三疣梭子蟹抗菌肽基因及其克隆方法技术

三疣梭子蟹抗菌肽基因及其克隆方法，所说的三疣梭子蟹crustin抗菌肽 基因cDNA不包括polyA共有565nt，其中含有5’端非编码区(5’UTR)长75nt， 1个阅读框长330nt，3’非编码区(3’UTR)长160nt，其GenBank序列号为 FJ467931。本发明专利技术成功克隆到三疣梭子蟹I型crustin cDNA全长序列，可通过 基因工程方式构建原核或真核基因工程菌株，高效表达具生理活性的重组蛋 白，大量生产。作为饲料免疫添加剂可替代传统饲料中的某些抗生素，用于 海水养殖业，实现绿色养殖，减少乃至消除抗生素在水产品中的蓄积，提高 水产品质量；也可以作为某些耐药性抗生素的有效替代品，用于水产养殖业 中耐药性细菌的防治药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从三疣梭子蟹(尸om/w加'ft^e/aft^)中克隆的I型 Crustin抗菌肽基因，属生物

技术介绍
中国是全球最大的水产养殖大国，水产品总产量(捕捞+养殖)占全球35%， 其中水产品养殖产量约占全球的70%， 2005年水产品产量达5181万吨。其中海 水产品2854万吨，占总产量的55%，捕捞约1022万吨，人工养殖产品约1888 万吨。随着全球对水产品的消费逐年增加，国内消费增长势头迅猛，另一方面 全球海洋捕捞资源衰退，供给逐步转向以养殖水产品为主，中国水产养殖业在 全球消费中越来越重要。人工养殖比例逐年提高，1978年人工养殖比例占26%， 2005年人工养殖比例达61%。随着水产养殖业的蓬勃发展，由于高密度养殖、 养殖水域富营养化、生态环境恶化等原因使得水产养殖品种频频发生各种疾病， 经济损失严重，已成为21世纪水产养殖业发展的重要制约因素。据初步统计， 目前危害水产养殖生物的病害已达400 500种，大多数病害是由病毒、细菌、 真菌等微生物所引起的。而传统的抗微生物药物及饲料添加剂一一抗生素，由 于耐药性病原菌的形成，以及食品安全性等公本文档来自技高网...

【技术保护点】
三疣梭子蟹的Ⅰ型ｃｒｕｓｔｉｎ抗菌肽基因，其特征在于，所说的三疣梭子蟹ｃｒｕｓｔｉｎ抗菌肽基因ｃＤＮＡ不包括ｐｏｌｙＡ共有５６５ｎｔ，其中含有５’端非编码区（５’ＵＴＲ）长７５ｎｔ，１个阅读框长３３０ｎｔ，３’非编码区（３’ＵＴＲ）长１６０ｎｔ，其ＧｅｎＢａｎｋ序列号为ＦＪ４６７９３１，全长ｃＤＮＡ序列如下：　１０　２０　３０　４０　５０６０　ｇａａａａｇａｇｃａ　ｇａａｃａａｇａｃａ　ｃｔｇｔｇｇｔｇｇａ　ｃａｃａｃｃｔｇｃｔ　ｃｔｃａｃｃａａｃｇ　ｔｃｔｔｃｃｔｃａａ　７０　８０　９０　１００　１１０　１２０　ｇａａｔｃｔａｔａｇ　ａｇａｔａａｔｇａａ　ｇａｔｇｃａｇａｃｔ　ｇｔａａｔａｇ...

【技术特征摘要】
1. 三疣梭子蟹的I型crustin抗菌肽基因，其特征在于，所说的三疣梭子蟹crustin抗菌肽基因cDNA不包括polyA共有565nt，其中含有5’端非编码区(5’UTR)长75nt，1个阅读框长330nt，3’非编码区(3’UTR)长160nt，其GenBank序列号为FJ467931，全长cDNA序列如下10 20 30 40 5060gaaaagagca gaacaagaca ctgtggtgga cacacctgct ctcaccaacgtcttcctcaa70 80 90100110120gaatctatag agata<u>atg</u>aa gatgcagact gtaatagcca tggcagttgtggctaccatt 130140150 160 170180gtggccatga cagaagcatc cctagtactt ccatacccag gtctggattgtaagtactgg 190200210220230240tgcaaggaca actacgataa acactactgc cgtggcccac caggacgtacctatccacct 250260270 280 290300tataccgagc gctctggtaa atgtcctccg gtccgtgcta catgtactggtgtcaggtca 310320330340350360cgcctaccaa agttgtgtcc ccatgatggt gcttgtgact ttccaagcaagtgctgttat 370380390400 410420gacgcctgtg tggagcacca cgtatgcaag actcctgatt tctacacaatcattgaa 430440450460470480ccagactgaa gatgaaaatt tttcaccaat tttgcttaca aactttacagagatgatatt 490500510520530540ctcttaaaac attgatttat ggttatgcta ttctatattc atttgtaaacaatataacaa 550560570580aat<u>aataaa</u>c gcaattgtat ccgtgaaaaa aaaaaaaaaa2.如权利要求1所述的三疣梭子蟹的I型crustin抗菌肽基因，其特征在于，所说的三疣梭子蟹的I型crustin抗菌肽cDNA推导编码氨基酸序列如下<formula>formula see original document page 3</formula>CPHDGACDFP SKCCYDACVE HHVCKTPDFY * 。 ------3.如权利要求1所述的三疣梭子蟹的I型cmstin抗菌肽基因，其特征在于，所说的三疣梭子蟹的I型crustin抗菌肽cDNA读码框及推导蛋白质氨基酸序列如下gaaaagagca gaacaagaca ctgtggtgga cacacctgct ctcaccaacg tcttcctcaa 60gaatctatag agata atg朋g atg cag act gta ata gcc atg gca gtt gtg Met Lys Met Gin Thr Val lie Ala Met Ala Val Val get acc att gtg gcc atg aca gaa gca tec eta gta ctt cca tac cca 159 Ala Thr lie Val Ala Met Thr Glu Ala Ser Leu Val Leu Pro Tyr Pro 28ggt ctg gat tgt aag tac...

【专利技术属性】
技术研发人员：申望，王日昕，石戈，廖智，王建鑫，
申请(专利权)人：申望，王日昕，石戈，廖智，王建鑫，
类型：发明
国别省市：33