P450BM3突变体及其在黄体酮合成皮甾酮中的应用制造技术

技术编号:41329268 阅读:23 留言:0更新日期:2024-05-13 15:07
本发明专利技术公开了P450BM3突变体及其在黄体酮合成皮甾酮中的应用,属于生物工程领域。本发明专利技术通过将F87A、P25A、P329A、E435D、S72Q、L437G、A330Y和A74F等多个突变引入P450BM3酶,成功筛选获得了突变体P25A/S72Q/A74G/F87A/P329A/A330Y/E435D/L437G,首次实现了皮甾酮的高效羟化转化,在制药和化工领域具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及p450bm3突变体及其在黄体酮合成皮甾酮中的应用,属于生物工程领域。


技术介绍

1、p450bm3是一种来自土壤细菌bacillus megaterium的细胞色素p450酶,已知具有高的催化活性和底物特异性。由于其能够执行多种不同的氧化反应,p450bm3在合成化学和工业生产中受到广泛关注。此外,p450bm3与其它p450酶相比,具有较高的溶解度和表达量,使其在科学研究和工业应用中具有优势。然而,野生型的p450bm3对许多化合物的催化效率不理想。为了提高其催化效率或改变底物特异性,研究人员对p450bm3进行了多次的定向进化和突变设计。

2、黄体酮(progesterone)是一种重要的内分泌激素,主要在女性体内产生,对于维持妊娠和调节月经等生理过程具有关键作用。其化学结构属于固醇酮,它也是许多其他生物活性固醇类激素的前体,因此,在医药合成中具有很高的价值。皮甾酮(cortexolone)是黄体酮的一个衍生物,也属于固醇类化合物。它在生物体中不像黄体酮那样作为主要激素存在,但在医药和生物化学领域具有研究价值。在化学合成工业本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.P450BM3突变体,其特征在于,所述突变体以氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的P450BM3为亲本,在亲本的F87、P25、P329、E435、S72、L437、A330、A74的一个或多个位点突变。

2.根据权利要求1所述的P450BM3突变体,其特征在于,所述突变体是在亲本的基础上,进行突变,所述突变包括(a)~(l)所示任一:

3.编码权利要求1或2所述P450BM3突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的表达载体。

5.表达权利要求1或2所述突变体,或含有权利要求3所述基因的微生物细胞。

<p>6.一种重组大肠...

【技术特征摘要】

1.p450bm3突变体,其特征在于,所述突变体以氨基酸序列如seq id no.2所示的p450bm3为亲本,在亲本的f87、p25、p329、e435、s72、l437、a330、a74的一个或多个位点突变。

2.根据权利要求1所述的p450bm3突变体,其特征在于,所述突变体是在亲本的基础上,进行突变,所述突变包括(a)~(l)所示任一:

3.编码权利要求1或2所述p450bm3突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的表达载体。

5.表达权利要求1或2所述突变体,或含有权利要求3所述基因的微生物细胞。

6.一种重组大肠杆菌,其特征在于,以e.coli bl21(de3)为宿主,以pet28a-1为表达载体,表达seq id no.3所...

【专利技术属性】
技术研发人员:周景文刘喜荣陈启航晁子凯曾伟主徐沙陈坚孟浩
申请(专利权)人:湖南新合新生物医药有限公司
类型:发明
国别省市:

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