一种器官保存液及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种用于人体或动物器官、组织或细胞的保存液。本发明专利技术的器官保存液由枸橼酸钠、枸橼酸钾、硫酸镁、磷酸二氢钠、氢氧化钠、腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸、甘露醇和盐酸川芎嗪等成份组成。本发明专利技术的器官保存液能够用于人体或动物器官的冷却、灌洗和保存，可有效保存人离体肾脏４８小时，动物７２小时，并且能够防止缺血再灌注损伤，有较大的临床应用价值。

Organ preservation solution and preparation method thereof

The present invention relates to a preservative solution for human or animal organs, tissues, or cells. The invention of the organ preservation solution by sodium citrate, potassium citrate, sodium dihydrogen phosphate, sodium hydroxide, Magnesium Sulfate, adenosine, arginine, tryptophan, mannitol, ligustrazine hydrochloride and other components. The invention of the organ preservation solution can be used for human or animal organs cooling, perfusion and preservation, can effectively save the isolated kidney for 48 hours, 72 hours and can prevent the animal, ischemia reperfusion injury, is of great clinical value.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医学、具体涉及一种用于人体或动物器官、组织或细胞的保存液，特别 是一种用于人体或动物器官的保存液。
技术介绍
器官移植是20世纪人类医学科学的重大进展，自20世纪60年代开始在临床应用以 来，移植医学得到了突飞猛进的发展。目前，全世界在肾脏、肝脏、心脏、胰腺和骨髓 移植的领域的移植总数已超过70万例(次)，存活最长的器官移植受者已近半个世纪。器 官移植己成为21世纪医学发展的主要方向之一，是治疗终末期器官衰竭有效的根治手 段。然而，任何临床器官移植首先要有高质量的供体，这是器官移植成功的先决条件和 根本保障，因此，器官的保存在此有着重要意义，它是器官移植学的基石。而器官保存 的根本目的是最大限度减少缺血对离体器官造成的各种损伤，使离体器官保存有效的活 力，以便完成运送、配型和手术，使移植器官在手术后迅速恢复功能。近十多年来，中国器官移植数量已跃居亚洲首位，但临床上除了肾脏保存外，肝、 心和胰腺等器官的保存仍然依赖进口保存液。进口器官保存液价格昂贵，为进行器官移 植的患者增添了繁重的经济负担。作为所有类型肾病发展的最后共同阶段，终末期肾病 (ESRD)是严重威胁人类健康的疾病。据1994年200万城镇人口的统计结果，中国 ESRD的发病率约为568/百万，患病者约60万，近年来病人数以10%以上的速度增长。中国肾移植工作的大规模开展始于上个世纪70年代末80年代初，其重要的推动力 是高渗枸橼酸钾嘌呤(HCA)肾保存液的研制成功。该保存液可有效保存肾脏57小时。 20多年来，该保存液在全国开展器官移植的医疗单位得到广泛应用。在肾移植领域发挥4了重要作用。HCA液处方组成(每 1000ml )及主要技术参数如下K+ 为80mmoL、 Na+为80mmoL、 MgS04为41mmoL、枸橼酸盐为55mmoL、甘露醇为 30.2mmoL、腺苷呤磷酸盐为0.38mmoL、 pH值为7.14、渗透压为380mOsm/L。HCA肾保存液的主要特点有1、渗透压高，防止细胞水肿的作用较强；2、含有 腺苷嘌呤，为细胞提供一定的能量底物3、含有硫酸镁，助于稳定细胞膜4、价格低 廉，公众认同感较高。但是该保存液也有不足之处1、硫酸镁浓度较高，低温下易析出，沉淀于保存液 及肾血管中造成组织伤害；2、不含有效的缓冲对，pH值不稳定，在长时间(24h以上) 保存肾脏时不足以防止细胞酸化；3、含有较多生化制剂，纯度不够。因此，在临床实 际应用中HCA液保存液肾脏达24小时以上时，移植术后肾脏的发生显著升高。1987年Folkert O.Belzer博士领导的美国WISCONSIN大学实验小组成功研制了一 种低温器官保存液，即UW (UNIVERSITY OF WISCONSIN)器官保存液，它提高了单 纯低温灌注法器官保存的效果，可保存胰或肾72小时，肝脏可保存达24小时。UW液 的成份是羟乙基淀粉50g/L、乳酸(内酯)35.83g/L、磷酸二氢钾3.4g/L、硫酸镁 (MgS(V7H20) 1.23g/L、棉子糖17.83g/L、腺嘌呤核苷1.34g/L、别嘌呤醇0.136g/L、 总谷胱甘肽0.922g/L、氢氧化钾5.61g/L、 pH值为7.4、胰岛素40单位、青霉素G20万 单位、地塞米松16mg。虽然UW液已在国际上日益广泛应用，但其配方液存在着如粘 度偏高，因而降温速度慢；钾离子含量过高，使用不当会引起术中心跳骤停，而且价格 非常昂贵，不适合普遍应用。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题在于提供一种使用安全、有效、质量可控，并且高渗、含 有丰富的能量底物，价廉的器官保存液及其制备方法。 本专利技术提供了一种器官保存液。5本专利技术的器官保存液由以下重量配比的成份组成(每1000ml)枸橼酸钠2.0g 50.0g枸橼酸钾.0g 50.0g硫酸镁0.1g 8.0g精氨酸0.02g 4.0g色氨酸0.05g 5.0g盐酸川芎嗪0g 6.0g渗透压调节剂.0g 80.0gpH值缓冲对0.1g 60.0g能量底物0.1g 20.0g本专利技术的器官保存液的pH值为5.0~9.5、渗透压值为320 420mOsm/L。 本专利技术的另一目的是提供了上述器官保存液的制备方法，包括以下步骤1、 浓配分别用适量的注射用水溶解枸橼酸钾、枸橼酸钠、硫酸镁、磷酸二氢钠、 腺嘌呤核苷、精氨酸、色氨酸、甘露醇和氢氧化钠，补加注射用水至总体积的80%，加入 药用炭(总体积的0.05。/。w/v)，充分搅拌，脱炭至澄明液体；2、 稀配向上述浓配液中加入配方量的盐酸川芎嗪，补加注射用水至全量，充分搅拌，将药液径0.45pm滤膜过滤；3、 检验步骤2的稀配液的pH值及渗透压值待检测合格后，将药液经0.2nm滤膜 过滤；4、 灌封将药液上流水线进行灌封；5、 灭菌将灌封好的半成品在灭菌柜中灭菌；设定灭菌条件115°C、 30分钟或 12rC、 15分钟灭菌，灭菌柜进入自控程序，灭菌结束后出柜，得到成品。本专利技术的器官保存液能够用于人体或动物器官的冷却、灌洗和保存，如肾脏，可有 效保存人离体肾脏48小时，动物72小时，并且能够防止缺血再灌注损伤。本专利技术的器官保存液的特点是1、 由于是细胞内液型(高钾低钠)保存液，与细胞内外离子浓度相似，保存期间细 胞内外离子交换减少，能量消耗减少，有利于再灌注时迅速恢复跨膜阳离子梯度和细胞 功能，最主要的是细胞内液型保存液的低Na+将明显减少Na+离子的内流，减少细胞内 Na+离子的聚集，能阻止细胞水肿的发生。2、 配方中所用原料易得，价格便宜。3、 配方中添加了腺嘌呤核苷和色氨酸(L-色氨酸)作为能量(ATP)的底物，为再 灌注损伤的修复和激活能量利用提供条件，为缺氧条件下的细胞提供足够的能量。4、 配方中添加了盐酸川芎嗪，可清除氧自由基，抗脂质过氧化，提高SOD活性， 抑制血小板聚集和活化以及维持TXA2/PGI2的平衡作用，因此具有突出的抗血再灌注 损伤的作用。药理研究证明，盐酸川芎嗪还具有扩张小动脉改善微循环和脑血流，产生 抗血栓形式和溶血栓的作用。同时还具有钙拮抗效应，能抑制离体细胞对转离子的摄入， 避免了细胞内钙超载引起的细胞损伤。5、 配方中添加了精氨酸(L-精氨酸)，精氨酸是体内NO的生成底物，在NO合成 酶(NOS)及其辅助因子作用下，精氨酸N端胍基脱氨氧化成NO，该通路成为L-精 氨酸NO通路。NO是一种脂溶性很强的小分子活性氮自由基，能自由通过细胞膜并 减轻缺血再灌注损伤，并有效组织细胞凋亡。6、 配方中降低了硫酸镁(MgS(V7H20)的浓度，减少其在低温条件下的析出。7、 配方中添加了甘露醇用于调整渗透压，使溶液渗透压值维持在320 420mOsm/L， 可有效防止水肿。8、 配方中添加了磷酸盐缓冲液对，使溶液pH值稳定在5.5 9.5之间，有利于防止 细胞乏氧代谢下迅速酸化导致的细胞损失。9、 本专利技术的器官保存液组分间无配伍禁忌，制备工艺简单，可以经受U5'C、 30 分钟或121'C、 15分钟的高温灭菌，且质量稳定可控、使用方法简单。动物(犬)实验表明本专利技术的器官保存液可有效保存肾脏72小时，对肾脏的保存 质量显著优于HCA液，并与UW液相当。具体实施方式-下面结合实施例对本专利技术作进一步本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种器官保存液，其特征在于该器官保存液由下列重量配比的成分组成：每１０００ｍｌ　枸橼酸钠　２．０ｇ～５０．０ｇ　枸橼酸钾　３．０ｇ～５０．０ｇ　硫酸镁　０．１ｇ～８．０ｇ　精氨酸　０．０２ｇ～４．０ｇ　 　色氨酸　０．０５ｇ～５．０ｇ　盐酸川芎嗪　０ｇ～６．０ｇ　渗透压调节剂　５．０ｇ～８０．０ｇ　ｐＨ值缓冲对　０．１ｇ～６０．０ｇ　能量底物　０．１ｇ～２０．０ｇ。

