【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物农业，具体涉及一株马铃薯疮痂病生防细菌耐盐芽胞杆菌菌株zjk-45及其应用。
技术介绍
1、马铃薯疮痂病是一种由致病性链霉菌(streptomyces spp.)引起的世界性的土传兼种传病害，已经基本覆盖我国各大马铃薯主产区[1]。近年来，随着马铃薯种植面积的扩大，再加上田间管理不当，马铃薯疮痂病有蔓延且加重的趋势，严重的田块发病率高达100％[2]。
2、马铃薯疮痂病生物防治的研究已经开展100余年，但目前仍缺少有效的防治措施。由于其病原菌种类繁多，致病性差异大，且病害发生受到多种复杂因素影响，防治较为困难，目前生产中仍以化学防治为主。与化学药剂防治方法相比，而生物防治以一种安全无污染的方式，通过维持生态平衡促进农作物健康，是未来防治土传病害的有效方法之一，因此筛选出有效的马铃薯生防菌株并应用于生产迫在眉睫。目前马铃薯疮痂病生物防治细菌的筛选多采用平板拮抗方法，然而由于马铃薯疮痂病致病链霉菌种类多，致病力差异大，导致一些菌株虽具有病原菌抑制效果，在田间却不一定表现出很好的防治效果。
3、植物根在土壤中与微生物相互作用，根际是土壤微生物最为活跃的区域。与非根际微生物相比，根际微生物表现出更高的丰富度和多样性。根据植物微生态学理论，根际微生物与植物健康密切相关，稳定的根际微生物群落能够提高植物抗病性和环境适应能力，对植物起到间接的保护作用。因此，根际是研究植物与微生物相互作用，特别是挖掘土壤中的关键有益微生物类群的重要区域。
4、芽胞杆菌是一种在土壤中广泛存在的有益细菌，能够抑
5、参考文献
6、[1]李亚宁,赵伟全,刘大群,杨文香,孟庆芳,张立荣,张汀(2007).中国马铃薯疮痂病的调查及其病原菌的鉴定.国家科技成果.
7、[2]张建平,尹玉和,闫任沛,哈斯,林团荣,程玉臣,胡冰(2013).内蒙古马铃薯疮痂病发生与防治途径.中国马铃薯27,56-59.
8、[3]nicholson,w.l.(2002).roles of bacillus endospores in theenvironment.cell mol life sci 59,410-416.
9、[4]shafi,j.,tian,h.,and ji,m.(2017).bacillus species as versatileweapons for plant pathogens:a review.biotechnol biotec eq 31,446-459.
10、[5]radhakrishnan,r.,hashem,a.,andabd allah,e.f.(2017).bacillus:abiological tool for crop improvement through bio-molecular changes inadverse environments.front physiol 8.
11、[6]马佳,李颖,胡栋,彭杰丽,贾楠,张翠绵,王旭,王占武(2018).芽胞杆菌生物防治作用机理与应用研究进展.中国生物防治学报34,639-648.
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一株马铃薯疮痂病生防细菌，以减轻薯片中心变色程度为筛选依据，筛选得到有生防潜力的耐盐芽胞杆菌菌株zjk-45。
2、本专利技术提供了一株耐盐芽胞杆菌(bacillus halotolerans)菌株zjk-45，保藏编号为cgmcc no.29000。
3、本专利技术提供了一种马铃薯疮痂病生防菌剂，包括所述耐盐芽胞杆菌菌株zjk-45和辅料。
4、优选的，所述马铃薯疮痂病生防菌剂的剂型包括以下至少一种：颗粒剂、粉剂和水剂。
5、优选的，所述颗粒剂的制备方法包括以下步骤：将耐盐芽胞杆菌菌株zjk-45的种子液接种至发酵培养基中发酵培养，得到的发酵液与载体混合吸附、制粒得到。
6、本专利技术提供了所述耐盐芽胞杆菌菌株zjk-45或所述耐盐芽胞杆菌菌株zjk-45在制备植物致病菌s.galilaeus的抑菌剂中的应用。
7、本专利技术提供了所述耐盐芽胞杆菌菌株zjk-45或所述耐盐芽胞杆菌菌株zjk-45在防控马铃薯疮痂病中的应用。
8、本专利技术提供了一种马铃薯疮痂病生防菌的筛选方法，包括以下步骤：
9、将土壤进行稀释培养，分离出单菌落，制备待测菌液；
