本发明专利技术属分析化学领域，本发明专利技术公开了一种用液相色谱法分离测定盐酸乐卡地平中间体2,6-Dimethy-4-(3-nitro-pheny)-1,4-dihydro-pyridine-3,5-dimethyl ester及其有关物质的方法，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的缓冲盐溶液-有机相为流动相，可以定量测定盐酸乐卡地平中间体及其有关物质的含量，从而有效控制盐酸乐卡地平中间体的质量，保证盐酸乐卡地平的质量可控。本发明专利技术方法专属性强，准确度高，操作简便。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析化学领域，具体涉及液相色谱法分离测定盐酸乐卡地平中间体及 其有关物质的方法。
技术介绍
盐酸乐卡地平为钙离子通道阻断剂，临床上用于治疗变异性心绞痛、不稳定性心 绞痛、慢性稳定性心绞痛；另外，它还可以单独或与其他降压药合用、用于高血压的治疗。盐 酸乐卡地平中间体化学名为 2, 6-Dimethy-4-(3_nitr〇-pheny)-l，4-dihydr〇-pyridine_3， 5-dimethyl ester分子式为C17H18N2O6。盐酸乐卡地平中间体结构式为： 在合成该化合物的过程中，有些重要的中间体可能会由于去除不完全，造成副 反应的发生，从而影响药物的纯度和质量。对于盐酸乐卡地平中间体2，6 -D i m e t h y - 4 -( 3_nitr〇-pheny)-l，4-dihydr〇-pyridine-3, 5-dimethyl ester，主要控制的有关物质为 3-Nitrol-benzaldehyde，结构式为： 盐酸乐卡地平中间体中的杂质去除不完全，将会引入到原料药终产品，从而影响 药物的纯度和质量。因此，实现盐酸乐卡地平中间体及其有关物质的分离和定量测定，在盐 酸乐卡地平的生产及其质量控制方面具有重要的现实意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种分析盐酸乐卡地平中间体有关物质的方法，从而实现 盐酸乐卡地平中间体与其有关物质的分离和测定，实现盐酸乐卡地平的质量控制。 本专利技术所述的用液相色谱法分析盐酸乐卡地平中间体化学纯度的方法，是采用 十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的缓冲盐溶液-有机相为流动相。 上述所说的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，选自Kromasil、Apollo和 Alltima等品牌的色谱柱。 上述所说的有机相选自以下化合物：甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇，优选乙腈。 上述所说的方法，其流动相缓冲盐溶液-有机相采用等度洗脱。 上述所说的方法中，缓冲盐溶液选自磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、高氯酸盐，优选高氯 酸盐。 其中缓冲盐溶液的浓度为0· 01~0· lmol/L，优选浓度为0· 02mol/L〇 本专利技术所述的分离测定方法，可按照以下方法实现： 1)取盐酸乐卡地平中间体样品适量，用乙腈或流动相溶解样品，配制成每ImL含 盐酸乐卡地平中间体及其有关物质〇. 1~I. 5mg的样品溶液。 2)设置流动相流速为0. 5~I. 5mL/min，流动相流速优选1.0 mL/min，检测波长为 205~280nm，最佳检测波长为210nm，柱温箱温度为10~25°C，柱温箱温度最佳为25°C。 3)取1)的样品溶液10~50 μ L，注入液相色谱仪，完成盐酸乐卡地平中间体与有 关物质的分离测定。其中： 高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本专利技术采用的色谱仪为岛津高效液相色谱 仪： LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-lOASvp 色谱柱：C18 (Kromasi 1，250 X 4. 6mm，5 μ m) 流动相：0· 02mol/L高氯酸钠缓冲溶液（pH 5· 5)-甲醇（55 :45) 流速：1. OmT,/mi η 检测波长：2IOnm 柱温：25°C 进样体积：10 μ L 本专利技术采用Cls(Kromasil，250X4. 6mm，5 μπι)，能够有效的分离盐酸乐卡地平中 间体及其有关物质。