【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及生物技术和医药领域，特别涉及特异性结合cd47和pd-l1的双特异性抗体。本专利技术进一步涉及编码所述双特异性抗体的核酸、表达载体、用于产生所述双特异性抗体的宿主细胞和用于产生所述细胞的方法、包含根据本专利技术的双特异性抗体的药物组合物、包含根据本专利技术的双特异性抗体和其它治疗活性化合物的药物组合物、用于治疗由cd47和pd-l1介导的疾病或病症的方法、双特异性抗体或其药物组合物用于治疗由cd47和pd-l1介导的疾病或病症的用途、和根据本专利技术的双特异性抗体和其它治疗活性化合物用于治疗由cd47和pd-l1介导的疾病或病症的用途。
技术介绍
1、嵌合、人源化或全人分子形式的单克隆抗体已被证实可用作治疗许多病症和疾病的有效药物。
2、天然存在的人抗体分子由两个重链同型二聚体组成，其各自与两个相同的轻链分子合作形成异二聚体。完整分子形式的常规单克隆抗体由重链和轻链的二价(″双臂″)异二聚体组成。
3、疾病通常由于若干病理导致，并伴有许多共存疾病。双特异性抗体能够以每个抗体分子结合并从而中和两个不同的抗原。与单克隆抗体相比，医药产品的治疗性质(以及价值)的显著改进潜力已使双特异性抗体成为活跃的研究领域。在过去的二十年里，文献已经描述了关于改造形式的双特异性抗体的许多方案，如brinkmann，u和re kontermann，2017，the making of bispecific antibodies，mabs；209 feb/mar；9(2)：182-212，doi：10.1080/19
4、pd-1和通过与pd-1相互作用来传导信号的其它分子，例如pd-l1和pd-l2的治疗性靶向已受到强烈关注。已提议抑制pd-l1信号作为手段来增加t细胞免疫(例如，抗肿瘤免疫)以治疗癌症和感染，包括急性和慢性感染二者。阻断pd-l1/pd-1相互作用的抑制剂，例如从专利申请wo2004004771、wo2006121168、wo2007005874、wo2008156712、wo2010036959、wo2010077634和wo2011066389是已知的。
5、已在许多疾病和病症中观察到cd47表达和/或活性。因此，对于靶向cd47的疗法存在需要。
6、抑制cd47和sirpα配体之间的相互作用的抗体已经在以下专利申请中描述：wo2014123580、wo2013119714、wo2015191861、wo2011143624、wo2014093678、wo2017053423。
7、具有不同形式的第一和第二抗原结合位点的特异性结合cd47和pd-l1的双特异性抗体从专利申请ea201791961(wo2019068302)是已知的。
8、迄今为止，世界上不存在特异性结合cd47和pd-l1并且为治疗用途而被批准的双特异性抗体。结合上述内容，产生特异性结合cd47和pd-l1并具有高的靶标亲和力，良好的胶体、热和聚集稳定性价值的新颖双特异性抗体是有重大意义的。
9、专利技术描述
10、本专利技术的作者令人惊讶地发现，与特异性结合cd47和pd-l1并具有不同形式的第一和第二抗原结合片段，例如fab和scfv形式的双特异性抗体相比，特异性结合cd47和pd-l1并在第一和第二抗原结合片段内具有共同(相同)轻链的双特异性抗体具有更高的胶体、热和聚集稳定性。特异性结合cd47和pd-l1并在第一和第二抗原结合片段内具有共同轻链的双特异性抗体具有高的靶标亲和力。
11、双特异性抗体的第一和第二抗原结合部分中共同(相同)轻链的使用已描述于vanblarcom t et al.，productive common light chain libraries yield diverse panelsof high affinity bispecific antibodies，mabs.2018 feb/mar；10(2)：256-268.doi：10.1080/19420862.2017.1406570。这种形式的双特异性抗体有可能为产生双特异性抗体而解决两个不同的轻链与它们的同源重链不正确配对的紧迫问题。
技术实现思路
1、在一个方面，本专利技术涉及分离的双特异性抗体，其特异性结合cd47和pd-l1并包括：
2、1)第一抗原结合片段，其特异性结合cd47并包括：
3、(a)重链可变结构域，其包含：
4、(i)具有seq id no：1的氨基酸序列的cdr1，
5、(ii)具有seq id no：2的氨基酸序列的cdr2，
6、(iii)具有seq id no：3的氨基酸序列的cdr3；和
7、(b)共同的轻链可变结构域，其包含：
8、(i)具有seq id no：4的氨基酸序列的cdr1，
9、(ii)具有seq id no：5的氨基酸序列的cdr2，
10、(iii)具有seq id no：6的氨基酸序列的cdr3；
11、2)第二抗原结合片段，其特异性结合pd-l1并包括：
12、(a)重链可变结构域，其包含：
13、(i)具有seq id no：7的氨基酸序列的cdr1，
14、(ii)具有seq id no：8的氨基酸序列的cdr2，
15、(iii)具有seq id no：9的氨基酸序列的cdr3；和
16、(b)共同的轻链可变结构域，其包含：
17、(i)具有seq id no：4的氨基酸序列的cdr1，
18、(ii)具有seq id no：5的氨基酸序列的cdr2，
19、(iii)具有seq id no：6的氨基酸序列的cdr3。
20、在本专利技术的一些实施方案中，分离的双特异性抗体的特征在于特异性结合cd47的第一抗原结合片段是与fc片段单体结合的fab。
