本发明专利技术提供一种单克隆抗体，其具有下列特征：１）抗体为ＩｇＭ类免疫球蛋白，抗体轻链类型κ型；２）识别抗原为粘蛋白表面涎酸化的糖链结构；３）特异识别结直肠腺癌、子宫内膜腺癌及胰腺癌组织，不识别相应的正常组织。具体而言所述单克隆抗体由保藏号为ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．２６４３的杂交瘤细胞分泌，其重链可变区氨基酸序列如ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１所示，轻链氨基酸序列如ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示。本发明专利技术还提供将所述单克隆抗体用于制备药物或试剂盒的应用，所述药物或试剂盒可应用于癌症的筛查，早期诊断，治疗监测及肿瘤成像，本发明专利技术并提供了一种抑制结肠癌肿瘤细胞生长的新型抗体。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药
，具体而言本专利技术提供特异识别结直肠腺癌、子宫内膜腺癌以及胰腺癌细胞糖链抗原，并能抑制结肠肿瘤细胞生长的单克隆抗体及分泌该抗体的杂交瘤细胞，以及所述抗体在制备用于治疗结肠肿瘤的药物和试剂盒中的应用，本专利技术还提供药物和试剂盒，其包含所述单克隆抗体作为活性成分。
技术介绍
结直肠癌指大肠内膜上皮细胞的恶性改变，包括异常分化，异常增殖以及细胞代谢和分泌异常等。临床上结直肠癌的绝大多数(>95%)为腺癌，其它类型的结直肠癌很少，包括淋巴瘤，良性瘤，恶性肉瘤等。结直肠腺癌的发生原因，诊断治疗和预防一直是基础医学和临床医学的研究重点。结直肠癌的死亡率居肿瘤死亡的第二位。美国每年诊断为结直肠癌的病例超过13万，死亡大于5万，死亡率约40%。结直肠癌在我国是第三位常见消化道肿瘤，位于食管癌和胃癌之后，但每年死于结直肠癌的病例估计超过4万人，约占肿瘤5.8%。我国结直肠癌发病一个明显特点是平均发病年齡45岁左右，比欧美等国提前12-18年，其中直肠癌较多，约占60%。近二十年，随着我国经济增长和人们生活水平的逐步提高，我国结直肠癌的发病人数逐年增加，发病更趋于年轻化。多年的临床研究发现，如果能够早期发现和准确诊断，几乎所有的结直肠癌都能在一定程度上进行治疗(Sanduleanu and Stockbrugger， 2003)，因此有效的诊治手段对减少结直肠癌的死亡有重要意义。胰腺癌为恶性程度极高的消化道肿瘤，其死亡率占我国恶性肿瘤的第六位，在美国位于第四位。近年来，胰腺癌的发病率呈上升趋势，五年生存率仍很低，在诊断后的中位生存期为4 6个月(Coppola, 2000)。胰腺癌因其独特的解剖位置，症状隐匿，早期诊断非常困难，目前尚无有效的早期诊断方法。目前，用于临床的肿瘤抗原检测，均为非特异性的肿瘤相关抗原，只能通过选择适当的肿瘤标志物进行联合检测，来提高检测的灵敏性和有效性。子宫内膜癌是发生于子宫内膜的一组上皮性的恶性肿瘤，又称子宫体癌。以来源于子宫内膜腺体的腺癌最为常见，称为子宫内膜腺癌。子宫内膜癌为女性生殖道常见恶性肿瘤，发病率占女性生殖道恶性肿瘤20%~30%，且呈不断上升趋势，占女性全身肿瘤7%。在子宫内膜癌的治疗中，手术作为首选治疗已为世界范围所接受；术后化疗逐渐受到重视；但其早期诊治仍为当前主要问题。传统的诊断方法是根据临床表现，辅助检査结果综合分析，如内膜组织学的检査方可确诊。糖基化的变更是癌细胞的普遍特征，并且有一些类型的糖链结构被公认为肿瘤发生、发展的标志物，对特异性的肿瘤标志物检测可以达到早期诊断肿瘤的目的(Ho etal., 1988;Kim, 1990;Kim， 1998a)。消化道内膜上皮细胞发生恶变时往往引起糖基化改变，主要改变之一是粘蛋白(Mucin)在肿瘤中的过度表达，另一改变是粘蛋白的不完全糖基化。已有的研究资料表明肿瘤细胞不完全糖基化的结果是产生Tn， T和涎酸化Tn (S-Tn)抗原，这些抗原结构在正常情况下很少见(Boland et al.， 1986;Itzkowitz et al.,1989;Bresalier et al 1991;Itzkowitz et al,, 1992;Kim， 1998b;Hara et al.，2000)。尽管糖基化作用以及改变的糖链在肿瘤发生和发展过程中的病理作用机制还不清楚，但肿瘤特异的糖链结构已经成为肿瘤监测的标记物，用于发现肿瘤的早期改变，肿瘤发展和预后，肿瘤治疗效果评价，甚至可以成为肿瘤治疗的靶标。尽管结直肠癌的检出并不十分困难，但目前对于不同时期的结直肠癌诊断方法不一(Zhang et al., 2002;Winawer， 2005)。