【技术特征摘要】
1、一种器官保存液，其特征在于该器官保存液由下列重量配比的成分组成每1000ml枸橼酸钠2.0g～50.0g枸橼酸钾3.0g～50.0g硫酸镁 0.1g～8.0g精氨酸 0.02g～4.0g色氨酸 0.05g～5.0g盐酸川芎嗪 0g～6.0g渗透压调节剂5.0g～80.0gpH值缓冲对 0.1g～60.0g能量底物0.1g～20.0g。2、 根据权利要求1所述的器官保存液，其特征在于所述的渗透压调节剂选自甘露醇或山梨醇；优选甘露醇。3、 根据权利要求1所述的器官保存液，其特征在于所述的pH值缓冲对选自磷酸二氢 钠/磷酸氢二钠、磷酸二氢钾/磷酸氢二钾、磷酸二氢钾/氢氧化钠、磷酸二氢钠/氢氧 化钠或磷酸氢二钠/磷酸二氢钾；优选磷酸二氢钠/氢氧化钠，其中每1000ml含磷酸 二氢钠的量为0.5g 60.0g、氢氧化钠的量为0.05g 50.0g。4、 根据权利要求1所述的器官保存液，其特征在于所述的能...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱有华，甘益民，周庆武，纪标，
申请(专利权)人：扬子江药业集团上海海尼药业有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]