禽流感病毒原位ＰＣＲ检测探针及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种特异性好、敏感性高的禽流感病毒原位ＰＣＲ检测探针及其制备方法。该方法从ＧｅｎｅＢａｎｋ下载禽流感病毒ＮＰ基因序列，通过比对选取ＮＰ基因中较为保守的片断，设计一对引物，通过ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增２７０ｂｐ的目的片段，并分子克隆构建重组质粒测序，测序后证实本研究设计的引物扩增序列与ＡＩＶ各亚型ＮＰ基因具有较高同源性，可达９２％以上，利用地高辛标记扩增产物制备探针。该探针用于间接原位ＲＴ－ＰＣＲ检测方法对细胞内的禽流感病毒进行检测和定位，可特异性的检测禽流感病毒，而新城疫、传染性法氏囊等病毒检测为阴性，具有良好的特异性，探针可以检测到约１ｐｇ／ｕＬ的质粒ＤＮＡ，具有高敏感性。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种禽流感病毒原位ＰＣＲ检测探针，其特征在于，运用ＲＴ－ＰＣＲ法制备所述检测探针的特异性引物序列为ＳＥＱ１，ＳＥＱ２：　　ＳＥＱ１：５’－ＡＡＧＣＧＧＡＧＧＡＡＡＣＡＣＣＡＡＣ－３’；　　ＳＥＱ２：５’－ＡＴＧＴＣＡＡＡＧＧＡＡＧＧＣＡＣＧＡＴ－３’。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨素，陈博文，沙才华，廖明，徐海聂，廖秀云，
申请(专利权)人：中华人民共和国珠海出入境检验检疫局，
类型：发明
国别省市：44[中国|广东]