贮存稳定性纤维蛋白密封剂制造技术

提供了经过补充和未经补充的、即时可用的纤维蛋白密封剂（ＦＳ），是从随时使用型、贮存稳定性、浓缩的液体纤维蛋白原制备物制备的。所生产的ＦＳ产品在施用于组织时，提供防止血液损失、促进伤口愈合和很多其他治疗性与非治疗性应用所必需的弹性、拉伸强度和粘合性。进一步提供了本发明专利技术经过补充和未经补充的、贮存稳定性ＦＳ产品的试剂盒和制备方法，以及使用和递送它们的方法。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术一般涉及经过补充和未经补充的、贮存稳定性纤维蛋白密封剂。更具体地，本专利技术涉及即时可用的纤维蛋白密封剂，是从贮存稳定性、随时使用型、浓缩的纤维蛋白原制备物制备的，还涉及制备这类纤维蛋白密封剂的方法，和使用它们防止血液损失、促进伤口愈合和很多其他治疗性与非治疗性应用的方法。
技术介绍
人类的血凝块形成、也就是血液凝固，借助复杂的事件级联而发生，其中在最后的步骤中，纤维蛋白原的单体形式与凝血酶和活化的XIII因子在钙离子的存在下反应，生成包含交联纤维蛋白聚合物的纤维蛋白凝块。最近已经开发了生物粘合剂，包含纤维蛋白原、凝血酶和一种或多种其他组分，它们模仿自然凝固的最后阶段，从而生成纤维蛋白凝块。因而，纤维蛋白原类材料被称为纤维蛋白-或组织-密封剂、生物密封剂、纤维蛋白-或组织-胶、生物粘合剂、外科粘合剂等(本文统称为“纤维蛋白密封剂”或“FS”)，能够用于将活组织连接在一起，并且保持连接以密封内部与外部伤口，例如组织、器官、肌肉、骨和皮肤中的伤口，以减少血液损失，同时产生止血作用(例如参见专利FR-2448900)。这类粘合剂普遍用在外科中，特别是防止或终止出血，代替或加强缝合线、固定移植物(例如皮肤移植物)、密封经过切除的组织(例如肺或胃肠道手术)或者粘合假体各部分等。FS产品一般是从下列原料制备的(1)纤维蛋白原浓缩物，它还可以含有纤连蛋白、XIII因子、冯威勒布兰特因子和痕量清蛋白；(2)激活物组分，例如凝血酶(例如人或牛的)或凝血酶样材料；和(3)凝血酶激活物，例如钙离子(例如CaCl2)。不过，每种FS的精确组成是用作原料的特定血浆部分的函数。例如，商业上所制备的FS产品经常含有牛组分。在加拿大、欧洲和其他可能的地方，商业上可用的FS通常还含有抑肽酶作为稳定剂。然而，已经显示在拉伸强度与最终纤维蛋白原浓度之间有直接关系(日本专利未审公开申请Kokai No.Sho6-1-293443)。因而，浓缩纤维蛋白原的可用性是常规FS产品制备的重要因素。澳大利亚专利75097/87描述了一种单组分粘合剂，它含有纤维蛋白原、XIII因子、凝血酶抑制剂(例如抗凝血酶III)、凝血酶原因子、钙离子和(如果必要的话)纤溶酶抑制剂的水溶液。美国专利No.4,427,650和4,427,651(Stroetmann)描述了粉末或可喷雾制备物形式的富集血浆衍生物的制备，用于增强伤口的关闭和愈合，它含有纤维蛋白原、凝血酶和/或凝血酶原和纤维蛋白分解抑制剂，还可以含有其他成分，例如血小板提取物。美国专利No.4,627,879和4,928,603(Roseet al.)公开了制备低温沉淀悬液的方法和它们制备FS的用途，它们含有纤维蛋白原和XIII因子。JP 1-99565公开了纤维蛋白粘合剂的制备试剂盒，用于伤口愈合。PCT文献WO 91/09641描述了一种纤维蛋白胶，它含有纤维蛋白原，并且加入了凝血酶。这种FS含有所加入的凝血酶，但是是以凝血酶活性被抑制的方式制备的，在一种实施方式中它没有包含钙离子，因为直到使用之时才加入。不过，所公开的FS趋于在约90秒后自发凝固，即使没有加入钙离子也是如此。当加入钙离子时，它在不到2秒内凝固。在其他实施方式中，通过将产品酸化至pH小于5.5以抑制凝血酶活性，延缓胶的凝固。该文进一步提供在使用之时增加pH的手段，以取消该抑制作用。另外，FS递送系统已被公开在Miller et al.，美国专利No.4,932,942和Morse et al.，PCT公报WO 91/09641中。FS产品在商业上已经上市销售若干年，在欧洲有Immuno AG(Vienna，Austria)和Behringwerke AG(Germany)(Gibble et al.，Transfusion 30741-747(1990))，其他地方也有(例如参见美国专利No.4,377,572和4,298,598，归Immuno AG所有)。不过，大多数在美国以外临床使用的FS产品造成某些危险，结果还没有获得食品与药品管理局许可在美国使用。例如，如上所述，在欧洲可用的FS产品含有非人类来源的蛋白质，例如抑肽酶和牛凝血酶。所以，某些个体面临对这类非人类蛋白质添加剂产生变态反应的危险。美国专利No.6,183,498报道了生物医学粘合剂的使用已被观察到诱发炎性组织反应。而且，当使用热灭活使任何可能存在于FS中的病毒失活时，该过程可能导致变性蛋白质的生成，它们也可能是变应原。例如，欧洲热灭活方法不会使朊病毒失活，它们导致牛海绵状脑病(“疯牛病”)，这在最近已经成为欧洲牛群的流行病，并且疾病可能被携带在用在外来FS产品的牛蛋白质中，当这些产品用于它们的预期目的时有感染人的危险。Alterbaum(美国专利No.4,714,457)和Morse et al.(美国专利No.5,030,215)公开了生产自体固有的FS的方法，其中没有使用牛产物。PCT公报WO 94/07548描述了富集血小板因子的FS，它能够在没有加入凝血酶的情况下，通过加入到再钙化胶、一种凝固激活物中而凝固，例如高岭土。不过，因为直到胶被使用时才掺入激活物，凝固时间是不确定的和难以预测或控制的。这是因为纤维蛋白原浓缩物是一种高粘性产物，它难以操控。而且，由于凝固与活化同时进行，难以从已活化的胶中分离激活物。然而，在足够高的纤维蛋白原浓度下，FS制备物在伤口愈合过程中提供安全的止血、良好的密封剂与伤口和/或组织表面的粘合、高强度的粘合和/或伤口密封和完全的粘合剂可吸收性(Byrne et al.，Br.J.Surg.78841-843(1991))。就最佳的粘合而言，在随时使用型组织粘合剂溶液中需要约15至60mg/ml的纤维蛋白原浓度(MacPhee，personal communication)。FS产品的临床用途已有评论(Brennan，Blood Reviews 5240-244(1991)；Gibble et al.，Transfusion 30741-747(1990)；Matras，J.Oral Maxillofac.Surg.43605-611(1985)；Lerner et al.，J Surg.Res.48165-181(1990))。Baxter/Hyland(Los Angeles，Calif.)与The American NationalRed Cross协作，已经共同开发了Tisseel，第一种在美国获得许可的商业化纤维蛋白密封剂(例如参见美国专利No.6,054,122、6,117,425和6,197,325(MacPhee et al.))。这种FS产品优于欧洲产品，因为它不含牛蛋白质。例如，它含有人凝血酶，并且不含抑肽酶，从而减少变应原性的可能。另外，借助溶剂洗涤法进行病毒灭活，这产生很少的变应原性变性蛋白质。从制备的观点来看，FS的纤维蛋白原组分可以从血浆制备，借助低温沉淀，继之以分馏，得到一种组合物，在与活化凝血酶接触或混合之后生成纤维蛋白密封剂或凝块。在现有技术中，纤维蛋白原和凝血酶浓缩物是以冻干形式贮存的，它必须在使用前不久与CaCl2溶液混合再生。在混合之后，将组分施用于组织，在那里它们凝固在组织表面上本文档来自技高网...

