【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物含量测定，尤其涉及一种兽药制剂中β-受体激动剂类药物的测定方法。
技术介绍
1、β-受体激动剂俗称“瘦肉精”，因其能显著提高动物生长速率并增加动物的瘦肉率，常作为兽药添加剂使用。β-受体激动剂是在苯乙醇胺结构母核的基础上进行结构修饰和改造的一类化合物，根据苯环上取代基的不同分为苯胺型(如克伦特罗、西马特罗、西布特罗、溴布特罗、齐帕特罗等)、苯酚型(如莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林、利托君等)和其他型(如氯丙那林、妥布特罗、苯乙醇胺a)等。此类药物能与肾上腺素受体结合，临床上主要用于治疗哮喘、支气管痉挛等人的呼吸系统疾病。人们发现猪、牛、羊等动物在食用β-受体激动剂后，在动物体内能够增加肌肉蛋白质的合成，减缓或者减少脂肪沉积，促进脂肪的转化和分解，使营养重新分配，从而显著提高动物的瘦肉率。但是大剂量的使用该类药物容易造成其在动物体内残留蓄积，人类长期食用含β-受体激动剂残留的组织后将对人体健康产生极大的危害，会引发呼吸加深加快、头部疼痛、心率加快、胸口发闷、心悸、恶心发呕和肌肉震颤等中毒症状，会引起代谢紊乱，可诱发和加重心脑血管系统疾病患者的病情，严重时甚至导致其死亡。β-兴奋剂类及其盐、酯列为食品动物中禁止使用的药品，因此有必要加强对β-受体激动剂类物质的全面监控，为了保障食品安全和人类健康，从源头上严格把控兽药制剂的用药安全十分重要。
2、β-受体激动剂类药物的检测方法主要有液相色谱法(lc)、高效液相色谱串联质谱法(lc-ms/ms)、气相色谱串联质谱法(gc/ms)、酶联免疫法等。其中酶联免疫
3、为及时排除安全隐患、保证兽药用药的质量安全，需要建立一种简单、快速准确的测定兽药制剂中β-受体激动剂类药物残留的方法，对规范兽药制剂产业，保证用药质量安全，维护人民生命健康，扩大对外贸易，加强兽药制剂的安全检测监督具有十分重要的意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种兽药制剂中β-受体激动剂类药物的测定方法，用以解决现有技术中时间长，操作繁琐，测量准确度低的技术问题。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种兽药制剂中β-受体激动剂类药物的测定方法，包括以下步骤：
4、(1)配制混合标准溶液；将每种β-受体激动剂类药物分别溶于甲醇得到标准储备液，再将各种标准储备液溶于甲酸水溶液得到混合标准工作液，利用液相色谱-质谱法检测混合标准工作液中每种β-受体激动剂类药物的含量，得到相应的线性方程；；
5、(2)配制样品溶液：将兽药制剂样品溶于盐酸-甲醇提取液中，顺次超声、离心，得到上清液，上清液经萃取后顺次进行淋洗、洗脱、氮气吹干，最后用甲酸水溶液溶解，过滤后得到样品溶液；
6、(3)采用液相色谱-串联质谱仪测定样品溶液中β-受体激动剂类药物，结合线性方程，得到每种β-受体激动剂类药物的含量；
7、步骤(3)中，液相色谱条件为：色谱柱：f5柱，50mm×3.0mm，2.6μm；流动相：0.1％甲酸水溶液和乙腈；流速：0.3～0.5ml/min；进样量：3～10μl；柱温：30～40℃。
8、进一步的，步骤(3)中，质谱条件为：采用电喷雾正离子扫描模式和多反应监测模式；离子源温度为450～600℃，电喷雾电压为5000～6000v，气帘气压力为25～35psi，雾化气压力为40～60psi，辅助气压力为50～70psi，碰撞室入口电压为5～15v，碰撞室出口电压为5～15v。
9、进一步的，步骤(1)中，所述β-受体激动剂类药物包括克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、西马特罗、马布特罗、溴布特罗、特布他林、妥布特罗、氯丙那林、喷布特罗、齐帕特罗、西布特罗、班布特罗、克伦普罗、利托君、异克舒令、克伦塞罗、马喷特罗、福莫特罗、苯乙醇胺a、沙美特罗和酒石酸阿福特罗。
10、进一步的，每种标准储备液的质量浓度独立的为0.5～1.5mg/ml；所述混合标准溶液的质量浓度为150～250ng/ml。
11、进一步的，步骤(2)中，所述盐酸-甲醇提取液由体积比为3～5：1的盐酸和甲醇组成；所述盐酸的浓度为0.05～0.2mol/l。
12、进一步的，步骤(2)中，所述淋洗采用水和甲醇顺次淋洗；
13、所述洗脱的试剂为5％氨水-甲醇溶液，洗脱的试剂的流速为1～2ml/min；
14、所述氮气吹干的温度为35～45℃。
15、进一步的，步骤(3)中，所述液相色谱检测中的梯度洗脱的程序为：
16、0～1.0min：5％乙腈；
