益生双歧杆菌菌株制造技术

本发明专利技术涉及口服摄取之后具有免疫调节作用且可用于预防和／或治疗炎性活性例如不良胃肠道炎性活性（例如炎性肠病）的双歧杆菌菌株ＡＨ１２０６或其突变株或变异株。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】益生双歧杆菌菌株引言本专利技术涉及双歧杆菌菌株及其作为益生菌具体是作为免疫调节生物治 疗剂的用途。保护人类胃肠道免受肠道细菌定植的防御机制相当复杂并涉及到免疫学和非免疫学的领域(l)。先天防御机制包括胃的低pH，胆汁盐，蠕动，黏 蛋白层以及抗微生物化合物，例如溶菌酶(2)。免疫学机制包括分布于整个 小肠和结肠的特发性淋巴集结，基础性M细胞，又称为派伊尔淋巴集结(3)。 腔内抗原在这些位点上的提呈导致了对适当T和B细胞亚型的刺激，从而 建立了细胞因子网络并将抗体分泌至胃肠道中去(4)。此外，可通过上皮细 胞将抗原提呈至上皮内淋巴细胞以及基础粘膜固有层免疫细胞(5)。因此， 宿主相当程度地依赖于胃肠道的免疫防御。然而，由于胃肠道粘膜是宿主 与外界环境相互作用的最大表面，发生于其上的具体控制机制必需能够适 当地对平均寿命期间由胃肠道处理的上百吨食物进行免疫应答的调节。不 仅如此，消化道定植有超过500种的细菌，在结肠中的数量为10-10力g。 因此，这些控制机制必需能够从对宿主引起明显伤害的侵袭性病原体中区 别出非致病性的附着细菌。事实上，通过与新摄入的潜在致病性微生物竞 争，肠道菌群对宿主的防御大有裨益。存在于人类胃肠道中的细菌能够引起炎症。对固有微生物菌群的异常 免疫应答可涉及到某些疾病状态，例如炎性肠病。与正常菌群相关的抗原 通常会导致免疫耐受，而不能达到这样的耐受是粘膜发炎的主要机制(6)。 在患有炎性肠病(IBD)的患者中，其耐受被破坏的证据包括针对于所述肠道 菌群的抗体水平升高。本专利技术涉及双歧杆菌菌株，其可通过调制细胞因子水平或通过抗拮以 及排除来自胃肠道的促炎症微生物从而表现出具有免疫调节的作用。
技术实现思路
本专利技术提供了双歧杆菌菌株AH1206(NCIMB41382)或其突变株或变异株。所述突变体是遗传修饰的突变体。所述变异体是天然存在的双歧杆菌 变异体。所述菌株是益生菌。其是以生物学纯培养物的形式存在的。本专利技术还提供了双歧杆菌NCIMB41382的分离株。 在本专利技术的一个实施方案中，双歧杆菌菌株是以活性细胞形式存在的。或者双歧杆菌菌株是以非活性细胞形式存在的在本专利技术的一个实施方案中，所述双歧杆菌菌株是从婴儿粪便中分离的，所述双歧杆菌菌株在口服之后在人中具有明显的免疫调节性。 本专利技术还提供了包含本专利技术所述双歧杆菌菌株的制剂。 在本专利技术的一个实施方案中，所述制剂包括其他的益生性物质。 在本专利技术的一个实施方案中，所述制剂包括有益生元物质。 优选地，所述制剂包括可摄取的载体。所述可摄取的载体可以是药用的可接受载体，例如胶囊、片剂或粉末。优选地，所述可摄取的载体可以是食物制品，例如酸化乳、酸奶、冷冻酸奶、奶粉、浓縮奶、软干酪、调料或饮料。在本专利技术的一个实施方案中，本专利技术所述制机还包含有蛋白和/或肽， 特别是富含谷氨酰胺/谷氨酸的蛋白和/或肽、脂类、碳水化合物、维生素、 矿物质和/或痕量元素。在本专利技术的一个实施方案中，双歧杆菌菌株在每克递送系统中以大于 10^fo的量存在于所述制剂中。优选地，所述制剂包括一种或多种佐剂、细 菌成分、药物实体或生物学化合物。在本专利技术的一个实施方案中，所述制剂可用于免疫和接种方案。