【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于免疫治疗，具体涉及一种甲型流感病毒cd8+t细胞抗原表位肽及其应用。
技术介绍
1、甲型流行性感冒病毒(influenza a virus,iav，以下简称甲型流感病毒)引起的季节性流感及其并发症依然是人类健康的重大威胁。据世界卫生组织统计，全球每年季节性流感的感染率高达5～15％，约3亿4千万到10亿人口感染流感，有高达25-50万人死于流感，死亡率达到0.1％。虽然大多数地区的流感爆发于冬季，但是对于气候温暖地区，全年任何时刻都可能有流感。因此，流感依然是严重威胁人类健康的，特别是儿童、老人、孕妇和免疫功能低下人群的重要疾病，加强对流感相关的研究依然具有重大的科学和社会意义。
2、由于有效抗病毒药物的缺失，对流感及其并发症的治疗主要是对症治疗。疫苗接种是目前比较有效的预防措施，多以诱导机体主动产生保护性抗体为主。但是由于甲型流感病毒是单链反义rna病毒，极易发生变异，产生抗原漂移(antigenic drift)和抗原转变(antigenic shift)，使中和性抗体失去效应，从而导致疫苗失效。相对应的，细胞免疫应答识别高度保守的递呈抗原，因此在不同的甲型流感病毒亚型之间呈现高效的交叉保护能力。譬如，甲型流感病毒(iav)基质蛋白1(matrix protein 1，m1)58到66位gilgfvftl(m158-66 gil，简称gil)特异性的cd8+t细胞免疫应答被发现占据了高达80％的抗甲型流感病毒免疫应答。因此，研究抗甲型流感病毒的细胞免疫应答有望更好地理解抗病毒免疫的机制，为研制广谱高
3、鉴于当前甲型流感病毒变异不断出现，为将来开发通用型甲型流感病毒疫苗和广谱治疗药物提供了契机。通用疫苗是一类选择即使病毒抗原发生变异后仍能有效保护免疫人群特性的广谱疫苗。因此，开发出在甲型流感病毒发生各类变异后，依旧能够给疫苗免疫人群提供有效免疫保护的通用疫苗以及广谱治疗性药物迫在眉睫。
4、研究显示，t细胞免疫应答在病毒感染后机体抗病毒防御以及机体免疫病理损伤过程中发挥了重要的作用，尤其是cd8+t细胞，其抗原特异性免疫活性11年后依然存在，说明了cd8+t细胞免疫应答在抗甲型流感病毒免疫防御中的重要作用及其在疫苗研发中的重要地位。cd8+t细胞免疫应答的第一步就是t细胞通过其表面的抗原识别受体特异性识别被病毒感染的细胞所递呈的抗原表位肽。因此，抗原表位肽是t细胞特异性识别病毒、发挥免疫保护作用的重要关键分子，是免疫检测、免疫治疗和疫苗研发的关键靶向分子。
5、cd8+t细胞通过t细胞受体(tcr)识别pmhc活化，杀灭病毒感染细胞、清除病毒，从而发挥抗病毒的细胞免疫作用。因此，鉴定可以有效活化t细胞抗原表位肽，在甲型流感病毒病毒抗原发生变异后仍能诱导有效t细胞免疫保护，是开发甲型流感病毒通用型疫苗和广谱治疗性药物的关键之一。
6、免疫逃逸是免疫抑制病原体通过其结构和非结构产物，拮抗、阻断和抑制机体的免疫应答。甲型流感病毒因为经常地持续性地发生突变，产生了大量的变异株，严重的威胁了疫苗的免疫屏障效果。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题是目前在甲型流感病毒领域尚没有开发一种用于甲型流感病毒通用疫苗的t细胞抗原表位肽。
2、本专利技术的技术方案是一种甲型流感病毒cd8+t细胞抗原表位肽，其氨基酸序列如seq id no.3所示。
3、进一步的，本专利技术还提供了编码所述抗原表位肽的核酸分子。
4、本专利技术还提供了含有所述抗原表位肽的pmhc复合物。
5、进一步的，所述pmhc复合物由hla-a2重链、hla-a2轻链β2m和所述抗原表位肽复性得到。
6、其中，hla-a2重链、hla-a2轻链β2m和所述抗原表位肽的摩尔比为1︰2︰10。
7、本专利技术还进一步提供了一种抗原肽-抗原递呈细胞复合物，为表面负荷所述抗原表位肽的抗原递呈细胞。
8、其中，所述抗原递呈细胞为cd8+t细胞。
9、优选的，所述cd8+t细胞为t2-a2细胞。
10、本专利技术还提供了上述抗原表位肽、编码所述抗原表位肽的核酸分子、pmhc复合物和/或抗原肽-抗原递呈细胞复合物在制备甲型流感病毒药物中的应用。
11、本专利技术还提供了上述抗原表位肽、编码所述抗原表位肽的核酸分子、pmhc复合物和/或抗原肽-抗原递呈细胞复合物在筛选甲型流感病毒药物中的应用。
12、本专利技术还进一步提供了上述抗原表位肽、编码所述抗原表位肽的核酸分子、pmhc复合物和/或抗原肽-抗原递呈细胞复合物在制备甲型流感病毒疫苗中的应用。
13、本专利技术还进一步提供了上述抗原表位肽、编码所述抗原表位肽的核酸分子、pmhc复合物和/或抗原肽-抗原递呈细胞复合物在制备评估甲型流感病毒疫苗接种效果的药物的应用。
