【技术实现步骤摘要】
本领域属于生物，具体地，本专利技术涉及一种synnotch受体及其用途，更具体地，本专利技术涉及一种分离的多肽在制备synnotch合成受体中的用途、嵌合多肽、第一核酸分子、第一表达载体、重组细胞、药物组合物及其用途、激活免疫细胞的方法、追踪第一细胞-第二细胞接触的方法。
技术介绍
1、随着合成生物学的发展，通过改造细胞使之可以识别细胞外特定的信号，并在改造的细胞中传递识别到的信号，进而做出人工设计的反应已经成为现实，并已经逐渐在生物医疗领域展开了应用。如嵌合抗原受体(car)技术在临床治疗中的应用，除此之外，在2016年，wend ell a.lim团队基于notch信号通路开发出了一套synnotch受体系统，该系统同样可以识别细胞膜表面配体，并且其信号输出并不局限于单纯的免疫细胞激活信号，可以实现多种不同的信号输出类型，如特定基因的表达激活与抑制等。该受体系统可以实现不同输入信号与输出信号的多种组合，且同一体系(细胞)内的多组系统间具有正交性；同时在众多细胞中均可运行，具有普适性；同时具有简易性和可调控性等诸多优秀特征，是应用合成生物学对细胞进行改造的一个强力工具。
2、生物学中，传统的notch信号通路(系统)包括notch对应的配体、notch分子和notch调控的下游基因。其中notch分子是一个跨膜分子，其可以分为胞外结构、跨膜结构域和胞内结构域3个部分。其胞外结构域与对应的notch配体结合后，配体所在的细胞出现胞吞活动，拉扯notch分子，使notch分子的胞外结构域上的s2蛋白酶切割位点暴露出来，
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本专利技术提供了一种synnotch受体，该synnotch受体可增强其对下游基因的激活能力和减少本底泄露激活水平。
2、本专利技术是基于专利技术人的下列发现而完成的：
3、synnotch系统功能十分强大，但是目前常用的初始版本synnotch系统(又称synnotch合成受体、synnotch)具有如下缺点：第一，初始版本synnotch被激活后，其下游转录表达调控能力并不是很强，即激活下游基因的表达量并不很高，会局限synnotch的使用，特别是针对需要下游基因有较高的表达量才能发挥效用的情况。第二，初始版本synnotch的本底泄露水平较高，对于下游需要严谨调控的基因，其较高水平的泄露表达可能会导致synnotch分子开关的失效，分子表达线路会直接越过synnotch分子开关实现表达。
4、然而，专利技术人经过试验意外发现，上述问题的关键点在于synnotch分子的跨膜结构域存在不足。初始版本synnotch合成受体选择了小鼠来源notch分子的跨膜结构域来作为synnotch合成受体的跨膜结构域。考虑到不同种属来源的notch跨膜结构域上所携带的s2和s3切割序列存在差异，以及不同物种来源的s2和s3切割酶存在的构象和序列偏好性，在不同物种的细胞中，使用不同的跨膜结构域所构建的synnotch合成受体其激活效率和泄露效率必然有所差异。专利技术人以用synnotch合成受体改造人源细胞为最终目的，在试验过程中意外发现选择热带爪蟾的notch跨膜结构域，可以提高synnotch合成受体对下游基因转录激活的能力和效率，以及降低synnotch合成受体的本底泄露激活，使synnotch合成受体能够更加有效的发挥作用。
5、因此，在本专利技术的一个方面，本专利技术提出了一种分离的多肽在制备synnotch合成受体中的用途，所述分离的多肽与来源于热带爪蟾(xenopus tropicalis)的notch受体蛋白的跨膜区具有至少80％的同一性。专利技术人发现，选择热带爪蟾的notch受体蛋白的跨膜区制备的synnotch合成受体，可以提高其对下游基因转录激活的能力和效率，降低synnotch合成受体的本底泄露。
6、本专利技术的另一方面，本专利技术提出了一种嵌合多肽。根据本专利技术的实施例，所述嵌合多肽包括：胞外区，所述胞外区具有结合第一分子活性；跨膜区，所述跨膜区的n端与所述胞外区的c端相连；胞内区，所述胞内区的n端与所述跨膜区的c端相连；其中，所述跨膜区包括分离的多肽，所述分离的多肽与来源于热带爪蟾的notch受体蛋白的跨膜区具有至少80％的同一性。本专利技术的嵌合多肽选择热带爪蟾的notch受体蛋白的跨膜区作为嵌合多肽(即为synnotch合成受体)的跨膜区，可以提高嵌合多肽对下游基因转录激活的能力和效率，以及降低嵌合多肽的本底泄露。