21、在本专利技术的一些实施方案中，分离的双特异性抗体的特征在于特异性结合pd-l1的第二抗原结合片段是与fc片段单体结合的fab。
22、在本专利技术的一些实施方案中，分离的双特异性抗体的特征在于抗体是全长igg抗体。
23、在本专利技术的一些实施方案中，分离的双特异性抗体是具有人igg1、igg2、igg3或igg4同种型的全长igg抗体。
24、在本专利技术的一些实施方案中，分离的双特异性抗体是具有人igg1同种型的全长igg抗体。
25、在本专利技术的一些实施方案中，分离的双特异性抗体包括特异性结合cd47的第一抗原结合片段的重链可变结构域，其包含seq id no：22的氨基酸序列。
26、在本专利技术的一些实施方案中，分离的双特异性抗体包括特异性结合pd-l1的第二抗原结合片段的重链可变结构域，其包含seq id no：2本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种分离的双特异性抗体，其特异性结合CD47和PD-L1并包括：
2.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其特征在于特异性结合CD47的第一抗原结合片段是与Fc片段单体结合的Fab。
3.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其特征在于特异性结合PD-L1的第二抗原结合片段是与Fc片段单体结合的Fab。
4.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其特征在于所述抗体是全长IgG抗体。
5.根据权利要求4所述的分离的双特异性抗体，其中所述全长IgG抗体具有人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同种型。
6.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其中特异性结合CD47的第一抗原结合片段的重链可变结构域包含SEQ ID NO：22的氨基酸序列。
7.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其中特异性结合PD-L1的第二抗原结合片段的重链可变结构域包含SEQ ID NO：24的氨基酸序列。
8.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其中第一和第二抗原结合片段的共同的轻链的可变结构域包含SE
9.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，
10.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其中特异性结合CD47的第一抗原结合片段的重链包含SEQ ID NO：25的氨基酸序列。
11.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其中特异性结合PD-L1的第二抗原结合片段的重链包含SEQ ID NO：27的氨基酸序列。
12.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其中第一和第二抗原结合片段的共同的轻链包含SEQ ID NO：26的氨基酸序列。
13.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，
14.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其是二价抗体。
15.一种分离的核酸，其编码根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体。
16.根据权利要求15所述的分离的核酸，其中所述核酸是DNA。
17.一种表达载体，其包含根据权利要求15-16中任一项所述的核酸。
18.一种用于产生宿主细胞以产生根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体的方法，包括通过根据权利要求17所述的表达载体转化所述细胞。
19.一种用于产生根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体的宿主细胞，其包含根据权利要求15-16中任一项所述的核酸。
20.一种用于产生根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体的方法，包括在培养基中在足以产生所述抗体的条件下培养根据权利要求19所述的宿主细胞，如果需要的话，接着分离和纯化得到的抗体。
21.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体与一种或多种药学上可接受的赋形剂的组合。
22.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体和至少一种其它治疗活性化合物。
23.根据权利要求22所述的药物组合物，其中所述其它治疗活性化合物是抗体、化学治疗剂、激素治疗剂或其任何组合。
24.根据权利要求23所述的药物组合物，其中所述化学治疗剂选自：多西他赛、紫杉醇、阿霉素、铂剂、卡铂、5-氟尿嘧啶、酪氨酸激酶抑制剂、阿西替尼、脂质体阿霉素、脂质体紫杉醇或其任何组合；其中所述抗体是曲妥珠单抗；其中所述组合是曲妥珠单抗和化学治疗剂，所述化学治疗剂选自多西他赛、紫杉醇、阿霉素、铂剂、卡铂、5-氟尿嘧啶、酪氨酸激酶抑制剂、阿西替尼、脂质体阿霉素、脂质体紫杉醇或其任何组合。
