【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于食品检测的，具体涉及一种食品中酚丁双环丙甲酸酯的测定方法，还涉及上述测定方法在检测具有减肥功能的保健食品中的应用。
技术介绍
1、随着我国经济的不断发展，人们生活水平不断提高，人们对自身外形以及健康情况的关注度也逐渐提高，对宣称具有减肥作用的保健食品的关注度日益增大。市售常见的“减肥食品”包括宣传0脂肪0糖的低热量食品、宣传可以促进脂肪燃烧的减肥咖啡和巧克力、宣传可以排毒排脂的酵素糖果和蜜饯等。这些产品大多宣传每天吃一点，即可不运动、不节食达到减肥目的，部分产品亦有消费者评论说效果很好，每天吃一颗即可达到促进排便与减肥的效果。
2、然而，其中部分减肥食品往往是通过添加具有致泻作用的药物起到的上述效果。食品中常见的非法添加泻药主要有蒽醌类和二苯甲烷类，前者有大黄酚、大黄素和番泻苷等；后者有酚酞、双酚沙丁、酚丁、匹可硫酸钠、脱乙酰比沙可啶、比沙可啶、双酚沙丁醋酸酯、双醋酚丁和双丙酚丁等。双醋酚丁和双丙酚丁可在肠道中水解释放酚丁，刺激肠道从而产生腹泻作用，有文献报道双醋酚丁具有一定的肝毒性，长期服用会导致肝损伤。
3、随着国家对食品非法添加药品的打击力度越来越大，食品中非法添加药物的手段也变的越来越隐蔽，如添加一些经过结构修饰的药品，从而逃脱常规的检测。新型非法添加物酚丁双环丙甲酸酯，是将双醋酚丁中乙酰基替换为环丙甲酸酰基得到的，这种经过结构修饰的物质更具有隐蔽性。
4、现阶段，对于酚酞、匹可硫酸钠、比沙可啶、双醋酚丁、双酚沙丁和双酚沙丁醋酸酯的检测已有文献报道，使用较多的是高效液相色
5、基于此，制定一套前处理操作简单、特异性强、灵敏度更高的测定食品中酚丁双环丙甲酸酯的方法，不仅可以为有效打击食品中非法添加酚丁双环丙甲酸酯等违法行为提供有力的技术支撑，而且对净化行业环境、助力行业高质量发展具有积极意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的之一在于提供一种前处理操作简单、特异性强、灵敏度更高的食品中酚丁双环丙甲酸酯的测定方法。
2、本专利技术的目的之二在于提供一种食品中酚丁双环丙甲酸酯的测定方法在检测具有减肥功能的保健食品中的应用。
3、本专利技术实现目的之一采用的技术方案是：提供一种食品中酚丁双环丙甲酸酯的测定方法，包括以下步骤：
4、s1、待测食品经前处理得到样品；
5、s2、将样品溶解于提取液中，进行目标物提取，而后补充提取液定容，得到样液；样液经固液分离得到上清液，上清液经微孔滤膜过滤，得到滤液；所述提取液中，含甲醇75vol％～85vol％，甲酸0.05vol％～0.2vol％，其余为水；
6、s3、采用液相色谱串联质谱法对所述滤液所含酚丁双环丙甲酸酯进行分析测试；液相色谱的条件包括：采用waters t3色谱柱，流动相采用甲酸水溶液与乙腈的混合物；所述甲酸水溶液中，含甲酸0.05vol％～0.2vol％，还添加有4～6mmol/l的乙酸铵；采用梯度洗脱的方式进行洗脱。
7、在本专利技术中，针对食品基质复杂(含有各种影响提取效率和产生基质效应的成分，如脂类、糖类、蛋白质和矿物质等)、干扰因素多、常规检测方法无法有效检出酚丁双环丙甲酸酯的问题，提供了一种前处理操作简单、特异性强、灵敏度更高、分析速度快的测定方法：
8、一方面，本专利技术对提取液进行了优化改进。现阶段，大部分的非法添加检测方法采用50％的甲醇水溶液或者100％甲醇进行提取。其中，50％甲醇水溶液极性偏大，导致提取液中存在大量水溶性物质易对色谱柱及仪器造成污染，且可能对目标物酚丁双环丙甲酸酯(酯类极性偏小)提取效果不佳，而纯甲醇提取对于固体样品又存在提取不充分、不能完全浸润样品的问题。同时，酚丁双环丙甲酸酯在碱性条件下不稳定会发生水解反应，本专利技术经过大量的研究和探索对提取液成分进行优化，最终采用了75vol％～85vol％甲醇水溶液(添加0.05vol％～0.2vol％甲酸)作为提取液。其中，甲酸的添加能够确保样品基质溶液保持中性至弱酸性，保护目标物稳定存在，进而实现目标物高效、准确的提取。优选地，所述提取液中，含甲醇80vol％，甲酸0.1vol％。
9、另一方面，在液相色谱条件上，本专利技术对色谱柱的种类进行了筛选，通过比较五氟苯基柱(pfp)、常用的c18色谱柱的分离效果，最终选择了修饰的c18色谱柱(waters t3)。经对比，waters t3色谱柱对于目标物酚丁双环丙甲酸酯的检测具有显著的优势，具体表现为噪音更低、有效分离复杂基质与目标物且峰形尖锐对称等方面。进一步地，在流动相的选择上，本专利技术采用0.05vol％～0.2vol％的甲酸水溶液(添加有4～6mmol/l的乙酸铵)与乙腈的混合物，4～6mmol/l的乙酸铵的添加能够使目标物获得更好的峰型和分离度，再结合梯度洗脱的方式，最大限度降低基质效应。优选地，乙酸铵的添加量为5mmol/l。
10、进一步地，步骤s1中，当待测食品为凝胶糖果或果冻时，先将待测食品搅碎至浆状，再利用甲酸加热溶解，得到含样品的溶液。该操作主要是考虑到这类样品基质易成团包裹目标物而影响提取效率，需要先对样品进行充分的溶解。优选地，将搅碎后的凝胶糖果或果冻按照1:(5～10)g/ml的加入量，加入到0.05vol％～0.2vol％的甲酸水溶液中，于70～90℃条件下加热至充分溶解，得到含样品的溶液，再进行后续的提取、净化和提纯等操作。