7、在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种第一核酸分子。根据本专利技术的实施例，所述第一核酸分子编码权利要求前述的嵌合多肽。根据本专利技术实施例的第一核酸分子所编码前述的嵌合多肽。
8、在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种第一表达载体。根据本专利技术的实施例，所述第一表达载体携带前述的第一核酸分子。本专利技术的第一表达载体导入合适的接收细胞后，可实现前述的嵌合多肽的表达。
9、在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种重组细胞。根据本专利技术的实施例，所述重组细胞包括：携带前述的第一核酸分子或前述的第一表达载体；或，表达前述的嵌合多肽。本专利技术的重组细胞可有效地表达前述的嵌合多肽。
10、在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种药物组合物。根据本专利技术的实施例，所述药物组合物包括前述的嵌合多肽、前述的第一核酸分子、前述的第一表达载体或前述的重组细胞。由前可知，表达上述嵌合多肽的细胞可识别第一分子，其在结合第一分子后可以实现多种不同的信号输出类型，如特定基因的表达激活与抑制等，或者采用表达嵌合多肽的免疫细胞在接触第一分子后，可分泌具有治疗作用的因子(如单链抗体、细胞因子等)，用于抗肿瘤；并且，第一核酸分子和第一表达载体可在细胞(例如免疫细胞)表达嵌合多肽，本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.分离的多肽在制备SynNotch合成受体中的用途，所述分离的多肽与来源于热带爪蟾(Xenopus tropicalis)的Notch受体蛋白的跨膜区具有至少80％的同一性；
2.一种嵌合多肽，其特征在于，包括：
3.根据权利要求2所述的嵌合多肽，其特征在于，所述分离的多肽与来源于热带爪蟾(Xenopus tropicalis)的Notch受体蛋白的跨膜区具有100％的同一性；
4.一种第一核酸分子，其特征在于，所述第一核酸分子编码权利要求2～3任一项所述的嵌合多肽；
5.一种第一表达载体，其特征在于，携带权利要求4所述的第一核酸分子；
6.一种重组细胞，其特征在于，包括：
7.一种药物组合物，其特征在于，包括权利要求2～3任一项所述的嵌合多肽、权利要求4所述的第一核酸分子、权利要求5所述的第一表达载体或权利要求6所述的重组细胞；
8.权利要求2～3任一项所述的嵌合多肽、权利要求4所述的第一核酸分子、权利要求5所述的第一表达载体、权利要求6所述的重组细胞或权利要求7所述的药物组合物在制备药物中用
9.一种激活免疫细胞的方法，其特征在于，包括：
10.一种追踪第一细胞-第二细胞接触的方法，其特征在于，包括：
...【技术特征摘要】
1.分离的多肽在制备synnotch合成受体中的用途，所述分离的多肽与来源于热带爪蟾(xenopus tropicalis)的notch受体蛋白的跨膜区具有至少80％的同一性；
2.一种嵌合多肽，其特征在于，包括：
3.根据权利要求2所述的嵌合多肽，其特征在于，所述分离的多肽与来源于热带爪蟾(xenopus tropicalis)的notch受体蛋白的跨膜区具有100％的同一性；
4.一种第一核酸分子，其特征在于，所述第一核酸分子编码权利要求2～3任一项所述的嵌合多肽；
5.一种第一表达载体，其特征在于，携带权利要求4所述的第一核...
【专利技术属性】
技术研发人员：王烃，张彩，胡渊，陈敏华，谢思奇，
申请(专利权)人：上海恩凯细胞技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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