【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，涉及抗体的制备和使用。
技术介绍
1、cd73又称胞外-5’-核苷酸酶，是通过糖基磷脂酰肌醇(gpi)锚定于质膜的一种糖蛋白，广泛表达于人体内皮细胞、淋巴细胞，有助于将具有免疫激活作用的atp转化为具有免疫抑制作用的腺苷。腺苷作为信号传导分子可由多种受体(包括a1，a2a，a2b及a3)介导其生物学效应，如腺苷与腺苷受体a2ar(adenosine receptor ar)结合可抑制t细胞的免疫作用，进而帮助癌细胞逃逸t细胞的“追杀”。肿瘤细胞也可以表达cd73并释放腺苷，从而降低抗肿瘤活性，除了抑制免疫细胞功能，越来越多的研究表明cd73也可以直接刺激肿瘤细胞增殖，迁移和侵袭，及肿瘤血管生成。由此可见，cd73和其他调节免疫应答的靶点比较，靶向cd73有着“一箭双雕”的优势。
2、临床前研究表明，靶向cd73能够产生良好的抗肿瘤作用，可通过增加t淋巴细胞和肿瘤白细胞总数改变肿瘤免疫微环境，还可减少肿瘤骨髓源性抑制细胞(mdsc)，使有应答大鼠的巨噬细胞朝着活化(抗肿瘤)表型转变。且将cd73阻断治疗与其它免疫分子调节剂联合(如pd-(l)1抗体)可以显著增强如cd73单抗的抗肿瘤效果，这对增强本企业的抗肿瘤产品线也是极具吸引力的选择。
3、对临床肿瘤样本的分析显示，cd73高表达是一种潜在的生物标志物，在多种不同的肿瘤上表达，与多种类型肿瘤的不良预后密切相关，包括乳腺癌、肺癌、卵巢癌、肾癌、胃癌、头颈癌等。另外，pd-1/cd73单抗、放化疗等治疗方案可能引起肿瘤微环境cd7
4、鉴于对靶向疾病(如癌症)的治疗仍有较迫切的改进需求，通过多种机制调控肿瘤进展的方法以及调控cd73活性的方法及相关治疗剂是非常令人期望的。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种抗cd73抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段特异性识别并结合cd73，并且具有预期功能特性，这些特性包括高亲和力结合至cd73并且抑制cd73酶活性的能力。本文所述的抗体可用于抑制肿瘤生长，减少腺苷产生，刺激免疫反应及检测样品中的cd73蛋白。
2、在第一个方面，本专利技术提供抗cd73抗体或其抗原结合片段，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，其中，所述重链可变区包含h cdr1、h cdr2和h cdr3，所述轻链可变区包括l cdr1、l cdr2和l cdr3；
3、所述h cdr1的序列如seq id no:1、seq id no:9或seq id no:17所示，或者所述hcdr1的序列与seq id no:1、seq id no:9或seq id no:17有95％以上，如96％、97％、98％、99％的序列一致性；
4、所述h cdr2的序列如seq id no:2、seq id no:10或seq id no:18所示，或者所述h cdr2的序列与seq id no:2、seq id no:10或seq id no:18有95％以上，如96％、97％、98％、99％的序列一致性；
5、所述h cdr3的序列如seq id no:3、seq id no:11或seq id no:19所示，或者所述h cdr3的序列与seq id no:3、seq id no:11或seq id no:19有95％以上，如96％、97％、98％、99％的序列一致性；
6、所述l cdr1的序列如seq id no:5、seq id no:13或seq id no:21所示，或者所述l cdr1的序列与seq id no:5、seq id no:13或seq id no:21有95％以上，如96％、97％、98％、99％的序列一致性；
7、所述l cdr2的序列如seq id no:6、seq id no:14或seq id no:22所示，或者所述l cdr2的序列与seq id no:6、seq id no:14或seq id no:22有95％以上，如96％、97％、98％、99％的序列一致性；
8、所述l cdr3的序列如seq id no:7、seq id no:15或seq id no:23所示，或者所述l cdr3的序列与seq id no:7、seq id no:15或seq id no:23有95％以上，如96％、97％、98％、99％的序列一致性。
9、在一种实施方案中，所述抗体的重链可变区包含：
10、h cdr1，其氨基酸序列如seq id no:1所示，
11、h cdr2，其氨基酸序列如seq id no:2所示，和
12、h cdr3，其氨基酸序列如seq id no:3所示。
13、在一种实施方案中，所述抗体的重链可变区包含：
14、h cdr1，其氨基酸序列如seq id no:9所示，
15、h cdr2，其氨基酸序列如seq id no:10所示，和
16、h cdr3，其氨基酸序列如seq id no:11所示。
17、在一种实施方案中，所述抗体的重链可变区包含：
18、h cdr1，其氨基酸序列如seq id no:17所示，
19、h cdr2，其氨基酸序列如seq id no:18所示，和
20、h cdr3，其氨基酸序列如seq id no:19所示。
21、在一种实施方案中，所述抗体的轻链可变区包含：
