多糖金磁复合微粒载药体及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种以金磁微粒为核心，以葡聚糖，环糊精及其衍生物等可生物降解的多糖为材料，合成具有更好生物相容性和载药性的多糖金磁复合微粒载药体及其制备方法。该多糖金磁复合微粒载药体是由多糖金磁复合微粒与药物溶液直接混合，通过物理吸附，将药物负载于金磁复合微粒上形成的载药复合体。该多糖金磁复合微粒载药体的制备方法包括：制备多糖金磁复合微粒、制备多糖金磁复合微粒载药体。解决了现有金磁复合微粒载药体制备方法不具体，载药量等理化指标不明确等技术问题，所制备的用于载药的多糖金磁复合微粒分散性好，粒径均一，有更好生物相容性，多糖金磁复合微粒载药体具有良好的药物缓释和控释效应，合成方法简单，具体，可操作性强。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种金磁复合微粒载药体及其制备方法，特别涉及一种以金磁微粒为核心，以天然或人工合成的可生物降解的多糖，如葡聚糖，环糊精及其衍生物为材料，合成具有更好生物相容性和载药性的多糖金磁复合微粒载药体及其制备方法。
技术介绍
磁性药物微球作为第四代靶向制剂，有利于提高药物疗效，降低毒副作用，为化疗药物的临床应用开辟了新途径。它是将抗肿瘤药物和磁性物质共同包埋或吸附于高分子材料，特别是具有生物相容性的生物大分子中制成稳定制剂。该制剂注入体内后在足够强的外磁场作用下逐渐集中于肿瘤部位，药物载体通过酶的催化或理化条件如pH，渗透压或温度的改变而降解，缓慢释放化疗药物，使肿瘤部位保持较高的血药浓度，相应减少了全身其他部位的药物水平，从而起到高效、缓释、低毒的作用。磁性微球由磁性材料、载体材料两部分组成。通常应用的磁性物质有：纯铁粉、羰基铁、磁铁矿、铁钴合金等，尤以Fe3O4磁流体居多，粒度要求越小越好，一般直径在10～30nm，另外还应具有非常良好的磁响应性。常用的载体材料包括白蛋白、明胶、壳聚糖、葡聚糖、淀粉等天然高分子，以及聚碳酸酯、聚烷基氰基丙烯酸酯、聚乙烯吡咯烷酮、聚乳酸及其共聚物等合成高分子。它们能够降低系统毒性并且增加生物相容性，减少内皮细胞的清除作用。另外，这些双功能材料一方面可以与磁性粒子通过化学键合或物理吸附结合，另一方面也可以和药物结合，从而具有一定的药物缓释控释作用。1996年，德国的Lubbe等首先完成了世界上第一例应用磁性药物靶向治疗的临床实验，在14个晚期实体瘤患者的磁靶向治疗中，发现患者对磁靶向药物的耐受性很好。2002年美国FeRx公司磁导向载体一阿霉素(MTC-DOX)技术已通过美国FDA认证，主要用于肝癌(肝细胞癌-HCC)的治疗，在2002年11月“分子靶向和癌症治疗”的年会上，FeRx公司报道了靶向治疗肝细胞癌的I/II期临床试验结果，预示了这项新技术在治疗肝癌上的巨大潜力。Liang等氨基修饰的超顺磁性氧化铁纳米粒子作为一种新型的生物磁性靶向的载体，研究其在磁靶向性肝癌治疗中的应用。中南大学张阳德教授等以磁性阿霉素白蛋白对移植性肝癌的治疗研究中表明磁性阿霉素白蛋白在外加磁场作用下具有良好的治疗效果。慕蓉进行了载阿霉素磁性壳聚糖微球靶向治疗大鼠移植性肝癌的研究，结果显示磁性壳聚糖载药具有良好的靶向疗效。有关纳米金在生物医学中的应用也有很多报道。Priyabrata Mukherjee等人将纳米金和血管内皮细胞生长因子偶联，治疗慢性淋巴细胞性白血病。研究表明，单独使用一定剂量的纳米金不会引起细胞大量凋亡；而偶联血管内皮细胞的纳米金可显著得引起细胞凋亡。