吩噻嗪衍生物色素的检测方法及用于该方法的显色剂试剂技术

技术编号:4461957 阅读:283 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供一种吩噻嗪衍生物色素检测方法,该方法即便在比显示最大吸收的波长更长波长处也能检测吩噻嗪衍生物色素。在含有吩噻嗪衍生物色素的反应体系中,添加5-羟基-1-(4-磺酸苯基)-4-(4-磺酸苯基偶氮)吡唑-3-羧酸盐、6-羟基-5-(4-磺酸苯基偶氮)-2-萘磺酸盐、3-羟基-4-(4-磺酸萘基偶氮)-2,7-萘二磺酸盐、7-羟基-8-(4-磺酸萘基偶氮)-1,3-萘二磺酸盐、3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘螺[异苯并呋喃-1(3H),9’-(9H)呫吨]-3-酮盐、3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四溴-4,5,6,7-四氯螺[异苯并呋喃-1(3H),9’-[9H]呫吨]-3-酮盐、4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-2’,4’,5’,7’-四碘螺[异苯并呋喃-1(3H),9’-[9H]呫吨]-3-酮盐或类黄酮系色素后,通过波长610~730nm处的吸光度测定来检测吩噻嗪衍生物色素。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及卩分瘗。秦书f生物色素的4全测方法、利用吩P塞。秦书f 生物色素的纟企测来进行的目的成分的测定方法及用于上述方法 的显色剂试剂。
技术介绍
作为目的成分的测定(定性、定量)方法,在实践中广泛 采用利用氧化还原反应的酶法。该方法为例如由名炎测定的目的 成分生成氧化物质,用氧化酶催化该氧化物质与通过氧化生成 显色化合物的显色剂反应,测定生成的显色的吸光度的方法。 该方法中,吸光度的大小对应于生成的显色化合物的量,生成 的显色化合物的量对应于生成的氧化物质的量,氧化物质的量 对应于目的成分的量。即,通过生成的显色(生成的显色化合 物)的检测,以如上所述的氧化还原反应为媒介,可间接地测 定目的成分。上述酶法中使用的显色剂有例如特林德(Trinder)试剂及 N-(羧曱基氨基羰基)-4,4,-双(二曱氨基)二苯胺钠盐(商品 名DA-64;和光纯药公司生产)。此外,生成显色化合物亚曱蓝 等的吩噻噢衍生物色素的显色剂已知例如10-(羧甲基氨基羰 基)-3,7-双(二甲氨基)吩噻。秦盐(商品名DA-67;和光纯药 公司生产,以下也称"DA-67")、 10-(乙酰氨基羰基)-3,7-双(二 甲氨基)吩噻嗪、专利文献3记载的10-(苯羰基)-3,7-双(二 甲氨基)吩噻嗪、专利文献4记载的10- ( 3-(甲基羧基氨基)-六曱基-氨基)-吩噻嗪、10- ( 3-(甲基羧基氨基)-4-曱基-苯基 -氨基)-吩噻嗪、10- ((3-(曱基羧基氨基曱基)-苯基)-曱氨10基)-吩噻嗪、10- ( 1-萘基氨基)-吩噻溱、10-(甲基)-吩瘗 嗪、10-(苯基氨基)-吩噻溱、10-(甲氨基)-吩噻溱等。吩遂 口秦衍生物色素在相对长波长处如590 ~ 670nm处有极大吸收,因 此其中生成亚甲蓝等吩噻。秦衍生物色素的显色剂如DA-67等由 于以下原因而受到重一见。即,如体液那样的样品中,除含有目的成分外,还含有各 种成分,其中也存在于500nm附近及其以下的波长区域有吸收 的成分。因此,如上所述的酶法中,为避免目的成分以外的成 分产生的影响,期望由氧化还原反应生成的显色化合物尽量可 在长波长处^r测。因此,如上所述生成在590 ~ 670nm处有一及大 吸收的吩p塞"秦衍生物色素的DA-67等显色剂,;陂认为特别有用。然而,例如全血样品及血细胞样品那样的含有血红蛋白(以 下称"Hb,,)的样品在约570 ~ 630nm处显示影响色素检测的程度 的吸收,另夕卜,由于Hb的氧化(met化)而有可能在约570 670nm 处显示影响吩噻溱衍生物色素检测的程度的吸收。从而,即便 是生成吩噻。秦衍生物色素的如上所述的显色剂,应用于此类样 品时也会担心其对测定的影响。另外,临床化学专用的自动分析装置检测波长被固定,例 如有分析装置在610 ~ 660nm处无检观'J波长,在700nm处有4全测 波长。然而,610 ~ 670nm处有极大吸收的吩噻。秦衍生物色素因 在700nm下的检测极为困难,因此无法用这种在700nm处有检观'J 波长的现有的装置测定。此外,例如呈蓝色的亚甲蓝通过还原可成为无色的无色亚 甲蓝。利用这种性质,将亚甲蓝等吩噻。秦衍生物色素自身作为 显色剂使用,由目的成分生成还原物质还原吩,塞。秦衍生物色素, 通过测定还原导致的蓝色的消失(吩噻溱衍生物色素的减少) 也可测定目的成分(专利文献1及专利文献2 )。然而,即便在该情况下也会产生与上述同样的问题。专利文献l:日本特开2000-214152号公报 专利文献2:日本特开2000-214155号7>报 专利文献3:日本特公平4-27839号公报 专利文献4:日本特乂>昭60-33479号7>#艮