【技术保护点】
随时使用型、即时可用的纤维蛋白密封剂（ＦＳ）组合物，是从贮存稳定的、纤维蛋白原水溶液组分和活化的凝血酶或凝血酶样组分制备的。

【技术特征摘要】
US 2001-12-4 60/336,6361.随时使用型、即时可用的纤维蛋白密封剂(FS)组合物，是从贮存稳定的、纤维蛋白原水溶液组分和活化的凝血酶或凝血酶样组分制备的。2.权利要求1的FS组合物，向其中在纤维蛋白原与活化的凝血酶或凝血酶样组分的聚合之前、期间或之后不久加入至少一种额外组分。3.体外使用权利要求1或2的FS组合物的方法。4.体内使用权利要求1或2的FS组合物的方法。5.制备任意权利要求1、3或4的FS组合物的方法，包含在水溶液中组合贮存稳定的、纤维蛋白原水溶液组分和活化的凝血酶或凝血酶样组分，再一起混合各组分直至纤维蛋白凝胶或溶胶生成。6.制备任意权利要求2、3或4的FS组合物的方法，包含在水溶液中组合贮存稳定的、纤维蛋白原水溶液组分和活化的凝血酶或凝血酶样组分，向组合后的各组分加入至少一种额外组分，再一起混合全部组分直至纤维蛋白凝胶或溶胶生成。7.递送权利要求1-6任意一项的FS组合物至组织的方法，其中贮存稳定性纤维蛋白原水溶液是与所有其他组分单独贮存的，直至在递送FS组合物之间不久。8.权利要求7的方法，其中FS组合物是从双膛注射器中递送的，其中贮存稳定性纤维蛋白原水溶液组分单独贮存在一个膛中，而活化的凝血酶或凝血酶样组分的水溶液贮存在第二个膛中，其中一旦从注射器中递送，各组分混合生成FS组合物。9.权利要求8的方法，其中至少一种额外组分是与活化的凝血酶或凝血酶样组分的水溶液贮存在双注射装置的第二个膛中的，其中一旦递送，各组分全部混合在一起生成FS组合物。10.递送权利要求1-7任意一项的FS组合物至组织的方法，其中贮存稳定性纤...

【专利技术属性】
技术研发人员：克里斯托弗J伍尔弗顿，
申请(专利权)人：克里斯托弗J伍尔弗顿，
类型：发明
国别省市：US[美国]