本专利技术还提供了用作食物，用作药物，用于预防和/或治疗不良炎性活 性，用于预防和/或治疗不良呼吸道炎性活性(例如哮喘)，用于预防和/或治 疗不良胃肠道炎性活性(例如炎性肠病如克罗恩氏病或溃疡性结肠炎、肠易 激综合征、慢性肠炎、或感染后结肠炎)，用于预防和/或治疗胃肠道癌症， 用于预防和/或治疗系统性疾病例如类风湿性关节炎，用于预防和/或治疗由 不良炎性活性所引起自身免疫失调，用于预防和/或治疗由不良炎性活性所 引起癌症，用于预防癌症，用于预防和/或治疗由不良炎性活性所引起腹泻 疾病(例如与艰难梭菌(Clostridium difficile)相关的腹泻、与轮状病毒相关的 腹泻或感染后腹泻)，用于预防和/或治疗由感染性因子例如大肠杆菌所引起腹泻疾病的双歧杆菌菌株或制剂。本专利技术还提供了用于制备一种抗炎生物治疗剂以预防和/或治疗不良炎 性活性，或用于制备多种抗炎生物治疗剂以预防和/或治疗不良炎性活性的 本专利技术所述双歧杆菌菌株或制剂。在本专利技术的一个实施方案中，本专利技术所述菌株可通过抗拮以及从胃肠 道中排除促炎症反应的微生物来发挥作用。本专利技术还提供了用于制备抗炎生物治疗剂从而降低促炎症细胞因子水 平的本专利技术所述双歧杆菌菌株或制剂。本专利技术还提供了用于制备抗炎生物治疗剂从而调节IL-10水平的本发 明所述双歧杆菌菌株。由于具有拮抗致病物种生长的能力，本专利技术还可以提供将双歧杆菌菌 株作为抗感染益生菌的用途。本专利技术还可以提供双歧杆菌菌株在制备用于治疗哮喘和/或过敏反应的 药物中的用途。所述药物可以是适于吸入的形式。本专利技术还可以进一步提供双歧杆菌菌株在制备用于降低IgE水平的抗 炎生物治疗剂中的用途。专利技术人还发现特定的双歧杆菌菌株能够在体外引起免疫调节的效果。本专利技术因此可以在预防或治疗失调免疫应答，例如不良炎症反应(如哮 喘和/或过敏)时具有潜在治疗价值。双歧杆菌是共生性微生物。其是从人体胃肠道内的微生物菌群中分离 得到的。由于其导致的炎性活性同样会破坏宿主细胞及组织的功能，所以 胃肠道内的免疫系统并不会对这类菌群的成员产生明显的反应。因此，存 在一些机制，凭借着所述的机制免疫系统能够识别与致病性生物体所不同 的胃肠道菌群中的共生性非致病成员。这确保了对宿主组织的损伤是被限 制的并依然保留了防御性的屏障。长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)菌株AH1206于2006年3月15日 保藏于NCIMB，其记录的保藏号码为NCIMB41382。所述长双歧杆菌可以是遗传修饰的突变株，或者可以是天然存在的变 异株。优选地，所述长双歧杆菌是活性细胞的形式。 或者，所述长双歧杆菌可以是非活性细胞的形式。应该理解，本专利技术的特定双歧杆菌菌株可以口服摄入的形式以常规的 制剂例如胶囊、微胶囊、片剂、颗粒、粉末、锭剂、丸剂、栓剂、悬液和 糖浆对动物(包括人类)进行给药。适合的制剂可通过使用常规的有机和无机 添加剂采用常规方法来制备。药物组合物中的活性成分量可根据所需要的 治疗效果来进行操作。所述制剂还可包含细菌成分，药物实体或生物学化合物。此外，还可使用任意适合的公知方法，并可包含药物可接受的载体或 佐剂来制备含有本专利技术所述菌株的疫苗。在本说明书中，术语突变体，变异体以及遗传修饰的突变体包括与亲 本菌株相比，其基因型和/或表现型性质都发生改变的双歧杆菌菌株。天然 存在的长双歧杆菌变异体包括对所分离到所选定靶向性质的自发改变。对 亲本菌株性质的故意改变是通过常规(体外)遗传操作技术，例如基因破坏，接合转移等来实现的。遗传修饰包括例如通过载体(包括质粒DNA或噬菌 体)向细菌菌株的基因组进行插入而将外源和/或内源DNA序列导入双歧 杆菌菌株的基因组。天然或诱导的突变包括至少单个碱基的改变，例如缺失、插入、转换 或其他DNA修饰，其可导致由所述DNA序列所编码氨基酸序列的改变。术语突变株，变异株以及遗传修饰的突变株还包括这样的双歧杆菌菌 株，其经历了遗传改变，所述遗传改变以对于自然界中的所有微生物一致 的速率在基因组中累积本文档来自技高网...

