【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及多肽药物制备，具体来说，涉及一种提高多肽原料药稳定性的方法。
技术介绍
1、人体内存在各种各样的多肽，其参与人体的各种生理功能的调控，多肽是由氨基酸以肽键的形式联接在一起的化合物，已经被证明了是生理活性强、免疫原性低、疗效高、使用安全的一类药物，全球有70种以上的多肽药物。
2、多肽药物在人体内半衰期短，产品不稳定，容易被降解，目前大多数为注射剂，提高多肽稳定性的方法包括化学修饰、成环等，近年将多肽药物做成缓控释微球成了研究热点，目的是提高药物作用时间，降低药物在体内的衰减速度。
3、然而，医药人员把注意力集中到制剂的剂型上，却很少关注原料药稳定性的改善。多肽的氨基酸结构本身容易降解，对湿、光、热、酸、碱、氧化均比较敏感，多肽药物含有少量水分、补偿离子等，均影响药物的稳定性，使得药物容易降解，并且不便于对多肽原料药粗品进行多次纯化和除去有机溶剂，使得不能完全去除杂质，降低了多肽的纯度，增加了不稳定因素的影响，而且不能去除引起降解的溶剂，从而使多肽处于不稳定状态，进而降低了其长期储存的稳定性。
4、针对相关技术中的问题，目前尚未提出有效的解决方案。
技术实现思路
1、针对相关技术中的问题，本专利技术提出一种提高多肽原料药稳定性的方法，以克服现有相关技术所存在的上述技术问题。
2、为此，本专利技术采用的具体技术方案如下：
3、一种提高多肽原料药稳定性的方法，该提高多肽原料药稳定性的方法包括以下步骤：
5、s2、将得到的首次主峰溶液，经旋转蒸发浓缩后，再次注入亲和色谱进行二次纯化，收集得到二次主峰溶液；
6、s3、将二次主峰溶液经旋转蒸发除去有机溶剂后，得到去掉有机溶剂后的多肽原料药溶液；
7、s4、将去掉有机溶剂后的多肽原料药溶液进行冻干，得到多肽原料药成品；
8、s5、对多肽原料药成品进行包装，封装在无氧的环境中，减少氧化反应的风险。
9、进一步的，所述选取多肽原料药粗品，配制成粗品溶液，注入亲和色谱进行首次纯化，并收集得到首次主峰溶液包括以下步骤：
10、s11、将选取的多肽原料药粗品溶解在预设缓冲液中；
11、s12、打开色谱设备的进样阀，使配制成的粗品溶液流向填充了亲和介质的色谱柱中；
12、s13、当粗品溶液完全注入后，并进行首次冲洗，去除非特异性的或弱吸附的物质；
13、s14、完成首次冲洗后，对洗脱液的条件进行首次改变，并使多肽从色谱柱中脱附出来；
14、s15、根据洗脱峰的变化，通过探测器收集洗脱出的多肽溶液的首次主峰溶液。
15、进一步的，所述将得到的首次主峰溶液，经旋转蒸发浓缩后，再次注入亲和色谱进行二次纯化，收集得到二次主峰溶液包括以下步骤：
16、s21、将收集得到的首次主峰溶液放入旋转蒸发器中，进行蒸发浓缩，得到浓缩后的多肽溶液；
17、s22、将蒸发浓缩后的多肽溶液再次注入亲和色谱柱中，并进行二次冲洗；
18、s23、完成二次冲洗后，对洗脱液的条件进行二次改变，使多肽从色谱柱中脱附出来；
19、s24、根据洗脱峰的变化，收集洗脱出的多肽溶液的二次主峰溶液。
20、进一步的，所述将二次主峰溶液经旋转蒸发除去有机溶剂后，得到去掉有机溶剂后的多肽原料药溶液包括以下步骤：
21、s31、将收集得到二次主峰溶液放入旋转蒸发器中，使溶液中的有机溶剂得到蒸发并除去；
22、s32、旋转蒸发结束后，得到去掉有机溶剂后的多肽原料药溶液。
23、进一步的，所述将收集得到二次主峰溶液放入旋转蒸发器中，使溶液中的有机溶剂得到蒸发并除去包括以下步骤：
24、s311、将收集得到的二次主峰溶液转移到旋转蒸发器中，并设置预设温度、预设旋转速度及预设压强；
25、s312、旋转蒸发过程中使用在线密度计监测二次主峰溶液密度的变化情况；
26、s313、当密度值稳定时，取样进行tlc检测，并确认有机溶剂己蒸发完全。
27、进一步的，所述旋转蒸发结束后，得到去掉有机溶剂后的多肽原料药溶液包括以下步骤：
28、s321、旋转蒸发结束后，将二次主峰溶液从旋转蒸发器中转移出，通过目测检查溶液的颜色和粘稠度，并与旋转蒸发前对比，判断有机溶剂是否减少；
29、s322、取预设量溶液进行tlc检测，确认无有机溶剂残留；
30、s323、使用hplc对溶液进行检测，记录保留时间和峰形，并评估有机溶剂是否被完全去除；
31、s324、若确定有有机溶剂残留，则需要重新进行旋转蒸发，若确定没有有机溶剂残留，则使用0.22μm过滤器对去除有机溶剂后的多肽原料药溶液进行过滤；
32、s325、将过滤后的多肽原料药溶液移入烧杯中进行密封保存，得到去掉有机溶剂后的多肽原料药溶液。
33、进一步的，所述取预设量溶液进行tlc检测，确认无有机溶剂残留包括以下步骤：
34、s3221、从旋转蒸发后去除有机溶剂的多肽原料药溶液中取预设量的多肽原料药溶液；
35、s3222、使用微量采样器吸取多肽原料药溶液，并滴在tlc板的起始线处；
36、s3223、将滴有多肽原料药溶液的tlc板放入展开槽中，加入预设量的氯仿；