传统的检查方法有肠镜，钡餐透视和肠道内容物检测等，诊断往往依赖临床医生根据检査结果，结合实践经验作出的推断。而对于局限于粘膜的早期肿瘤，传统检测方法很难作出准确的判断，需要灵敏的检测手段，现在己经建立了多种在分子水平检测技术，如RT-PCR， DNA探针检测以及特异的肿瘤细胞标记物检测等方法(Finkelstein et al., 1996a;Finkelstdn ct al.， 1996b;Hammel禾口 Soussi，2000;Lassmanneta1.,2002),可以灵敏地对结直肠癌进行早期诊断。然而，灵敏的分子检测技术RT-PCR， DNA探针检测却因特异性低在临床应用较少，目前体外诊断主要是依靠对多种肿瘤标记物的检测，再综合分析结果进行判定。目前结直肠癌的诊断仍采用传统的检查方法结合临床症状来确定，主要原因是现有的肿瘤标记物抗体对肿瘤的识别存在特异性差和识别抗原不确定等因素，造成检出结直肠癌的敏感性和特异性低(秦晓光,1995)。在大多文献报道中，单克隆抗体对结直肠癌的敏感性和特异性分别为30-60°/。和20-50%。 CEA， CA19-9, CA72-4等抗原的单克隆抗体对结直肠癌的辅助诊断，如抗CEA单克隆抗体识别癌胚抗原，由于大多数肿瘤都不同程度的表达CEA，所以抗CEA单抗用于诊断某一肿瘤的特异性差。但为提高结直肠癌的检出率，在临床上多种单克隆抗体联用能提高检出阳性率见表l，由此成为诊断肿瘤的选择(吴道红,2004;徐笑红，1998)。表1 CA-724,CA19-9,CEA和CA-50对不同肿瘤的阳性结果_CA-724 CA-199 CA-50 CEA 联检n n阳性率(％) n阳性率(％) n阳性率(％) n ，，， n ^』目前，胰腺癌的诊断主要通过一些常用肿瘤标志物的联合检测来实现，如CA19-9， CA50， CA242等指标，它们对于诊断肿瘤发生，监测预后及复发起到了重要作用。目前最常用的是将CEA， CA19-9和CA242联用。165 90 54.55153 68 44.44107 24 22.43胰腺癌组 68 47 69.12食道癌组 52 19 36.54下.常对照组50 0 08652. 124929. 76643. 144630. 。66863. 551211.215073.532029. 411936. 54132500004527.2714084. 857850. 9811877. 121413.087973.832130.886392.651223.082853. 850000经经绍癒瘩衝胃 肝5CA19-9在胰腺癌中的敏感性最强(80%),但特异性很低(43%)， CEA与CA242联用后可将特异性提高至92%，但三者联用后，灵敏度仅为29%(Nietal.,2005)。这些指标的特异性及敏感性尚不能满足临床需要，因此需要寻找新的诊断及联合诊断指标进一步提高胰腺癌的早期诊断率。近年来，在子宫内膜癌的诊断中，糖类抗原成为发展迅速，应用广泛的肿瘤标志物，主要为糖蛋白与糖脂，抗原决定簇定位于糖链或蛋白核上，它们的出现为临床肿瘤的诊断带来方便，如CA19-9， CA72-4， CA125，CA15-3等(Yamazawa et al.， 2005; Hareyama et al.， 1996; Cherchi et al.， 2002;Lo et al., 1999)。这些糖类抗原的敏感本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种单克隆抗体，所述抗体具有下列特征：１）抗体为ＩｇＭ类免疫球蛋白，抗体轻链类型κ型；２）识别抗原为粘蛋白表面涎酸化的糖链结构。
【技术特征摘要】
1.一种单克隆抗体，所述抗体具有下列特征1)抗体为IgM类免疫球蛋白，抗体轻链类型κ型；2)识别抗原为粘蛋白表面涎酸化的糖链结构。2. 权利要求1所述的单克隆抗体，其特异识别结直肠腺癌、子宫内膜腺 癌及胰腺癌组织，不识别相应的正常组织。3. 权利要求l所述的单克隆抗体，其由保藏编号为CGMCCNo.2643的杂交瘤细胞系分泌。4. 权利要求1-3任一项所述的单克隆抗体，其重链可变区氨基酸序列如 SEQIDNO: 1所显示，其轻链氨基酸序列如SEQIDNO: 2所显示。5. —种基因工程抗体，其与权利要求3或，4所述的单克隆抗体具有30% 以上同源序列，其中包括Fab片段，F(ab)，片段，Fd片段，Fv片段和Fc 片段，也包括具有同源序列的各片段相互组合，或利用部分具有同源序列 的各片段与其它...
【专利技术属性】
技术研发人员：阎锡蕴，韩伟，冯静，杨东玲，
申请(专利权)人：中国科学院生物物理研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。