The purpose of this invention is to provide a method for culture of short-term efficient induction and amplification of gamma delta T cells in culture, is the hole with PAN / TCR gamma delta monoclonal antibody coated after the peripheral blood mononuclear cells cultured in the hole, use the add IL medium 2 factor were isolated and cultured. From the cultured 5D, adding chitosan oligosaccharide in culture medium, and cultured in the 9D medium, in addition of zoledronic acid to culture, cultured 15d cells were harvested at. Cultivation method of the invention is through the proliferation of gamma delta T cells TCR PAN gamma / delta monoclonal antibody and factor IL combined with 2, COS, Zol induced from human peripheral blood, detection of cell growth, the number of content. The induction culture process is simple, short cycle, safe and efficient. After proliferation, the cell viability is high and the quantity is high, which can provide the basis for the clinical application of gamma delta T cells.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于免疫学细胞培养
,具体涉及一种扩增γδT细胞的方法。
技术介绍
γδT细胞是生物体内执行固有免疫功能的T细胞,其TCR(TCellreceptor)由γ和δ链组成。γδT细胞发挥生物学效应具有非HLA限制性特点,其主要的效应是溶解靶细胞的细胞毒活性和分泌不同种类的细胞因子和趋化因子。此外,作为一种特殊的APC细胞,γδT细胞也可呈递抗原给αβT细胞,γδT细胞其他重要的生物学效应还有参与募集巨噬细胞、产生维持上皮组织完整性的生长因子等。通过这些生物效应,γδT细胞可产生抗感染、抗肿瘤、免疫调节、修复损伤等功能。Vδ1、Vδ2是γδT细胞的两个主要亚群,Vδ1γδT细胞主要分布于胸腺和黏膜上皮组织,在外周血中也有少量存在,是黏膜表面最丰富的群落。Vδ1γδT细胞被认为参与组成人体的第一道防线,在固有免疫抗感染中发挥重要作用。Vδ2γδT细胞则是存在于外周血中的主要的γδT细胞,主要参与胞内病原体感染,抵抗细胞癌变发生等。目前,γδT细胞的体外诱导扩增培养方法有多种,有一些方法有效但复杂,增加了细胞培养感染的风险,有一些简便但扩增的细胞数量少,亚型单一,周期较长。培养中一些细胞分选仪器的使用以及胎牛血清等的使用也增加了临床应用安全性的风险。因此,为了更好的将γδT细胞用于临床治疗应用,如何在短时间内诱导扩增大量的γδT细胞,如何提高培养过程及使用药品的安全性,以及如何有效的扩增γδT细胞的多种亚群,提高γδT细胞免疫治疗效果,具有重要的临床应用意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种短期内高效诱导扩增大量γδT细胞的培养方法,并且此方 ...
【技术保护点】
一种γδT细胞的诱导扩增培养方法,其特征在于,所述的方法是将培养孔用PAN‑γ/δ单抗进行包被后,将外周血单个核细胞加入培养孔中,使用添加IL‑2因子的培养基进行培养,从培养第5d起,在培养基中添加壳寡糖,并在培养第9d时,在培养基中添加唑来膦酸,继续培养第15d时收获细胞。
【技术特征摘要】
1.一种γδT细胞的诱导扩增培养方法,其特征在于,所述的方法是将培养孔用PAN-γ/δ单抗进行包被后,将外周血单个核细胞加入培养孔中,使用添加IL-2因子的培养基进行培养,从培养第5d起,在培养基中添加壳寡糖,并在培养第9d时,在培养基中添加唑来膦酸,继续培养第15d时收获细胞。2.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,所述的IL-2因子在培养基中的添加浓度为200U\...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘鹏飞,徐矫健,张道强,刘传杰,刘燕丽,葛淑娟,王玉娟,
申请(专利权)人:青岛麦迪赛斯医疗技术有限公司,
类型:发明
国别省市:山东;37
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