一种高效液相色谱－荧光法同时测定血清色氨酸和酪氨酸的方法技术

本发明专利技术涉及一种高效液相色谱－荧光法同时测定血清色氨酸和酪氨酸的方法，本方法包括以下步骤：采用ＭｅｇｒｅｓＣ１８柱２５０ｍｍ×４．６ｍｍｉ．ｄ．，５μｍ色谱柱；１０％（ｖ／ｖ）乙腈作为色谱流动相；流速为１．２ｍｌ／ｍｉｎ；荧光检测波长：０－５ｍｉｎ激发光波长２２８ｎｍ，发射光波长为３０６ｎｍ；５ｍｉｎ后激发光波长２８５ｎｍ，发射光波长为３５３ｎｍ；进样量：２０μｌ；室温下测定。本发明专利技术方法简单快速、准确、灵敏度高、可行性高，能满足临床血清样本的检测要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分析化学领域，涉及一种高效液相色谱-荧光法同时测定血清色氨酸和酪氨酸的方法。
技术介绍
目前国内外报道的检测Tyr和Trp的方法较多，包括高效液相色谱法(HPLC)、高效 毛细管电泳法(HPCE)、质谱法(MS)等。HPCE分析时间较短，分离能力较强，但检测限(紫 外吸收检测器)不及HPLC，且重复性较差；质谱技术亦有操作复杂、重复性较差的不足之 处；相对来说，HPLC应用较广泛。色氨酸(Trp)和酪氨酸(Tyr)具有吲哚结构，自身能产 生荧光，故可采用荧光法检测。国内外已有采用HPLC-荧光法(HPLC-FD)或HPLC-紫外法 (HPLC-UV)分别单独检测血清中Tyr和Trp的报道，有采用HPLC-UV同时测定Tyr和Trp 的报道，也有采用高效液相色谱法测定脑脊液中Tyr和Trp含量的报道，但目前尚未有采用 HPLC-FD同时测定血清中的Tyr和Trp的报道。近来，Sanchez-Machado等用HPLC-FD同时 测定虾废料中的Tyr和Trp含量，但是线性范围窄，虽能满足虾废料中氨基酸的检测需要， 但不能满足临床血清样本的检测要求。专利
技术实现思路
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【技术保护点】
一种高效液相色谱－荧光法同时测定血清色氨酸和酪氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：ａ、采用ＭｅｇｒｅｓＣ１８柱２５０ｍｍ×４．６ｍｍｉ．ｄ．，５μｍ色谱柱；ｂ、流动相：１０％（ｖ／ｖ）乙腈；ｃ、流速为１．２ｍｌ／ｍｉｎ，进样量：２０μｌ，室温下测定；ｄ、荧光检测波长设定为：０－５ｍｉｎ激发光波长２２８ｎｍ，发射光波长为３０６ｎｍ，５ｍｉｎ后激发光波长２８５ｎｍ，发射光波长为３５３ｎｍ。

【技术特征摘要】
一种高效液相色谱-荧光法同时测定血清色氨酸和酪氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤a、采用Megres C18柱250mm×4.6mm i.d.，5μm色谱柱；b、流动相10％(v/v)乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐爱国，任亚萍，项忠元，周前选，
申请(专利权)人：中南大学湘雅二医院，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]