【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物检测，尤其涉及一种中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法。
技术介绍
1、非甾体类抗炎药(nsaids)是一类不含甾体结构的药物，具有抗炎解热、缓解疼痛、抗风湿、改善肌肉和关节功能等作用，在治疗动物疼痛、炎症中具有重要意义[1]。同时，nsaids还具有抗凝血的作用，常被用于在屠宰中使肉保持新鲜颜色，近年来在养殖业中的使用呈明显增长的趋势，但该类药物有一定毒性，其抑制前列腺素生成的过程也产生一定的毒副作用，可能造成消化系统和肾脏的损害。nsaids在动物源食品中残留对消费者的健康危害和抗药性问题已引起广泛关注[2-4]。但是目前在畜牧养殖中，有些不法商贩为增强药效将该类药物掺杂到中兽药制剂中，不仅容易造成动物源性食品残留问题，也严重扰乱了兽药产业的健康发展。因此，建立中兽药制剂中非法添加非甾体类药物的检测技术具有重要意义。
2、目前尚无关于兽药制剂中非法添加非甾体类抗炎药物的测定标准和研究报道。多种非甾体抗炎药的检测标准和文献主要是采用液相色谱-串联质谱法测定动物源性食品[5-11]和中成药制剂[12]。此外还有毛细管电泳法[13]、气相色谱法[14]、高效液相色谱法[15]和气相色谱-质谱法[16]用于药物含量和生物样本中几种非甾体类抗炎药物。但这些方灵敏度较差、测定的化合物种类有限，易受基质干扰。液相色谱-串联质谱法与其相比更适用于基质较为复杂的中兽药制剂。非甾体抗炎药物多为酸性化合物和中性化合物，各化合物性质差异较大，有极性和非极性，常见净化手段多采用正己烷进行除脂。但中兽药制剂含中草药成分较多，
3、[1]兽用非甾体抗炎药的应用现状[j].动物医学进展，2020，41(2):114-119.
4、[2]非甾体抗炎药物及其制剂的研究进展[j].实用中西医结合临床，2007,7(1):92-93
5、[3]非甾体抗炎药物研究进展[j].动物医学进展，2011，32(1)：77-80
6、[4]非甾体抗炎药残留检测方法研究进展[j].中国兽药杂志，2010，44(8)：42-47.
7、[5]sn/t 2190-2008进出口动物源性食品中非甾体类抗炎药残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法
8、[6]sn/t 1922-2007进出口动物源性食品中对乙酰氨基酚、邻乙酰水杨酸残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法
9、[7]hplc-ms/ms法同时测定鸡肉中40种糖皮质激素和9种非甾体抗炎药物残留[j].质谱学报,2019,40(2):123-130.
10、[8]超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法同时测定猪肝中非甾体类抗炎药残留[j].分析化学，2009,37，(3):363-368.
11、[9]磁性石墨烯分散微固相萃取-液相色谱-四极杆串联质谱法测定畜禽肉中9种非甾体抗炎剂[j].色谱,2016,34(9):850-859.
12、[10]分子印迹固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定猪肉及猪肝中14种非甾体抗炎药残留量[j].食品工业科技,2017,38(17):224-228.
13、[11]离子交换固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定动物组织中的8类非甾体抗炎药残留[j].2012,40(2):236-242.
14、[12]lc-ms/ms法测定中成药制剂中23个非甾体抗炎药[j].药物分析杂志，2012，32(2)：261-266.
15、[13]bar adsorptive microextraction(baμe)coated with mixedsorbentphases-enhanced selectivity for the determination of non-steroidalanti-inflam-matory drugs in real matrices in combination withcapilary electrophoresis[j].journal of chromatography b，2016，1008(6)：115-124.
16、[14]血液中对乙酰氨基酚复方制剂的气相色谱测定法[j].职业与健康.2008,(11):1049-1050.
17、[15]高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片的含量[j].海峡药学.2007,(07):41-42.
18、[16]气相色谱-质谱检测方法快速筛查保健食品及中成药中8种非甾体抗炎药[j].药物分析杂志.2012,(10):1847-1852.