17、1.0～4.3min：5～50％乙腈；
18、4.3～5.0min：50～90％乙腈；
19、5.0～7.3min：90％乙腈；
20、7.3～7.4min：90～5％乙腈；
21、7.4～10.0min：5％乙腈。
22、进一步的，步骤(2)中，所述离心的转速为3500～4500r/min，时间为3～10min。
23、进一步的，步骤(2)中，所述样品溶液中的样品与盐酸-甲醇提取液的质量体积比为1g：40～50ml。
24、进一步的，步骤(1)和步骤(2)中，所述甲酸水溶液的质量浓度独立的为0.15～0.3％。
25、本专利技术的有益效果：
26、本专利技术提供一种以盐酸-甲醇溶液作为样品提取液，混合型阳离子交换固相萃取柱进行净化，乙腈与甲酸水溶液作为流动相的液相色谱-串联质谱法测定兽药制剂中β-受体激动剂类药物残留量的方法。本专利技术的测定方法灵敏度高，前处理简单，可以将残留进行定量检测、实用性广，同时还可以快速准确的测定兽药制剂中β-受体激动剂类药物的含量，对加强兽药制剂的安全监测具有重要意义。
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1.一种兽药制剂中β-受体激动剂类药物的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤(3)中，质谱条件为：采用电喷雾正离子扫描模式和多反应监测模式；离子源温度为450～600℃，电喷雾电压为5000～6000V，气帘气压力为25～35psi，雾化气压力为40～60psi，辅助气压力为50～70psi，碰撞室入口电压为5～15V，碰撞室出口电压为5～15V。
3.根据权利要求2所述的测定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述β-受体激动剂类药物包括克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、西马特罗、马布特罗、溴布特罗、特布他林、妥布特罗、氯丙那林、喷布特罗、齐帕特罗、西布特罗、班布特罗、克伦普罗、利托君、异克舒令、克伦塞罗、马喷特罗、福莫特罗、苯乙醇胺A、沙美特罗和酒石酸阿福特罗。
4.根据权利要求2或3所述的测定方法，其特征在于，每种标准储备液的质量浓度独立的为0.5～1.5mg/mL；所述混合标准溶液的质量浓度为150～250ng/mL。
5.根据权利要求4所述的测定方法，其特征在于，步骤(2)中，
6.根据权利要求5所述的测定方法，其特征在于，步骤(2)中，所述淋洗采用水和甲醇顺次淋洗；
7.根据权利要求5或6所述的测定方法，其特征在于，步骤(3)中，所述液相色谱检测中的梯度洗脱的程序为：
8.根据权利要求7所述的测定方法，其特征在于，步骤(2)中，所述离心的转速为3500～4500r/min，时间为3～10min。
9.根据权利要求8所述的测定方法，其特征在于，步骤(2)中，所述样品溶液中的样品与盐酸-甲醇提取液的质量体积比为1g：40～50mL。
10.根据权利要求8或9所述的测定方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)中，所述甲酸水溶液的质量浓度独立的为0.15～0.3％。
...【技术特征摘要】
1.一种兽药制剂中β-受体激动剂类药物的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤(3)中，质谱条件为：采用电喷雾正离子扫描模式和多反应监测模式；离子源温度为450～600℃，电喷雾电压为5000～6000v，气帘气压力为25～35psi，雾化气压力为40～60psi，辅助气压力为50～70psi，碰撞室入口电压为5～15v，碰撞室出口电压为5～15v。
3.根据权利要求2所述的测定方法，其特征在于，步骤(1)中，所述β-受体激动剂类药物包括克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、西马特罗、马布特罗、溴布特罗、特布他林、妥布特罗、氯丙那林、喷布特罗、齐帕特罗、西布特罗、班布特罗、克伦普罗、利托君、异克舒令、克伦塞罗、马喷特罗、福莫特罗、苯乙醇胺a、沙美特罗和酒石酸阿福特罗。
4.根据权利要求2或3所述的测定方法，其特征在于，每种标准储备液的质量浓度独立的为0.5～1.5...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏欣欣，康占省，张海超，王敬，贾海涛，张婧雯，郄俊青，刘宝如，黄雪静，
申请(专利权)人：石家庄海关技术中心，
类型：发明
国别省市：
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