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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于细胞培养,具体涉及一种用于脐血nk细胞培养的血清替代物。
技术介绍
1、随着免疫治疗技术的飞速发展,以淋巴细胞为基础的各类细胞免疫治疗已成为人们日益关注的焦点。近年来,以自然杀伤细胞(natural killer cell,nk细胞)为基础的癌症治疗领域呈指数级增长,目前已成为免疫治疗创新的主要领域之一。
2、临床上nk细胞治疗的来源主要是外周血和脐血。脐血多是通过血液保存袋进行采集和保存的,抗凝剂的成分是枸橼酸钠类,因每份脐血里面含有20ml左右的枸橼酸钠抗凝剂,在血浆中占比大。在培养nk细胞的过程中,如果在培养基中添加自体灭活血浆会造成前期细胞生长缓慢,后期成团成絮不易分开,导致培养周期中细胞活率低,影响临床效果。
3、目前多采用动物血清替代自体灭活血浆进行培养,添加动物血清细胞虽然细胞生长很好,但会引入动物污染,导致后续的nk细胞应用存在潜在的风险。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种用于脐血nk细胞培养的血清替代物,从而解决使用自体灭活血浆培养的脐血nk细胞生长缓慢,细胞成团成絮不易吹散,细胞存活率低和使用动物血清引入动物源潜在风险等问题。
2、本专利技术首先提供一种用于脐血nk细胞培养的血清替代物,所述血清替代物中的组分及份数配比如下:血小板裂解液50-100份、人血白蛋白150-250份、人重组胰岛素0.1-1份、人转铁蛋白0.1-1份、亚硒酸钠0.1-1份、植物血凝素0.1-1份、葡萄糖酸钙注射液1-5份、氢化可的
3、作为一个实施例的具体记载,所述的血清替代物的组分及份数配比如下:血小板裂解液50份、人血白蛋白150份、人重组胰岛素0.4份、人转铁蛋白0.2份、亚硒酸钠0.2份、植物血凝素0.2份、葡萄糖酸钙注射液2份、氢化可的松注射液0.01份。
4、本专利技术所提供的血清替代物可以替换自体血浆或动物血清来培养脐带血nk细胞。
5、本专利技术再一个方面还提供一种用于培养脐带血nk细胞的培养基,所述的培养基中添加有上述的血清替代物,所述的血清替代物在培养基中的添加浓度为1-5%。
6、本专利技术再一个方面还提供培养脐带血nk细胞的方法,所述的方法是使用上述的培养基进行培养。
7、本专利技术提供了一种用于脐血nk细胞培养的血清替代物,从根本上解决了枸橼酸钠类抗凝剂采集的脐血nk细胞难培养的问题;本专利技术的血清替代物替代脐血自体血浆用于nk细胞的培养,nk细胞生长正常,细胞团均匀,细胞清澈透亮,大细胞团占比少且容易吹散,培养后期细胞活率仍能维持在90%左右,细胞扩增快,两周细胞扩增180倍以上(相对于起始细胞量);本专利技术血清替代物组分中添加了抑制t细胞生长的成分,可以提高nk细胞比例;本专利技术血清替代物无动物源成分,无外源污染;对应成分有临床应用级别,可大规模生产,并用于临床研究。
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1.一种用于脐血NK细胞培养的血清替代物,其特征在于,所述的血清替代物中的组分及份数配比如下:血小板裂解液50-100份、人血白蛋白150-250份、人重组胰岛素0.1-1份、人转铁蛋白0.1-1份、亚硒酸钠0.1-1份、植物血凝素0.1-1份、葡萄糖酸钙注射液1-5份、氢化可的松注射液0.01-1份。
2.如权利要求1所述的血清替代物,其特征在于,所述的血清替代物的组分及份数配比如下:血小板裂解液50份、人血白蛋白150份、人重组胰岛素0.4份、人转铁蛋白0.2份、亚硒酸钠0.2份、植物血凝素0.2份、葡萄糖酸钙注射液2份、氢化可的松注射液0.01份。
3.权利要求1或2所述的血清替代物在替换自体血浆或动物血清来培养脐带血NK细胞中的应用。
4.一种用于培养脐带血NK细胞的培养基,其特征在于,所述的培养基中添加有权利要求1或2所述的血清替代物。
5.如权利要求4所述的培养基,其特征在于,所述的血清替代物在培养基中的添加浓度为1-5%。
6.一种培养脐带血NK细胞的方法,其特征在于,所述的方法是使用权利要求4或5所述的培
...【技术特征摘要】
1.一种用于脐血nk细胞培养的血清替代物,其特征在于,所述的血清替代物中的组分及份数配比如下:血小板裂解液50-100份、人血白蛋白150-250份、人重组胰岛素0.1-1份、人转铁蛋白0.1-1份、亚硒酸钠0.1-1份、植物血凝素0.1-1份、葡萄糖酸钙注射液1-5份、氢化可的松注射液0.01-1份。
2.如权利要求1所述的血清替代物,其特征在于,所述的血清替代物的组分及份数配比如下:血小板裂解液50份、人血白蛋白150份、人重组胰岛素0.4份、人转铁蛋白0.2份、亚硒酸钠0.2份、植...
【专利技术属性】
技术研发人员:葛淑娟,徐矫健,刘燕丽,王玉娟,周琼,
申请(专利权)人:青岛麦迪赛斯医疗技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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