动脉粥样硬化炎症相关的miRNA的筛选方法技术

本发明专利技术通过选择ｏｘ－ＬＤＬ（３０ｕｇ／ｍｌ）作为刺激因子，刺激人原代单核细胞，诱导其分化成巨噬细胞和泡沫细胞，结合ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ　ａｎａｌｙｓｉｓ技术，体外检测细胞ｍｉＲＮＡｓ表达的差异，筛选出可能参与动脉粥样硬化炎症反应的ｍｉＲＮＡｓ，然后用ｔａｇｍａｎ探针荧光定量ＰＣＲ验证，并用数据库及计算机软件分析并预测筛选出ｍｉＲＮＡｓ所对应的可能靶ｍＲＮＡ，最大程度筛选出贴近动脉粥样硬化特异性炎症反应病理状态的ｍｉＲＮＡ，进一步完善动脉粥样硬化的形成机制，并为动脉粥样硬化、尤其急性冠脉事件的防治开辟新的治疗靶点和方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及动脉粥样硬化疾病的治疗领域，尤其涉及动脉粥样硬化炎症相关的miRNA的筛选方法。
技术介绍
动脉粥样硬化形成的病理生理机制虽然尚未完全明确，但目前比较公认的 是炎症反应学说。炎症是动脉粥样硬化发生发展的关键因素。国内外研究表明， 参与动脉粥样硬化病理过程的炎症因素很多，其中关键性步骤是单核细胞迁入 内膜下，受局部氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的刺激被激活分化为巨噬细胞， 吞噬了过量ox-LDL的巨噬细胞分化成泡沫细胞，后者不仅是动脉粥样硬化脂质 核心的主要成分，还产生和释放基质金属蛋白酶(MMPs)，促使斑块趋向不稳定 单核源巨噬/泡沬细胞是动脉粥样硬化炎症反应的最主要细胞，ox-LDL则是局部 单核细胞被激活的主要刺激因子。microRNA(miRNA)，是细胞内一类在进化上高度保守、长度约22nt的非编 码RNA基因产物。miRNA来源于细胞内源性转录体(发夹状pre-miRNA)，以单 链形式存在，能与靶mRNA完全配对，介导靶mRNA降解或抑制靶mRNA编码蛋 白质的翻译，从而沉默特定靶基因发挥作用，研究表明miRNA在调节细胞生长、 分化和凋亡等方面都扮本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种动脉粥样硬化炎症相关的ｍｉＲＮＡ的筛选方法，其包含如下步骤：　（１）利用ｏｘ－ＬＤＬ刺激人原代单核细胞，诱导其分化成巨噬细胞和泡沫细胞；　（２）应用ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ　ａｎａｌｙｓｉｓ技术，体外检测细胞ｍｉＲＮＡｓ表达的差 异，筛选出参与动脉粥样硬化炎症反应的ｍｉＲＮＡｓ；　（３）用ｔａｇｍａｎ探针荧光定量ＰＣＲ验证，然后用数据库及计算机软件分析并筛选出ｍｉＲＮＡｓ所对应的靶ｍＲＮＡ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王长谦，陈婷，黄周青，王连升，汪月，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属新华医院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]