11、进一步地，对于其他类型的食品，如压片糖果、固体饮料、饼干、代用茶等采用直接粉碎的方式获得样品；蜜饯类食品通过剪碎得到尺寸小于2mm的样品。
12、进一步地，步骤s2中，样品与提取液的质量体积比为1:(30～40)g/ml。
13、进一步地，步骤s2中，目标物提取采用超声处理的方式进行，超声处理的功率为400～600w，超声处理的时间为10～20min。
14、进一步地，步骤s2中，固液分离采用高速离心的方式进行，离心的转速为3000～5000r/min，离心的时间为4～6min。
15、进一步地，步骤s2中，所述微孔滤膜采用孔径为0.22μm的有机微孔滤膜。
16、进一步地，在步骤s3之前，还包括配制酚丁双环丙甲酸酯的浓度为1～50ng/ml的标准工作液，将所述标准工作溶液采用液相色谱串联质谱法进行测定，得到酚丁双环丙甲酸酯的标准曲线。
17、所述标准工作液的配制方法包括以下步骤：
18、(1)配制标准储备溶液和标准中间溶液：准确称取酚丁双环丙甲酸酯10mg(精本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种食品中酚丁双环丙甲酸酯的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤S1中，当待测食品为凝胶糖果或果冻时，先将待测食品充分搅碎至浆状，再利用甲酸水溶液对其加热溶解，得到含样品的溶液。
3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤S2中，样品与提取液的质量体积比为1:(30～40)g/mL。
4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤S2中，目标物提取采用超声处理的方式进行，超声处理的功率为400～600W，超声处理的时间为10～20min。
5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤S2中，固液分离采用高速离心的方式进行，离心的转速为3000～5000r/min，离心的时间为4～6min。
6.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤S2中，所述微孔滤膜采用孔径为0.22μm的有机微孔滤膜。
7.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，在步骤S3之前，还包括配制酚丁双环丙甲酸酯的浓度为1～50ng/mL的标准工作液，将所述标准工
8.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤S3中，液相色谱条件还包括：柱温：35～45℃；进样体积为1～1.5μL；进样流速：0.25～0.4mL/min。
9.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤S3中，质谱的条件包括：电喷雾离子源；检测方式：多反应监测；扫描方式：正离子模式扫描；气帘气：30～45psi；喷雾气GS1：45～55psi；干燥气GS2：45～55psi；IS电压：4500～5500V；离子源温度：450～550℃；碰撞气：氮气。
10.一种根据权利要求1-9中任一项所述的测定方法在检测具有减肥功能的保健食品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种食品中酚丁双环丙甲酸酯的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤s1中，当待测食品为凝胶糖果或果冻时，先将待测食品充分搅碎至浆状，再利用甲酸水溶液对其加热溶解，得到含样品的溶液。
3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤s2中，样品与提取液的质量体积比为1:(30～40)g/ml。
4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤s2中，目标物提取采用超声处理的方式进行，超声处理的功率为400～600w，超声处理的时间为10～20min。
5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤s2中，固液分离采用高速离心的方式进行，离心的转速为3000～5000r/min，离心的时间为4～6min。
6.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤s2中，所述微孔滤膜采用孔径为0.22μm的有机...
【专利技术属性】
技术研发人员：江小明，管卓龙，卢跃鹏，杨永，邱肖依，许晴，侯靖，毛燕妮，伊鋆，涂凤琴，
申请(专利权)人：武汉食品化妆品检验所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。