文蛤铁蛋白基因及编码蛋白和其体外重组表达产物的应用制造技术

本发明专利技术涉及分子生物学中文蛤铁蛋白基因克隆及体外重组表达技术。本发明专利技术利用表达序列标签（ＥＳＴ）技术、３’和５’末端快速扩增技术（ＲＡＣＥ）从文蛤幼虫中克隆到铁蛋白基因ｃＤＮＡ全长７９８ｂｐ，包括５１３ｂｐ的开放阅读框，编码１７１个氨基酸，５’非编码区长１１９ｂｐ，３’非编码区长１５４ｂｐ，有一个加尾信号，该基因在文蛤幼虫发育中贝壳形成方面发挥着重要作用。本发明专利技术利用体外原核重组表达技术获得了重组的文蛤铁蛋白，该蛋白具有氧化活性，可以参与调控文蛤等贝类幼虫贝壳的形成和生长，可应用于贝类苗种生产中发育调节和免疫增强。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及文蛤铁蛋白基因克隆及体外重组表达技术，具体地说是从幼虫cDNA 文库中筛选获得铁蛋白基因的EST序列，设计引物，采用RACE技术克隆出文蛤铁蛋白基因 的cDNA全序列，并对该序列进行了原核重组表达，还涉及到该基因及其表达产物在文蛤苗 种繁育中幼虫生长发育调控和免疫调节中的应用。
技术介绍
铁蛋白是典型的细胞内蛋白(Tacchini et al.，1992)，铁离子通过铁吸收机制通 过细胞膜进入细胞后就储存在铁蛋白中，当机体需要铁离子时再被释放出来。铁蛋白是由 M个结构上等同的亚基组成的中空的球状大分子，中空部分最多可容纳4500个铁原子。铁 蛋白亚基分为2种类型，即H型亚基和L型亚基。H亚基和L亚基在结构上是等同的，但是 在铁的储存与吸收方面这两种亚基是功能互补的，H亚基上有一个铁氧化酶位点，L亚基缺 乏这一位点，但是有一个在内表面的附加的谷氨酰胺位点，这就可以产生一个有利于三价 铁离子在H亚基的氧化酶位点反转和矿化的微环境。铁蛋白在生物体内有两种主要作用， 其一为储存铁离子，为生物体提供必须的铁离子；另外则是解毒作用，清除二价铁带给机 体的毒性作用。归结起来，它涉及本文档来自技高网...

【技术保护点】
文蛤铁蛋白基因，其特征在于：具有序列表ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ：１中碱基序列。

【技术特征摘要】
1.文蛤铁蛋白基因，其特征在于具有序列表SEQID No 1中碱基序列。2.—种权利要求1所述文蛤铁蛋白基因编码蛋白，其特征在于具有序列表SEQ ID No ...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘保忠，王晓梅，姚学良，张继泉，相建海，
申请(专利权)人：中国科学院海洋研究所，
类型：发明
国别省市：95[中国|青岛]