【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因工程，特别是涉及一种筛选和改造具有玉米赤霉烯酮内酯酶活性的酶的方法以及所得到的突变体酶，更具体的，关于其重组表达载体与重组表达菌株的构建，以及它们的制备方法和应用。
技术介绍
1、玉米赤霉烯酮(zhd)是一种重要的雌激素毒素，广泛存在于许多粮食作物中，严重影响粮食的安全性和产量。
2、目前，除了采取避免真菌感染、合理使用杀菌剂等预防措施外，发展安全高效的zhd降解方法是控制zhd污染的关键。利用酶法降解zhd是一条环境友好的途径。已经发现和研究了一些可以降解zhd的酶，其中玉米赤霉烯酮内酯酶(zhd)就是一种关键酶，它可以特异性地水解zhd分子，将其转化为无毒代谢产物。
3、zhd属于α/β-螺旋蛋白酶超家族，采用α/β液泡的三维结构。其催化机制由三步反应组成：1)底物与酶活性中心中的ser残基发生酯化作用；2)glu或asp残基对酯键进行酸解催化；3)酶与底物产物断离。zhd表现出较高的底物专一性，主要识别和作用于zhd和其类似化合物。然而，zhd的降解活性和效率还不足以满足实际应用需求。p>
4、虽然z本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种玉米赤霉烯酮内酯酶CrZHD，其特征在于，所述玉米赤霉烯酮内酯酶CrZHD的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。
2.一种玉米赤霉烯酮内酯酶基因crzhd，用于编码如权利要求1所述的玉米赤霉烯酮内酯酶CrZHD，其特征在于，所述玉米赤霉烯酮内酯酶基因crzhd的核苷酸序列与SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列具有95％以上的同一性。
3.根据权利要求2所述的玉米赤霉烯酮内酯酶基因crzhd，其中，所述玉米赤霉烯酮内酯酶基因crzhd的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
4.一种重组表达载体，其特征在于，包括如权利...
【技术特征摘要】
1.一种玉米赤霉烯酮内酯酶crzhd，其特征在于，所述玉米赤霉烯酮内酯酶crzhd的氨基酸序列如seq id no：1所示。
2.一种玉米赤霉烯酮内酯酶基因crzhd，用于编码如权利要求1所述的玉米赤霉烯酮内酯酶crzhd，其特征在于，所述玉米赤霉烯酮内酯酶基因crzhd的核苷酸序列与seq id no：2所示的核苷酸序列具有95％以上的同一性。
3.根据权利要求2所述的玉米赤霉烯酮内酯酶基因crzhd，其中，所述玉米赤霉烯酮内酯酶基因crzhd的核苷酸序列如seq id no：2所示。
4.一种重组表达载体，其特征在于，包括如权利要求2或3所述的玉米赤霉烯酮内酯酶基因crzhd。
5.权利要求4所述的重组表达载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：将权利要求2或3所述的玉米赤霉烯酮内酯酶基因crzhd的两端分别引入限制性内切酶ecor ...
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