【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及神经酰胺的分离提纯，尤其涉及一种酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法。
技术介绍
1、神经酰胺是一种酰胺化的脂质，主要由长链脂肪酸和鞘磷醇胺（sphingosine）结合而成。神经酰胺在皮肤中起着关键的屏障功能，帮助皮肤维持水分平衡、防止水分流失和外部有害物质的侵入；它们有助于保护皮肤免受环境压力和刺激，并减缓皮肤的老化过程；在护肤品中添加神经酰胺可以帮助改善干燥、敏感和受损的皮肤状况。此外，神经酰胺还可以用于头发护理产品，有助于改善发质并减少头发损伤。
2、目前神经酰胺主要是化学合成；化学合成的神经酰胺可以通过一系列有机合成反应得到，其中关键步骤包括脂肪酸的酯化和鞘磷醇胺的胺化反应；这些合成方法允许在实验室中精确控制神经酰胺的结构和组成。天然神经酰胺可以从植物和动物组织中提取得到，植物来源的神经酰胺可以从含有高含量神经酰胺的植物组织中提取，如大麦、小麦、大米、玉米等，专利文献cn116034110a公开了从整个苹果和或苹果榨汁残渣提取神经酰胺或其含有物的方法和含有该神经酰胺的组合物，其需要经过水、乙醇浸泡搅拌后，再经活性炭或活性白黏土吸附剂吸附，然后再浓缩干燥得到神经酰胺浓缩液，分离提纯体系不完善，活性炭和活性白黏土除杂难度大，操作复杂成本高。动物来源的神经酰胺则可以从动物皮肤中提取，如猪皮、牛皮等；通常使用有机溶剂提取的方法，将植物或动物组织进行粉碎，然后使用有机溶剂（如氯仿、甲醇等）与粉碎组织进行萃取，得到含有神经酰胺的溶液；接下来，通过蒸发溶剂和浓缩溶液，从中提取纯化神经酰胺。结晶法能够获得高纯度的神
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的是提供一种酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，利用连续变相萃取提取，然后采用正向硅胶层析柱和反向硅胶层析柱相结合的方法，分离得到纯度较高的神经酰胺组合物。
2、为实现上述目的，本专利技术所提供的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法采用如下技术方案：
3、一种酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，用乙醇对酱油渣进行低温连续相变萃取，获得所述酱油渣的醇提取物；然后将所述醇提取物通过正向硅胶层析，再经液相色谱分离，得到神经酰胺组合物，所述液相色谱分离使用反向硅胶填柱。
4、本专利技术通过低温连续相变萃取装置，经乙醇反复回流提取神经酰胺，可以获得较高的神经酰胺提取率，且只有乙醇一种试剂，乙醇价格不贵成本低，易挥发，提取物不含试剂杂质；经过低温连续相变萃取获得的醇提取物，进入到正向硅胶层析柱中，正向硅胶吸附醇提取物中的疏水分子，纯化醇提取物得到粗提物；再进入到液相色谱分离中的反向硅胶层析柱中，分离与神经酰胺极性近似的物质，得到纯品神经酰胺组合物。
5、可选的，所述用乙醇对酱油渣进行低温连续相变萃取中，乙醇的浓度为85%~90%，所述酱油渣与所述乙醇的料液比是1:3~8；所述萃取温度是30~70℃，萃取时间是20~30min。
6、可选的，对酱油渣进行低温连续相变萃取提取是用浓度为90%的乙醇提取的，所述酱油渣与所述浓度为90%的乙醇的料液比是1:5；所述萃取温度是30℃，提取时间是30min。
7、可选的，所述正向硅胶层析采用干法上样，所述干法上样中正向硅胶与醇提取物的质量比是：3~5:1。
8、可选的，所述正向硅胶层析时，装柱的正向硅胶经石油醚和乙醇混合溶液浸泡，所述石油醚和乙醇的体积比是：100:0~20。
9、可选的，所述反向硅胶填柱中反向硅胶与样品的质量比是1000:1。
10、可选的，所述液相色谱分离中，a泵：水，b泵：纯乙醇，流速为250ml/min，洗脱时间150min。
11、可选的，所述神经酰胺组合物的洗脱时间在120~140min之间。
12、可选的，得到神经酰胺组合物后，经tlc薄层色谱分析对比，得纯化的神经酰胺组合物。
13、可选的，所述tlc薄层色谱分析的样品展开剂为：氯仿、甲醇和水，所述氯仿、甲醇和水的体积比是：91:9:1，展开时间30min。
14、本专利技术有如下有益效果：
15、1.利用连续相变萃取装置提取，得到了较高的提取率；对醇提物进行分离纯化中，采用了正向硅胶层析柱和反向硅胶层析柱相结合的方法，进行分离纯化得到了纯度较高的神经酰胺组合物。
16、2.为了分离酱油渣中神经酰胺，对样品进行乙醇提取后，利用制备液相接样，进一步分离神经酰胺，达到准确测量神经酰胺含量的目的。在提取工艺的单因素中，神经酰胺的提取率受提取时间、乙醇浓度、提取温度和料液比影响，针对这几个影响因素，以提取的固形物和点板颜色的深浅为依据，评价工艺的优劣，找出神经酰胺提取的最佳工艺。实验结果显示，使用90%的乙醇，1:5的料液比，30℃，提取30min效果最优。
