提高克拉维酸发酵水平的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高克拉维酸生产菌发酵水平并且/或者降低杂质G产量的方法，包括下述步骤：使克拉维酸生产菌过表达一种调控蛋白基因SCLAV_0472，该基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1。本发明专利技术的方法不仅能显著提高克拉维酸的发酵水平，还能降低发酵液中的杂质G含量，具有良好的工业应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，涉及一种提高克拉维酸发酵水平、降低发酵液中杂质g产量的方法。

技术介绍

1、β-内酰胺类抗生素的长期广泛使用导致了大量耐药菌株的产生，而这些耐药菌的主要耐药机制是产生β-内酰胺酶，使β-内酰胺类抗生素降解失活。克拉维酸作为一种广谱β-内酰胺酶抑制剂已广泛应用于临床治疗β-内酰胺类抗生素耐药菌的感染。

2、1971年，克拉维酸(clavulanic acid)首次由higgens和kastner在棒状链霉菌(streptomyces clavuligerus)中发现(international journal of systematicbacteriology,1971,21(4):326-330)，并在后续的研究中被证实是一种不可逆的β-内酰胺酶抑制剂。

3、克拉维酸化学名为(2r,3z,5r)-3-(2-羟基亚乙基)-7-氧代-4-氧杂-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-2-羧酸，cas编号为58001-44-8，分子结构式如下所示：

4、

5、由于巨大的商业价值，自克拉维酸被发现起，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.提高克拉维酸生产菌发酵水平并且/或者降低杂质G产量的方法，包括下述步骤：使克拉维酸生产菌过表达一种调控蛋白基因SCLAV_0472，该基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述克拉维酸生产菌是棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述克拉维酸生产菌是棒状链霉菌工程菌，宿主菌是棒状链霉菌ATCC 27064(Streptomyces clavuligerus ATCC 27064)。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，过表达所述调...

【技术特征摘要】

1.提高克拉维酸生产菌发酵水平并且/或者降低杂质g产量的方法，包括下述步骤：使克拉维酸生产菌过表达一种调控蛋白基因sclav_0472，该基因的核苷酸序列为seq id no:1。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述克拉维酸生产菌是棒状链霉菌(streptomyces clavuligerus)。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述克拉维酸生产菌是棒状链霉菌工程菌，宿主菌是棒状链霉菌atcc 27064(streptomyces clavuligerus atcc 27064)。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，过表达所述调控蛋白基因sclav_0472通过下述方式实施：

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤a或b是通过将包含所述强启动子和所述调控蛋白基因sclav_0472的重组质粒转化入宿主菌中而实现，优选所述强启动子是erme*p、kasop、sp44...

【专利技术属性】
技术研发人员：王金刚，步绪亮，梁岩，彭志杰，刘源，
申请(专利权)人：上海邦林生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：