/mL的碘‑碘化钾水溶液；b)将供试品溶液点样于薄层板上，挥去溶剂后备用或使用适宜的展开剂展开后取出、晾干备用；c)将经步骤b)处理后的薄层板浸渍于底物溶液中，然后取出...

【技术特征摘要】
1.一种筛选α–淀粉酶抑制剂的方法，其特征在于，包括如下步骤：a)配制酶促反应缓冲液、底物溶液、α-淀粉酶溶液、显色剂溶液和供试品溶液，备用；所述的酶促反应缓冲液选用pH值为6.5～9.0的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液，是由三羟甲基氨基甲烷与盐酸及氯化钙形成，其中的三羟甲基氨基甲烷的摩尔浓度为25～80mmol/L；所述的底物溶液选用pH值为6.0～7.0、含0.05wt％～1wt％可溶性淀粉的磷酸盐缓冲溶液；所述的α-淀粉酶溶液选用含α-淀粉酶的活性浓度≥6U/mL的酶促反应缓冲液；所述的显色剂溶液选用碘含量为0.1～20mg/mL的碘-碘化钾水溶液；b)将供试品溶液点样于薄层板上，挥去溶剂后备用或使用适宜的展开剂展开后取出、晾干备用；c)将经步骤b)处理后的薄层板浸渍于底物溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：谷丽华，江悦，侴桂新，王峥涛，
申请(专利权)人：上海中医药大学，
类型：发明
国别省市：上海;31