技术实现思路
因此,本专利技术的目的在于^是供一种吩p塞。秦4汙生物色素检测 方法,其即〗更在比显示纟及大吸收的波长更长波长处也可^r测p分 p塞。秦书f生物色素。本专利技术的吩噻嗪衍生物色素的检测方法的特征在于,其为 一种通过吸光度测定来检测反应体系中的吩p塞。秦衍生物色素的 方法,所述方法包4舌吩瘗。秦4汙生物色素的纟全测工序,上述4企测 工序中,在选自下述式(I)表示的化合物、下述式(II)表示 的化合物及类黄酮系色素所组成的组中的至少 一种色素物质的 存在下,进4亍吩p塞n秦;f汁生物色素的^全测。R'-N二N-R2 ... ( I) 上述式(I)中, R〗为12R!及R2中,X为氩、卣素、钠或钾,Y为氬或S03X,各X相同或不同,各Y相同或不同, Z为氢、曱基或甲氧基,各Z相同或不同。上述式(II)中,X为氬、卤素、钠或钾,各X相同或不同,Y为氢、卤素、钠或钾,各Y相同或不同。本专利技术的目的成分的测定方法的特征在于,其为一种通过 检测吩p塞。秦书f生物色素来测定样品中的目的成分的方法,所述 方法包括下述(A) ~ (E)工序(A) 由上述样品中的目的成分生成氧化物质或还原物质的工序;(B) 在上述样品中,添加通过氧化还原反应而生成吩p塞 溱衍生物色素的显色剂的显色剂添加工序;(C) 通过上述氧化物质或还原物质与上述显色剂的氧化 还原反应而生成吩p塞。秦书f生物色素的工序;(D )通过本专利技术的卩分p塞。秦衍生物色素4企测方法来4全测吩 噻。秦书于生物色素,以测定有无生成上述吩p塞。秦衍生物色素或生 成量的工序;(E)由上述测定结果判断上述样品中的目的成分的有无或量的工序。此外,本专利技术的目的成分的测定方法也可为包括下述(B,) ~ (D,)工序来替换上述(B) ~ (D)工序的方法(B,)在上述样品中,添加吩瘗溱衍生物色素作为显色剂的工序;(C,)使由上述样品中的目的成分生成的还原物质与吩噻。秦衍生物色素发生氧化还原反应的工序;(D,)通过本专利技术的吩噻。秦书f生物色素4全测方法来纟全测卩分p塞。秦4汙生物色素,以测定添加的上述吩p塞。秦4汙生物色素有无减少或减少量的工序。本专利技术的位移试剂的特征在于,其为一种使吩噻嗪衍生物色素的吸收光"i普位移的位移试剂,所述位移试剂含有选自上述式(I)表示的化合物、上述式(II)表示的化合物及类黄酮系色素所组成的组中的至少一种色素物质。本专利技术的显色剂试剂的特征在于,其为 一种在上述本专利技术的检测方法中使用的显色剂试剂,所述显色剂试剂含有通过氧化还原反应而生成吩噻。秦杏T生物色素的底物和p分p塞溱4汙生物色素中的任一种的显色剂、以及上述本专利技术的位移试剂。如本专利技术中所述,在上述色素物质的存在下,即便在比吩蓉。秦书f生物色素原本的极大吸收波长590 ~ 670nm更长波长处,也能检测吩噻。秦衍生物色素。因此,例如即便在样品中含有在570 ~ 670nm附近显示吸收的成分的情况下,也可避免其导致的影响而检测吩p塞溱衍生物色素。此外,通过本专利技术,例如因700nm处的吸光度增加,即便为检测波长固定于700nm的装置也可检测吩p塞。秦衍生物色素。如上所述,通过本专利技术的方法,改进了吩噻"秦衍生物色素的检测条件,与以往相比进一步拓宽了生成吩p塞。秦衍生物色素的显色剂及吩噻。秦衍生物色素的显色剂14的应用范围,因此可称为例如在临床才全查等中才及为有用的方法。附图说明图1为表示在本专利技术的实施例1中酒石黄共存时的亚曱蓝光谱的本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种吩噻嗪衍生物色素检测方法,其特征在于,其为通过吸光度测定来检测反应体系中的吩噻嗪衍生物色素的方法, 所述方法包括吩噻嗪衍生物色素的检测工序, 上述检测工序中,在选自下述式(Ⅰ)表示的化合物、下述式(Ⅱ)表示的化合物及类黄酮系 色素所组成的组中的至少一种色素物质的存在下,进行吩噻嗪衍生物色素的检测; R↑[1]-N=N-R↑[2] ...(Ⅰ) 上述式(Ⅰ)中, R↑[1]为 *** R↑[2]为 *** R↑[1] 及R↑[2]中, X为氢、卤素、钠或钾, Y为氢或SO↓[3]X, 各X相同或不同,各Y相同或不同, Z为氢、甲基或甲氧基,各Z相同或不同, *** ...(Ⅱ) 上述式(Ⅱ)中, X为氢、卤素 、钠或钾,各X相同或不同, Y为氢、卤素、钠或钾,各Y相同或不同。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:米原聪稻村范郎
申请(专利权)人:爱科来株式会社
类型:发明
国别省市:JP[日本]

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