这些发现证实了运用纳米金载药系统治疗人类恶性疾病的优点。Giulio等胶体金作为负载肿瘤抑制因子的载体用于靶向给药的疗效，毒性等研究，表明胶体金对细胞没有明显的伤害，而负载肿瘤抑制因子的胶体金对肿瘤细胞有明显杀伤作用。姚翠萍等人将免疫胶体金与牛肠碱性磷酸酯酶特异抗体结合，然后用激光照射后，治疗人类恶性淋巴瘤细胞Karpas299；结果表明，激光照射后，结合金微粒的Karpas299细胞死-->亡率达到95％以上，而没有结合金微粒的KG1细胞基本上没有发生变化。表明金微粒对人体细胞没有明显的伤害。Zharov等设计了一套系统，把40nm的金微粒通过抗体与MDA-MB-231乳腺癌细胞上的抗原结合，然后用激光照射细胞微粒结合体，可以观察到在纳米簇周围产生大量的气泡从而导致肿瘤细胞的死亡。El-Sayed等利用免疫胶体金对癌症细胞诊断进行了先行性的研究，得到一定的反响。以上研究表明，将磁性微粒与纳米金结合起来用于肝癌靶向治疗，可以把磁性微粒的磁靶向性和金元素本身具有增强机体非特异性免疫反应能力结合起来，起到靶向给药和提高机体免疫力的作用，有着巨大的应用前景。美国专利(Pat.No.7226636 B2)报道了一种金包被的磁性纳米粒子的合成过程。该专利公开了合成方法，即在适宜的液体溶液中，向磁流体悬液中加入一定量的还原性的金的化合物和还原性介质，反应一定的时间，就可以合成金包被的磁性纳米粒子。英国专利(Pat.GB2415374 A)报道了一种合成克级核壳型磁性纳米粒子的方法，该专利中的核是γ-Fe2O3，壳层是金。美国专利Pat.No.7232471 B2报道了一种环糊精修饰的纳米金的合成方法。中国专利ZL03124061.5和ZL 03153486.4公开了本申请人的核壳型和组装型金磁微粒的合成方法，但未涉及金磁微粒的进一步修饰和在靶向给药中的应用。本课题组2006年申请的专利：超顺磁性载药体及其制备方法(专利申请号：200610104757.0)中，涉及了金磁复合微粒载药体的制备过程及用于靶向治疗，但权利要求涉及面宽，一些指标较为笼统，保护性不强，没有给出具体的超顺磁性复合微粒的粒径，磁化饱和强度，磁响应性，载药率，包封率等，并且没有具体的多糖金磁复合微粒载药体的制备方法和理化指标。
技术实现思路
本专利技术的目的：为了解决
技术介绍
中存在的上述技术问题，本专利技术提供了一种生物相容性好，无毒副作用，有一定的粒径，具有好的药物缓释和控释作用，包封率符合药典规定的具有超顺磁性的多糖金磁复合微粒载药体及其制备方法。本专利技术的技术方案：多糖金磁复合微粒载药体，其特殊之处在于：是由多糖金磁复合微粒与药物溶液直接混合，通过物理吸附，将药物负载于金磁复合微粒上，形成的载药复合体，该多糖金磁复合微粒是由组装型或核壳型金磁微粒与天然或人工合成的多糖类高分子材料混和，通过化学键合或物理吸附，将高分子聚合物包被于金磁微粒上形成的，或者是以金磁微粒为核心，通过交联剂的交联作用，使多糖分子连成网状结构形成的。金磁微粒包括核壳型和组装型。核壳型金磁微粒由磁性材料的核心部分(Fe3O4)和包覆于其表面的胶体金外壳部分组成，粒径为约为40纳米；组装型金磁微粒是将磁性材料的核心部分(Fe3O4)经硅烷化修饰，再通过Au-S键，将胶体金外壳部分包覆于核心部分表面，粒径约为3-5微米。天然或人工合成的多糖分子具有良好的生物相容性，无毒副作用，可生物降解等特点，包括葡聚糖，环糊精及其衍生物等。其中葡聚糖包括分子量为10000，20000，30000，40000，50000和70000六种。环糊精是一类两端开口直径不同的圆锥状中空筒型环状多糖化合物。