14、本专利技术的有益效果：本专利技术提供了一种甲型流感病毒t细胞抗原表位肽，其具有很强的免疫原性，能诱导抗原特异性的cd8+t细胞；其可以和hla-a2重链和hla-a2轻链β2m蛋白组装成pmhc复合物；或直接负荷到抗原递呈细胞，能活化t细胞，有效诱导t细胞免疫，避免甲型流感病毒突变株的免疫逃逸，并在流感疫苗接种者和康复者中均可检测到特异性的cd8+t细胞，可用于甲型流感病毒通用疫苗研发、制备和药物研发、临床治疗。
15、本专利技术还利用该甲型流感病毒cd8+t细胞抗原表位肽制备成带有pe荧光通道的pmhc复合物，可以用于甲型流感病毒疫苗接种者和感染康复者外周血内抗原特异性t细胞的检测，并用于体外的t细胞活化实验，这些甲型流感病毒cd8+t细胞抗原表位肽可以用于制备针对各种甲型流感病毒突变株的通用疫苗、甲型流感病毒相关的免疫检测以及广谱治疗性药物。这些甲型流感病毒cd8+t细胞抗原表位肽制备成带有pe荧光通道的pmhc复合物，或直接负荷到抗原递呈细胞，从而活化t细胞，可用于甲型流感病毒疫苗研发、制备和药物研发、临床治疗，可应用于：
16、1)甲型流感病毒疫苗的研发和制备：甲型流感病毒发生变异后，该多个t细胞表位能诱导机体产生免疫应答生成抗原特异性t细胞。故该t细胞表位是甲型流感病毒通用疫苗的候选抗原表位肽。
17、2)检测是否具有抵抗甲型流感病毒感染的细胞免疫功能：待检者体内检测到甲型流感病毒抗原特异性t细胞，代表机体已经产生了t细胞免疫功能，根据该抗原表位肽制备成荧光通道的pmhc复合物标记的抗原特异性cd8+t的比例，可以评价机体t细胞免疫功能强弱及对甲型流感病毒感染可能性。
18、3)评估疫苗接种后的效果：接种者体内检测到甲型流感病毒抗原特异性t细胞，代表机体已经产生了t细胞免疫功能，根据其比例，可以评估机体再次感染甲型流感病毒可能性。
19、4)监测病情：可用于对密切接触者、医学观察者、疑似和确诊患者的病情变化监测。
20、5)预后判断：如果机体不能产本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种甲型流感病毒CD8+T细胞抗原表位肽，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ IDNo.3所示。
2.编码权利要求1所述抗原表位肽的核酸分子。
3.含有所述权利要求1所述抗原表位肽的pMHC复合物。
4.根据权利要求3所述所述pMHC复合物，其特征在于：由HLA-A2重链、HLA-A2轻链β2m和所述抗原表位肽复性得到。
5.根据权利要求4所述所述pMHC复合物，其特征在于：HLA-A2重链、HLA-A2轻链β2m和所述抗原表位肽的摩尔比为1︰2︰10。
6.一种抗原肽-抗原递呈细胞复合物，其特征在于：为表面负荷权利要求1所述抗原表位肽的抗原递呈细胞。
7.根据权利要求6所述抗原肽-抗原递呈细胞复合物，其特征在于：所述抗原递呈细胞为CD8+T细胞。
8.根据权利要求7所述抗原肽-抗原递呈细胞复合物，其特征在于：所述CD8+T细胞为T2-A2细胞。
9.权利要求1所述抗原表位肽、权利要求2所述编码抗原表位肽的核酸分子、权利要求3～5任一项pMHC复合物和/或权利要求6～8任一项所述抗原
10.权利要求1所述抗原表位肽、权利要求2所述编码抗原表位肽的核酸分子、权利要求3～5任一项pMHC复合物和/或权利要求6～8任一项所述抗原肽-抗原递呈细胞复合物在制备甲型流感病毒疫苗或评估甲型流感病毒疫苗接种效果的药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种甲型流感病毒cd8+t细胞抗原表位肽，其特征在于：其氨基酸序列如seq idno.3所示。
2.编码权利要求1所述抗原表位肽的核酸分子。
3.含有所述权利要求1所述抗原表位肽的pmhc复合物。
4.根据权利要求3所述所述pmhc复合物，其特征在于：由hla-a2重链、hla-a2轻链β2m和所述抗原表位肽复性得到。
5.根据权利要求4所述所述pmhc复合物，其特征在于：hla-a2重链、hla-a2轻链β2m和所述抗原表位肽的摩尔比为1︰2︰10。
6.一种抗原肽-抗原递呈细胞复合物，其特征在于：为表面负荷权利要求1所述抗原表位肽的抗原递呈细胞。
7.根据权利要求6所述抗...
【专利技术属性】
技术研发人员：肖潺潺，陈国兵，任之尧，李淑敏，高文，蒋伟，罗钧洪，王鹏程，高利娟，龙泽，
申请(专利权)人：暨南大学附属第六医院东莞市东部中心医院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。