【技术保护点】
保藏号为ＮＣＩＭＢ４１３８２的长双歧杆菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ）菌株ＡＨ１２０６或其突变株或变异株。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-3-28 60/907,3101.保藏号为NCIMB41382的长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)菌株AH1206或其突变株或变异株。2. 权利要求1的双歧杆菌菌株，其中所述突变株是遗传修饰的突变株。3. 权利要求1的双歧杆菌菌株，其中所述变异株是天然存在的双歧杆 菌变异株。4. 权利要求1的双歧杆菌菌株，其是益生菌。5. 权利要求1或4的双歧杆菌菌株，其中所述菌株是生物学纯培养物 的形式。6. 双歧杆菌NCIMB41382的分离株。7. 活性细胞形式的权利要求1-6中任一权利要求所述的双歧杆菌菌株。8. 非活性细胞形式的权利要求1-6中任一权利要求所述的双歧杆菌菌株。9. 权利要求1-8中任一权利要求所述的双歧杆菌菌株，其中所述双歧 杆菌属是从婴儿粪便中分离的。10. 权利要求1-9中任一权利要求所述的双歧杆菌菌株，其中所述菌株 在口服之后在人中具有明显的免疫调节性。11. 包含权利要求1-10中任一权利要求所述双歧杆菌菌株的制剂。12. 权利要求11的制剂，其还含有另一种益生性物质(probioticmaterial)。13. 权利要求11或12中任一权利要求所述的制剂，其还含有益生元物 质(prebiotic material)。14. 权利要求11-13中任一权利要求所述的制剂，其还含有可摄取的载体。15. 权利要求14所述的制剂，其中所述可摄取的载体是药用的可接受 载体，例如胶囊、片剂或粉末。16. 权利要求14所述的制剂，其中所述可摄取的载体是食物制品，例 如酸化乳、酸奶、冷冻酸奶、奶粉、浓縮奶、软干酪、调料或饮料。17. 权利要求11-16中任一权利要求所述的制剂，其还含有蛋白质和/ 或肽特别是富含谷氨酰胺/谷氨酸的蛋白质和/或肽、脂质、碳水化合物、维 生素、矿物质和/或痕量元素。18. 权利要求11-17中任一权利要求所述的制剂，其中双歧杆菌菌株在 每克所述制剂中以大于106cfU的量存在。19. 权利要求11-18中任一权利要求所述的制剂，其还含有佐剂。20. 权利要求11-19中任一权利要求所述的制剂，其还含有细菌成分。21. 权利要求11-20中任一权利要求所述的制剂，其还含有药物实体。22. 权利要求11-21中任一权利要求所述的制剂，其还含有生物学化合物。23. 权利要求11-22中任一权利要求所述的制剂,其用于免疫和接种方案。24. 权利要求1-10中任一权利要求所述的双歧杆菌菌株或权利要求 11-23中任一权利要求所述的制剂，其用于食物中。25. 权利要求1-10中任一权利要求所述的双歧杆菌菌株或权利要求 11-23中任一权利要求所述的制剂，其用作药物。26. 权利要求1-7中任一权利要求所述的双歧杆菌菌株或权利要求8-20 中任一权利要求所述的制剂，其用于预防和/或治疗不良炎性活性。27. 权利要求1-10中任一权利要求所述的双歧杆菌菌株或权利要求 11-23中任一权利要求所述的制剂，其用于预防和/或治疗不良胃肠道炎性活 性，例如炎性肠病如克罗恩氏病或溃疡性结肠炎、肠易激综合征、慢性肠 炎、或感染后结肠炎。28. 权利要求1-10中任一权利要求所述的双歧杆菌菌株或权利要求 11-23中任一权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：J麦克谢里，L欧马奥尼，D欧沙利文，B基利，
申请(专利权)人：营养健康有限公司，
类型：发明
国别省市：IE[爱尔兰]