本专利技术解决了盐酸乐卡地平中间体及其有关物质的分离测定问题，从 而确保了盐酸乐卡地平中间体的质量，实现盐酸乐卡地平原料药的质量可控（结果见附图 1 ~6) 〇【附图说明】 图1为实施例1时的盐酸乐卡地平中间体及其有关物质HPLC图； 图2为实施例1时的盐酸乐卡地平中间体HPLC图； 图3为实施例1时溶剂HPLC图 图4为实施例2时的盐酸乐卡地平中间体及其有关物质HPLC图； 图5为实施例2时的盐酸乐卡地平中间体的HPLC图； 图6为实施例2时的溶剂HPLC图；【具体实施方式】： 以下实施例用于进一步理解本专利技术，但不限于本实施的范围。 实施例1 仪器与条件 高效液相色谱仪：岛津：LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CT0-10ASvp ; 色谱柱：C18 (Kromasil，250 X 4. 6mm，5 μ m); 流动相：0· 02mol/L高氯酸钠缓冲溶液（pH 5· 5)-甲醇（55 :45); 流速：1. OmT,/mi η 检测波长：2IOnm 柱温：25°C 进样体积：10 μ L。 实验步骤 取盐酸乐卡地平中间体及其有关物质适量，分别用乙腈溶解样品，配制成含盐酸 乐卡地平中间体及其有关物质约1.0mg/mL的样品溶液。取上述盐酸乐卡地平中间体及其 有关物质溶液适量，配制成系统适用性溶液；按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱 图。结果见附图1~3,图1中保留时间为22. 956min的色谱峰为盐酸乐卡地平中间体，其 余色谱峰为盐酸乐卡地平中间体有关物质的色谱峰，其中保留时间为8. 927min的色谱峰 为有关物质；图2中保留时间为22. 627min的色谱峰为盐酸乐卡地平中间体； 图3为实施例1时空白溶剂色谱图。 实施例2 仪器与条件 高效液相色谱仪：岛津：LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-lOASvp ; 色谱柱：C18 (Kromasil，250 X 4. 6mm，5 μ m); 流动相：0· 02mol/L高氯酸钠缓冲溶液（pH 5· 5)-甲醇（57 :43); 流速：1. OmT,/mi η 检测波长：2IOnm 柱温：25°C 进样体积：10 μ L。 实验步骤 取盐酸乐卡地平中间体及其有关物质适量，分别用乙腈溶解样品，配制成含盐酸 乐卡地平中间体及其有关物质约1.0mg/mL的样品溶液。取上述盐酸乐卡地平中间体及其 有关物质溶液适量，配制成系统适用性溶液；按上述条件进行高效液相色谱分析，记录色谱 图。结果见附图4~6,图4中保留时间为30. 146min的色谱峰为盐酸乐卡地平中间体，其 余色谱峰为盐酸乐卡地平中间体有关物质的色谱峰，其中保留时间为10. 224的色谱峰为 有关物质；图5中保留时间为30. 124min的色谱峰为盐酸乐卡地平中间体；图6为空白溶剂 色谱图。 溶液稳定性 取盐酸乐卡地平中间体及其有关物质的供试液，采用实施例1中的方法，分别于 0、2、4、6、8、10、12、24小时进样，考察样品定量测定时溶液的稳定性，由结果可见，本溶液在 24小时内稳定。 耐用性 由于上述确定的色谱条件为等度洗脱，并确定了相应的流速、柱温、流动相pH和 色谱柱型号，故将这些条件作相应的微调，考察色谱条件的耐用性。 流速变化在±0. lmL/min范围内，盐酸乐卡地平中间体其有关物质的峰形没有变 化，但保留时间有相应的前移和后移；柱温变化在±5°C范围内，各物质的峰形和保留时间 均无较大变化；流动相的pH变化在± 0. 2范围内，各物质的峰形和保留时间也无较大变 化；色谱柱的耐用性考察中，各物质保留时间和分离度无明显变化，各物质色谱峰纯度和分 离度均符合要求。【主权项】1. 一种液相色谱法分离测定本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种液相色谱法分离测定盐酸乐卡地平中间体有关物质的方法，其特征在于：十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的缓冲盐溶液‑有机相为流动相。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：牟立燕，刘秋叶，
申请(专利权)人：北京万全德众医药生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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