25.一种用于抑制需要此类抑制的受试者中PD-L1和CD47的生物活性的方法，包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体。
26.根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体或根据权利要求22-24中任一项所述的药物组合物，其用于治疗由PD-L1和CD47介导的疾病或病症的用途。
27.用于根据权利要求30所述的用途的根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体或根据权利要求22-24中任一项所述的药物组合物，其中由PD-L1和CD47介导的疾病或病症选自：三阴性乳腺癌(TNBC)、头颈癌(HNC)、胃癌(GC)、食管胃结合部癌、肺腺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、急性骨髓性白血病、骨髓增生异常综合征、高微卫星不稳定性恶性肿瘤、多发性骨髓瘤、卵巢癌、肾细胞癌、膀胱癌、宫颈癌。
28.根据权利要求1-14中任一项所述的双特...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种分离的双特异性抗体，其特异性结合cd47和pd-l1并包括：
2.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其特征在于特异性结合cd47的第一抗原结合片段是与fc片段单体结合的fab。
3.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其特征在于特异性结合pd-l1的第二抗原结合片段是与fc片段单体结合的fab。
4.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其特征在于所述抗体是全长igg抗体。
5.根据权利要求4所述的分离的双特异性抗体，其中所述全长igg抗体具有人igg1、igg2、igg3或igg4同种型。
6.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其中特异性结合cd47的第一抗原结合片段的重链可变结构域包含seq id no：22的氨基酸序列。
7.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其中特异性结合pd-l1的第二抗原结合片段的重链可变结构域包含seq id no：24的氨基酸序列。
8.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其中第一和第二抗原结合片段的共同的轻链的可变结构域包含seq id no：23的氨基酸序列。
9.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，
10.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其中特异性结合cd47的第一抗原结合片段的重链包含seq id no：25的氨基酸序列。
11.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其中特异性结合pd-l1的第二抗原结合片段的重链包含seq id no：27的氨基酸序列。
12.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其中第一和第二抗原结合片段的共同的轻链包含seq id no：26的氨基酸序列。
13.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，
14.根据权利要求1所述的分离的双特异性抗体，其是二价抗体。
15.一种分离的核酸，其编码根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体。
16.根据权利要求15所述的分离的核酸，其中所述核酸是dna。
17.一种表达载体，其包含根据权利要求15-16中任一项所述的核酸。
18.一种用于产生宿主细胞以产生根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体的方法，包括通过根据权利要求17所述的表达载体转化所述细胞。
19.一种用于产生根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体的宿主细胞，其包含根据权利要求15-16中任一项所述的核酸。
20.一种用于产生根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体的方法，包括在培养基中在足以产生所述抗体的条件下培养根据权利要求19所述的宿主细胞，如果需要的话，接着分离和纯化得到的抗体。
21.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体与一种或多种药学上可接受的赋形剂的组合。
22.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-14中任一项所述的双特异性抗体和至少一种其它治疗活性化合物。
23.根据权利要求22所述的药物组合...
【专利技术属性】
技术研发人员：A·K·米索林，A·K·萨比罗夫，A·D·阿扎里安，T·A·沃多皮诺娃，S·A·莱戈茨基，A·A·戈尔迪夫，A·N·多罗宁，V·V·索洛维耶夫，D·V·莫洛佐夫，
申请(专利权)人：拜奥卡德联合股份公司，
类型：发明
国别省市：
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