37、s3224、取出tlc板并晾干，然后将tlc板放入紫外灯箱中，在254nm uv光下观察记录结果；
38、s3225、比较多肽原料药溶液滴在tlc板上的rf值与标准有机溶剂的rf值，若无一致的斑点，则表明样品中无有机溶剂残留；
39、s3226、重复步骤s3221至步骤s3225，进行若干次独立的tlc检测，以确保结果一致可靠。
40、进一步的，所述使用hplc对溶液进行检测，记录保留时间和峰形，并评估有机溶剂是否被完全去除包括以下步骤：
41、s3231、准备hplc仪器，并安装预设的分析色谱柱，配置移动相；
42、s3232、使用注射器取预设量的多肽原料药溶液；
43、s3233、配置预设的梯度洗脱程序，选择预设检测波长，并开始检测；
44、s3234、记录多肽原料药溶液的色谱图，分析有机溶剂对应峰的保留时间和峰形；
45、s3235、与旋转蒸发前多肽原料药溶液色的谱图进行比较，判断有机溶剂峰是否消失；
46、s3236、重复s3231至步骤s3235，进行若干次独立检测，确保结果一致可靠。
47、进一步的，所述将去掉有机溶剂后的多肽原料药溶液进行冻干，得到多肽原料药成品包括以下步骤：
48、s41、将去掉有机溶剂后的多肽原料药溶液转移到预先清洗干燥的本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，该提高多肽原料药稳定性的方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，所述选取多肽原料药粗品，配制成粗品溶液，注入亲和色谱进行首次纯化，并收集得到首次主峰溶液包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，所述将得到的首次主峰溶液，经旋转蒸发浓缩后，再次注入亲和色谱进行二次纯化，收集得到二次主峰溶液包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，所述将二次主峰溶液经旋转蒸发除去有机溶剂后，得到去掉有机溶剂后的多肽原料药溶液包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，所述将收集得到二次主峰溶液放入旋转蒸发器中，使溶液中的有机溶剂得到蒸发并除去包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，所述旋转蒸发结束后，得到去掉有机溶剂后的多肽原料药溶液包括以下步骤：
7.根据权利要求6所
8.根据权利要求7所述的一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，所述使用HPLC对溶液进行检测，记录保留时间和峰形，并评估有机溶剂是否被完全去除包括以下步骤：
9.根据权利要求8所述的一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，所述将去掉有机溶剂后的多肽原料药溶液进行冻干，得到多肽原料药成品包括以下步骤：
10.根据权利要求9所述的一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，所述对多肽原料药成品进行包装，封装在无氧的环境中，减少氧化反应的风险包括以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，该提高多肽原料药稳定性的方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，所述选取多肽原料药粗品，配制成粗品溶液，注入亲和色谱进行首次纯化，并收集得到首次主峰溶液包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，所述将得到的首次主峰溶液，经旋转蒸发浓缩后，再次注入亲和色谱进行二次纯化，收集得到二次主峰溶液包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，所述将二次主峰溶液经旋转蒸发除去有机溶剂后，得到去掉有机溶剂后的多肽原料药溶液包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的一种提高多肽原料药稳定性的方法，其特征在于，所述将收集得到二次主峰溶液放入旋转蒸发器中，使溶液中的有机溶剂得到蒸发并除去包括以下...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙浩，向齐琦，徐健峰，肖承涛，王林顺鑫，张瑾，苏晴，张云娟，
申请(专利权)人：南京羚诺生物医药技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：
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