两段流加式高密度发酵合成聚羟基苯烷酸酯的方法技术

本发明专利技术公开一种两段流加式高密度发酵合成聚羟基苯烷酸酯的方法，方法如下：（１）第一阶段：在发酵培养基中加入含苯有机物，然后接入恶臭假单胞菌种子液进行发酵培养，控制发酵罐转速１５０～８００转／分钟，发酵温度３０±２℃，ｐＨ？７．０±０．３，当溶解氧浓度和ｐＨ值同时迅速上升时流加碳源；（２）第二阶段：当微生物细胞吸光密度达到３０后，调节ｐＨ值，同时实施氮限制和氧限制，当溶解氧浓度和ｐＨ值同时迅速上升时，流加碳源，微生物就会将发酵液中的碳源通过代谢合成转化为聚羟基苯烷酸酯。本发明专利技术具有微生物代谢含苯有机物的速率较高，有机物碳源对细胞生长抑制作用小，从而使得最终得到的细胞浓度和产物浓度都较高的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于发酵工程
，具体涉及一种。
技术介绍
聚羟基烷酸酯具有生物可降解性、生物可再生性、生物相容性以及降解产物无毒 性等优良特性，使得它可以被用作药物缓释载体、外科手术缝合线、人工血管、人工膀胱、人 工心瓣膜等材质及其相关的应用。但所用的聚羟基烷酸酯大多都是聚羟基丁酸或羟基丁酸 与羟基戊酸的共聚物，其中都不含有像苯基这样的功能团。近来，临床医学研究表明含苯 基功能团的有机物苯乙酸和苯丁酸等具有抗肿瘤、镇痛和化学预防治疗等功能。如果将苯 基功能团引入生物高分子聚合材料一一聚羟基烷酸酯中，合成出具有优良物理化学和机 械性能的聚羟基苯烷酸酯，利用它在降解过程中缓慢释放出含苯基功能团的有机酸如苯乙 酸、苯丁酸等的特点，从而使生物可降解医用材料聚羟基烷酸酯在使用过程中具有抗肿瘤、 镇痛等新的医学作用，可为扩大该类生物高分子材料在医学方面的应用奠定良好的基础。 目前，关于利用发酵法合成聚羟基丁酸酯(PHB)的浓度可达到每升140克，合成的 羟基丁酸和羟基戊酸共聚物的浓度能达到每升50 90克左右，国内已经实现了规模化大 生产。但是利用微生物以含苯有机物(如苯戊酸、苯乳酸等)为本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种两段流加式高密度发酵合成聚羟基苯烷酸酯的方法，其特征在于：制备方法如下：　　（１）第一阶段：首先在发酵培养基中加入不大于０．３ｇ／Ｌ的含苯有机物和５～２０ｇ／Ｌ的糖作为碳源，然后接入恶臭假单胞菌种子液于发酵培养基中并在发酵罐中进行发酵培养，控制发酵罐的搅拌转速为１５０～８００转／分钟，以１ｖｖｍ的流量将无菌空气连续通入发酵罐内，并保持溶解氧浓度高于２０％，发酵温度为３０±２℃，并利用氨水调节ｐＨ为７．０±０．３；随时监控发酵过程中碳源的消耗量、溶解氧浓度和ｐＨ值的变化，当溶解氧浓度和ｐＨ值同时迅速上升时流加碳源，以保证微生物生长代谢所需；　　（２）第二阶段：当微生物细胞吸光密度达到３０后，...

【技术特征摘要】
一种两段流加式高密度发酵合成聚羟基苯烷酸酯的方法，其特征在于制备方法如下(1)第一阶段首先在发酵培养基中加入不大于0.3g/L的含苯有机物和5～20g/L的糖作为碳源，然后接入恶臭假单胞菌种子液于发酵培养基中并在发酵罐中进行发酵培养，控制发酵罐的搅拌转速为150～800转/分钟，以1vvm的流量将无菌空气连续通入发酵罐内，并保持溶解氧浓度高于20％，发酵温度为30±2℃，并利用氨水调节pH为7.0±0.3；随时监控发酵过程中碳源的消耗量、溶解氧浓度和pH值的变化，当溶解氧浓度和pH值同时迅速上升时流加碳源，以保证微生物生长代谢所需；(2)第二阶段当微生物细胞吸光密度达到30后，利用不含氮的碱性溶液来调节pH值，并停止补加氨水和其它含氮物质，使发酵液中的氮含量逐渐降低至0.001mol/L，造成发酵液中氮源供给不足实现氮限制；同时，适当降低发酵罐的搅拌转速使发酵液中溶解氧浓度低于10％，使氧的供给速率小于细胞正常生长代谢所需值形成氧限制，从而同时实施氮限制和氧限制，并随时监控溶解氧浓度和pH值的变化，当二者的值同时迅速上升时，流加碳源，微生物就会将发酵液中...

【专利技术属性】
技术研发人员：尚龙安，张艳辉，陈效宁，任红，姜岷，田频源，
申请(专利权)人：浙江大学宁波理工学院，
类型：发明
国别省市：97[中国|宁波]