22、l cdr1，其氨基酸序列如seq id no:5所示，
23、l cdr2，其氨基酸序列如seq id no:6所示，和
24、l cdr3，其氨基酸序列如seq id no:7所示。
25、在一种实施方案中，所述抗体的轻链可变区包含：
26、l cdr1，其氨基酸序列如seq id no:13所示，
27、l cdr2，其氨基酸序列如seq id no:14所示，和
28、l cdr3，其氨基酸序列如seq id no:15所示。
29、在一种实施方案中，所述抗体的轻链可变区包含：
30、l cdr1，其氨基酸序列如seq id no:21所示，
31、l cdr2，其氨基酸序列如seq id no:22所示，和
32、l cdr3，其氨基酸序列如seq id no:23所示。
33、在一种实施方案中，所述抗体为a7，其重链可变区包含：
34、h cdr1，其氨基酸序列如seq id no:1所示，
35、h cdr2，其氨基酸序列如seq id no:2所示，和
36、h c本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.抗CD73抗体或其抗原结合片段，包含重链可变区和轻链可变区，其中：
2.根据权利要求1所述的抗CD73抗体或其抗原结合片段，其中，
3.根据权利要求1或2所述的抗CD73抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗CD73抗体或其抗原结合片段包含重链恒定区和轻链恒定区。
4.根据权利要求1-3任一项所述的抗CD73抗体或其抗原结合片段，其中，所述重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:26所示，或与SEQ ID NO:26具有至少85％、至少90％、至少95％或更高的序列一致性；以及，
5.一种核酸分子，包括编码权利要求1-4任一项所述的抗CD73抗体或其抗原结合片段的核苷酸序列区；优选地，所述核苷酸序列区的核苷酸序列包括SEQ ID NO:29、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:35，或者SEQ ID NO:45、SEQID NO:46、SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51；进一
6.一种表达载体，包含权利要求5所述的核酸分子。
7.一种宿主细胞，包含权利要求5所述的核酸分子或权利要求6所述的表达载体。
8.一种药物组合物，包含权利要求1-4任一项所述的抗CD73抗体或其抗原结合片段以及药学上可接受的载体。
9.一种制备权利要求1-4任一项所述的抗CD73抗体或其抗原结合片段的方法，包括：培养权利要求7所述的宿主细胞，及自所述宿主细胞分离所述抗体。
10.权利要求1-4任一项所述的抗CD73抗体或其抗原结合片段或者权利要求8所述的药物组合物在制备用于治疗肿瘤性疾病的药物中的应用；优选地，所述的肿瘤性疾病为CD73阳性肿瘤；优选地，所述CD73阳性肿瘤为肺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫体癌、前列腺癌、肛区癌、睾丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌、阴道癌、阴户癌、何杰金病、非何杰金氏淋巴瘤、食道癌、鼻咽癌、喉癌、胰腺癌、结肠癌、直肠癌、肾癌、膀胱癌、乳腺癌、生殖细胞癌、骨癌、肝癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、皮肤癌、中枢神经系统新生物、淋巴瘤、恶性血液病、头颈癌、胶质瘤、黑色素瘤、骨髓瘤、胃癌、肉瘤及病毒相关的癌症。
...【技术特征摘要】
1.抗cd73抗体或其抗原结合片段，包含重链可变区和轻链可变区，其中：
2.根据权利要求1所述的抗cd73抗体或其抗原结合片段，其中，
3.根据权利要求1或2所述的抗cd73抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗cd73抗体或其抗原结合片段包含重链恒定区和轻链恒定区。
4.根据权利要求1-3任一项所述的抗cd73抗体或其抗原结合片段，其中，所述重链恒定区的氨基酸序列如seq id no:26所示，或与seq id no:26具有至少85％、至少90％、至少95％或更高的序列一致性；以及，
5.一种核酸分子，包括编码权利要求1-4任一项所述的抗cd73抗体或其抗原结合片段的核苷酸序列区；优选地，所述核苷酸序列区的核苷酸序列包括seq id no:29、seq id no:30、seq id no:31和seq id no:33、seq id no:34、seq id no:35，或者seq id no:45、seqid no:46、seq id no:47和seq id no:49、seq id no:50、seq id no:51；进一步优选地，所述核苷酸序列区的核苷酸序列包括seq id no:32和seq id no:3...
【专利技术属性】
技术研发人员：王海彬，周雅琼，高栋，
申请(专利权)人：海正生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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