环糊精及-->其衍生物的最大特点是具有特定的空腔，不同尺度的空腔，可以与特定大小和性状的小分子作用形成包合物。由6、7、8个葡萄糖分子通过1，4-糖苷键连接而成的的环糊精分别称为α，β，γ-环糊精。环糊精衍生物包括羟丙基-α-环糊精，羟丙基-β-环糊精，羟丙基-γ-环糊精，甲基-β-环糊精等。药物是单药，或是两种、两种以上的复合药物，可以是抗癌化疗药物、蛋白药物、基因药物或抗生素类药物，其中抗癌化疗药物包括盐酸阿霉素、5-氟尿嘧啶、顺铂、洛铂、卡铂、甲氨喋呤、阿糖胞苷；蛋白药物包括肿瘤抑制因子；基因药物包括核酸疫苗；抗生素类药物包括阿克拉霉素、红霉素、盐酸多西环素。制备该多糖金磁复合微粒载药体的方法，其特殊之处在于：包括以下步骤步骤1)制备多糖金磁复合微粒步骤1.1)配制多糖溶液将浓度为0.5-4mol/L碱溶液加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
多糖金磁复合微粒载药体，其特征在于：是由多糖金磁复合微粒与药物溶液直接混合，通过物理吸附，将药物负载于金磁复合微粒上，形成的载药复合体，所述多糖金磁复合微粒是由组装型或核壳型金磁微粒与天然或人工合成的多糖类高分子材料混和，通过化学键合或物理吸附，将高分子聚合物包被于金磁微粒上形成的，或者是以金磁微粒为核心，通过交联剂的交联作用，使多糖分子连成网状结构形成的。

【技术特征摘要】
1.多糖金磁复合微粒载药体，其特征在于：是由多糖金磁复合微粒与药物溶液直接混合，通过物理吸附，将药物负载于金磁复合微粒上，形成的载药复合体，所述多糖金磁复合微粒是由组装型或核壳型金磁微粒与天然或人工合成的多糖类高分子材料混和，通过化学键合或物理吸附，将高分子聚合物包被于金磁微粒上形成的，或者是以金磁微粒为核心，通过交联剂的交联作用，使多糖分子连成网状结构形成的。2.根据权利要求1所述的多糖金磁复合微粒载药体，其特征在于：所述多糖是葡聚糖、环糊精或环糊精衍生物；所述药物是单药，或是两种、两种以上的复合药物。3.根据权利要求1或2所述的多糖金磁复合微粒载药体，其特征在于：所述药物是抗癌化疗药物、蛋白药物、基因药物或抗生素类药物；所述抗癌化疗药物包括盐酸阿霉素、5-氟尿嘧啶、顺铂、洛铂、卡铂、甲氨喋呤、阿糖胞苷；蛋白药物包括肿瘤抑制因子；基因药物包括核酸疫苗；抗生素类药物包括阿克拉霉素、红霉素、盐酸多西环素。4.一种制备如权利要求1所述的多糖金磁复合微粒载药体的方法，其特征在于：包括以下步骤步骤1)制备多糖金磁复合微粒步骤1.1)配制多糖溶液将浓度为0.5-4mol/L碱溶液加入到多糖中，配制成浓度为20～100mg/ml的多糖溶液；步骤1.2)合成多糖金磁复合微粒取金磁微粒和浓度为0.5～4mol/L的碱溶液加入到步骤1.1)制得的多糖溶液中得到混合体系，将该混合体系边反应边搅拌，合成多糖金磁复合微粒悬液；其中步骤1.1)中多糖与步骤1.2)所加金磁微粒的量比为5～40∶1；步骤1.3)清洗将步骤1.2)制得的多糖金磁复合微粒悬液反复磁分离，弃去上清，直到最后溶液pH为7；步骤2)制备多糖金磁复合微粒载药体步骤2.1)清洗取多糖金磁复合微粒置于离心管中，磁分离，弃去上清；步骤2.2)载药加入浓度为0.5～1.0mg/ml的药物溶液，补加超纯水，置于恒温摇床震荡，反...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔亚丽，晁旭，彭明丽，陈超，辛小芳，李珂，惠文利，
申请(专利权)人：陕西北美基因股份有限公司，
类型：发明
国别省市：87[中国|西安]