17、3.将醇提物烘干得到干基的醇提物，经过正向硅胶柱层析后，分离得到神经酰胺粗提物，粗提物制备液相分离后得到纯品；然后再经tlc薄层色谱分析对比，确定神经酰胺的洗脱时间，得到精确的神经酰胺。
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1.一种酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，用乙醇对酱油渣进行低温连续相变萃取，获得所述酱油渣的醇提取物；然后将所述醇提取物通过正向硅胶层析，再经液相色谱分离，得到神经酰胺组合物，所述液相色谱分离使用反向硅胶填柱。
2.根据权利要求1所述的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，所述用乙醇对酱油渣进行低温连续相变萃取中，乙醇的浓度为85%~90%，所述酱油渣与所述乙醇的料液比是1:3~8；所述萃取温度是30~70℃，萃取时间是20~30min。
3.根据权利要求2所述的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，对酱油渣进行低温连续相变萃取提取是用浓度为90%的乙醇提取的，所述酱油渣与所述浓度为90%的乙醇的料液比是1:5；所述萃取温度是30℃，提取时间是30min。
4.根据权利要求1所述的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，所述正向硅胶层析采用干法上样，所述干法上样中正向硅胶与醇提取物的质量比是：0.6:1。
5.根据权利要求4所述的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，所述正向硅胶层析时，装柱的正向硅
6.根据权利要求4或5所述的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，所述反向硅胶填柱中反向硅胶与样品的质量比是1000:1。
7.根据权利要求6所述的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，所述液相色谱分离中，A泵：水，B泵：纯乙醇，流速为250mL/min，洗脱时间150min。
8.根据权利要求7所述的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，所述神经酰胺组合物的洗脱时间在120~140min之间。
9.根据权利要求1所述的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，得到神经酰胺组合物后，经TLC薄层色谱分析对比，得纯化的神经酰胺组合物。
10.根据权利要求9所述的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，所述TLC薄层色谱分析的样品展开剂为：氯仿、甲醇和水，所述氯仿、甲醇和水的体积比是：91:9:1，展开时间30min。
...【技术特征摘要】
1.一种酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，用乙醇对酱油渣进行低温连续相变萃取，获得所述酱油渣的醇提取物；然后将所述醇提取物通过正向硅胶层析，再经液相色谱分离，得到神经酰胺组合物，所述液相色谱分离使用反向硅胶填柱。
2.根据权利要求1所述的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，所述用乙醇对酱油渣进行低温连续相变萃取中，乙醇的浓度为85%~90%，所述酱油渣与所述乙醇的料液比是1:3~8；所述萃取温度是30~70℃，萃取时间是20~30min。
3.根据权利要求2所述的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，对酱油渣进行低温连续相变萃取提取是用浓度为90%的乙醇提取的，所述酱油渣与所述浓度为90%的乙醇的料液比是1:5；所述萃取温度是30℃，提取时间是30min。
4.根据权利要求1所述的酱油渣中神经酰胺的分离提纯方法，其特征在于，所述正向硅胶层析采用干法上样，所述干法上样中正向硅胶与醇提取物的质量比是：0.6:1。
5.根据权利要求4所述的酱油渣中神经酰胺的分离...
【专利技术属性】
技术研发人员：曹庸，李一峰，曾志安，阚启鑫，刘果，曹愚，戴伟杰，
申请(专利权)人：广东惠尔泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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