10、将马铃薯疮痂病致病菌孢子悬浮液涂布平板上，在所述平板上打孔，于打孔处接种所述待测菌液，培养，挑选产生较大抑菌圈的待测菌液；
11、将所述挑选的待测菌液滴在置于薯片中央的滤纸上培养，取下滤纸，将马铃薯疮痂病致病菌s.galilaeus菌饼接种于所述薯片的中央，培养；以不滴待测菌液仅接种马铃薯疮痂病致病菌的薯片为对照组；
12、所述薯片在接种马铃薯疮痂病致病菌后产生褐色病斑，测量褐色病斑直径；
13、挑选与所述对照组中褐色病斑直径呈显著性降低的待测菌液进行田间生防能力验证。
14、优选的，所述土壤的稀释倍数包括200～162000倍。
15、优选的，所述待测菌液的制备方法，将分离的单菌落接种至lb液体培养中培养至od600值0.8～1.0。
16、优选的，所述待测菌液在滤纸上的接种量为103～104cfu；
17、所述马铃薯疮痂病致病菌的接种量为108～109cfu/ml。
18、本专利技术提供了一株耐盐芽胞杆菌(bacillus halotolerans)菌株zjk-45，保藏编号为cgmcc no.29000。本专利技术从植物根际土壤中利用马铃薯薯块的筛选方法筛选到一株耐盐芽胞杆菌，经田间生防实验验证，能够有效防治马铃薯疮痂病，并且所述菌株具有良好的田间适应能力和防治效果。
19、本专利技术提供了一种马铃薯疮痂病生防菌的筛选方法。目前马铃薯疮痂病生防细菌的室内筛选，多以平板抑菌效果作为筛选指标。然而田间致病链霉菌种类复杂，平板抑菌结果可能有一定局限性。且田间环境复杂，对生防细菌的适应能力要求较高，具有平板抑菌效果的细菌并不一定有很好的田间防治效果。因此，本专利技术利用活体筛选的方法，能够筛选出适应性更强的生防细菌，且可以更好地保证田间应用效果。同时致病疮痂链霉菌能够产生特定毒素thaxtomins a(ta)，其产生毒素的能力与其致病性密切相关，是引起马铃薯疮痂病症状的决定性因素。疮痂病原菌分泌的致病毒素ta能够使薯块变褐色。因此，利用小薯片是检测马铃薯疮痂病病原菌致病力的有效方法。本专利技术参考疮痂病病本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株耐盐芽胞杆菌(Bacillus halotolerans)菌株ZJK-45，其特征在于，保藏编号为CGMCC No.29000。
2.一种马铃薯疮痂病生防菌剂，其特征在于，包括权利要求1所述耐盐芽胞杆菌菌株ZJK-45和辅料。
3.根据权利要求2所述马铃薯疮痂病生防菌剂，其特征在于，所述马铃薯疮痂病生防菌剂的剂型包括以下至少一种：颗粒剂、粉剂和水剂。
4.根据权利要求3所述马铃薯疮痂病生防菌剂，其特征在于，所述颗粒剂的制备方法包括以下步骤：
5.权利要求1所述耐盐芽胞杆菌菌株ZJK-45或权利要求2～4中任意一项所述耐盐芽胞杆菌菌株ZJK-45在制备植物致病菌S.galilaeus的抑菌剂中的应用。
6.权利要求1所述耐盐芽胞杆菌菌株ZJK-45或权利要求2～4中任意一项所述耐盐芽胞杆菌菌株ZJK-45在防控马铃薯疮痂病中的应用。
7.一种马铃薯疮痂病生防菌的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：
8.根据权利要求7所述筛选方法，其特征在于，所述土壤的稀释倍数包括200～162000倍。p>
9.根据权利要求7所述筛选方法，其特征在于，所述待测菌液的制备方法，将分离的单菌落接种至LB液体培养中培养至OD600值0.8～1.0。
10.根据权利要求7所述筛选方法，其特征在于，所述待测菌液在滤纸上的接种量为103～104CFU；
...【技术特征摘要】
1.一株耐盐芽胞杆菌(bacillus halotolerans)菌株zjk-45，其特征在于，保藏编号为cgmcc no.29000。
2.一种马铃薯疮痂病生防菌剂，其特征在于，包括权利要求1所述耐盐芽胞杆菌菌株zjk-45和辅料。
3.根据权利要求2所述马铃薯疮痂病生防菌剂，其特征在于，所述马铃薯疮痂病生防菌剂的剂型包括以下至少一种：颗粒剂、粉剂和水剂。
4.根据权利要求3所述马铃薯疮痂病生防菌剂，其特征在于，所述颗粒剂的制备方法包括以下步骤：
5.权利要求1所述耐盐芽胞杆菌菌株zjk-45或权利要求2～4中任意一项所述耐盐芽胞杆菌菌株zjk-45在制备植物致病菌s....
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