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，方法简单、净化效果好，普适性强，为中兽药制剂中非甾体类抗炎药物的测定提供了新途径。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，包括以下步骤：
4、(1)采用甲醇分别配制对乙酰氨基酚、水杨酸、安乃近、吲哚美辛、卡洛芬、酮洛芬、托芬那酸、美洛昔康、氟尼辛、布洛芬、菲诺洛芬、甲芬那酸、双氯芬酸、吡罗昔康、二氟尼柳、萘丁美酮、舒林酸、托美汀和苯基丁氮酮的标准储备液；
5、(2)将乙酰氨基酚标准储备液、水杨酸标准储备液、安乃近标准储备液、吲哚美辛标准储备液、卡洛芬标准储备液、酮洛芬标准储备液、托芬那酸标准储备液、美洛昔康标准储备液、氟尼辛标准储备液、布洛芬标准储备液、菲诺洛芬标准储备液、甲芬那酸标准储备液、双氯芬酸标准储备液、吡罗昔康标准储备液、二氟尼柳标准储备液、萘丁美酮标准储备液、舒林酸标准储备液、托美汀标准储备液和苯基丁氮酮标准储备液等体积混合后稀释获得混合标准中间液，将所述混合标准中间液与乙腈-水溶液配制一系列浓度的混合标准工作液，对混合标准工作液进行液相色谱-串联质谱仪测定，以质量浓度为横坐标，分析物峰面积为纵坐标，绘制上述19种非甾体抗炎药的线性方程；
6、(3)中兽药制剂样品若为固体，则与甲酸乙腈溶液混合，均质处理，离心，取上清，中兽药制剂样品若为液体，则与甲酸乙腈溶液和氯化钠混合，均质处理，离心，取上清；上清液过prime hlb固相萃取柱，采用乙腈洗脱，得洗脱液；洗脱液用氮气吹干后，用乙腈-水溶液溶解，有机膜过滤，收集滤液；
7、(4)滤液进行液相色谱-串联质谱仪测定，将各非甾体抗炎药峰面积带入步骤(2)所得线性方程中，获得中兽药制剂样品中19种非甾体抗炎药的含量。
8、优选的，步骤(1)中所述乙酰氨基酚、水杨酸、安乃近、吲哚美辛、卡洛芬、酮洛芬、托芬那酸、美洛昔康、氟尼辛、布洛芬、菲诺洛芬、甲芬那酸、双氯芬酸、吡罗昔康、二氟尼柳、萘丁美酮、舒林酸、托美汀和苯基丁氮酮的标准储备液的浓度分别为0.8～1.2mg/ml。
9、优选的，步骤(2)中所述乙腈-水溶液中乙腈体本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，步骤(1)中所述乙酰氨基酚、水杨酸、安乃近、吲哚美辛、卡洛芬、酮洛芬、托芬那酸、美洛昔康、氟尼辛、布洛芬、菲诺洛芬、甲芬那酸、双氯芬酸、吡罗昔康、二氟尼柳、萘丁美酮、舒林酸、托美汀和苯基丁氮酮的标准储备液的浓度分别为0.8～1.2mg/mL。
3.如权利要求1所述中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，步骤(2)中所述乙腈-水溶液中乙腈体积浓度为15～25％。
4.如权利要求1所述中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，步骤(3)中所述中兽药制剂样品与甲酸乙腈溶液混合比例为1～3g：10～30mL，所述中兽药制剂样品与氯化钠混合比例为1～3g：2～6g，所述甲酸乙腈溶液中甲酸体积浓度为0.05～0.15％。
5.如权利要求1所述中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，步骤(3)中所述均质处理转速为8000～12000r/min，均质处理时间为0.5～1.5min，所述离心
6.如权利要求1所述中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，步骤(3)中洗脱过程中，上清液与乙腈的体积比为1～2：2～4。
7.如权利要求1所述中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，步骤(3)中所述洗脱液吹干温度为35～55℃，所述乙腈水溶液中乙腈的体积浓度为15～25％，所述有机膜孔径为0.20～0.24μm。
8.如权利要求1所述中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，所述液相色谱-串联质谱仪测定的色谱条件为：
9.如权利要求1所述中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，所述液相色谱-串联质谱仪测定的质谱条件为：电喷雾正离子扫描模式(ESI+)和电喷雾负离子扫描模式(ESI-)同时扫描，采用多反应监测(MRM)模式；
...【技术特征摘要】
1.一种中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，步骤(1)中所述乙酰氨基酚、水杨酸、安乃近、吲哚美辛、卡洛芬、酮洛芬、托芬那酸、美洛昔康、氟尼辛、布洛芬、菲诺洛芬、甲芬那酸、双氯芬酸、吡罗昔康、二氟尼柳、萘丁美酮、舒林酸、托美汀和苯基丁氮酮的标准储备液的浓度分别为0.8～1.2mg/ml。
3.如权利要求1所述中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，步骤(2)中所述乙腈-水溶液中乙腈体积浓度为15～25％。
4.如权利要求1所述中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在于，步骤(3)中所述中兽药制剂样品与甲酸乙腈溶液混合比例为1～3g：10～30ml，所述中兽药制剂样品与氯化钠混合比例为1～3g：2～6g，所述甲酸乙腈溶液中甲酸体积浓度为0.05～0.15％。
5.如权利要求1所述中兽药制剂中非甾体抗炎药的测定方法，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：张海超，王敬，魏欣欣，刘宝如，贾海涛，张婧雯，郄俊青，黄雪静，
申请(专利权)人：石家庄海关技术中心，
类型：发明
国别省市：
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